在不同的鹽濃度條件下,AAV病毒載體的存在形式不同。低鹽濃度條件下,AAV病毒顆粒表面會(huì)通過電荷作用等非特異結(jié)合到HCD上,從而產(chǎn)生病毒顆粒團(tuán)聚現(xiàn)象。隨著溶液鹽濃度上升,AAV病毒顆粒與HCD的離子相互作用會(huì)被破壞,AAV病毒顆粒會(huì)逐漸解離。當(dāng)鹽濃度升到更高范圍(>400mM左右),AAV病毒顆粒與HCD的結(jié)合更弱,AAV顆粒更穩(wěn)定。因此,在高鹽濃度溶液中,AAV顆粒更加穩(wěn)定,且有數(shù)據(jù)表明高鹽濃度不會(huì)削弱AAV的侵染能力。所以,我們推薦提高AAV病毒生產(chǎn)中的鹽濃度。無錫中鹽核酸酶產(chǎn)品質(zhì)量哪家好呢,歡迎咨詢上海倍篤生物 。浙江生理鹽條件中鹽核酸酶

殘留的宿主DNA是生產(chǎn)中產(chǎn)生的雜質(zhì),其存在潛在的致瘤性、傳染性和免疫原性等風(fēng)險(xiǎn)。相關(guān)研究表明,基因的大小普遍在200bp以上,因此大于200bp有可能會(huì)有一定的致病性,而且殘留DNA片段越大,生物制品的風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)越高。因此,各國監(jiān)管機(jī)構(gòu)對其提出了嚴(yán)格要求。美國食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)在《關(guān)于人類基因zhiliao新產(chǎn)品生產(chǎn)指導(dǎo)文件》中明確指出HCD的片段要小于200bp。2022年5月,國家藥品監(jiān)督管理局藥品評(píng)審中心(CDE)發(fā)布的《體內(nèi)基因藥物產(chǎn)品藥學(xué)研究與評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則(試行)》中也明確指出需對DNA殘留量和殘留片段大小進(jìn)行控制,建議盡量將DNA殘留片段的大小控制在200bp以下。重慶M-SAN HQ中鹽核酸酶ArcticZymes精于規(guī)?;a(chǎn)獨(dú)特特性的酶產(chǎn)品,于2005年在證券交易所上市。

一般來說,生物生產(chǎn)工藝用的核酸酶以BenzonaseTM(BenzonaseTM是Merck的注冊商標(biāo))為主,能高效降解任何形式(雙鏈、單鏈、線狀、環(huán)狀)的DNA和RNA。該酶來自于大自然界普遍存在的S.Marcescen,通過E.coli發(fā)酵生產(chǎn)得到。該酶的適宜反應(yīng)條件是低鹽濃度范圍(<100mM鹽濃度),且酶活隨著鹽濃度上升而下降,在300mM鹽濃度時(shí)酶活幾乎喪失。對于細(xì)胞基因藥物常用的兩種病毒載體LV和AAV,LV由于含有脂包膜結(jié)構(gòu)一般都在生理鹽條件下存在,而AAV在高鹽條件下不易團(tuán)聚、更穩(wěn)定。而在生理鹽濃度及更高濃度條件下,Benzonase活性受到抑制。
慢病毒載體既可以轉(zhuǎn)導(dǎo)分裂細(xì)胞也可以轉(zhuǎn)導(dǎo)非分裂細(xì)胞,被認(rèn)為是安全的,并且可以提供長期的轉(zhuǎn)基因表達(dá),是目前較通用的基因轉(zhuǎn)移方法之一。因慢病毒載體能有效地轉(zhuǎn)導(dǎo)靶細(xì)胞,如造血干細(xì)胞和T細(xì)胞,在細(xì)胞和基因藥物中的應(yīng)用越來越guang泛。源自人類胚胎腎細(xì)胞的HEK293細(xì)胞系是成熟的生產(chǎn)LV的系統(tǒng),因?yàn)樗鼈兎浅_m合懸浮培養(yǎng)并且易于轉(zhuǎn)染。在無血清培養(yǎng)基中的懸浮培養(yǎng)在大規(guī)模生產(chǎn)中具有優(yōu)勢,因?yàn)樗伺沃g的差異并降低了不定因子污染的風(fēng)險(xiǎn)。M-SAN HQ中鹽核酸酶在細(xì)胞培養(yǎng)條件或生理鹽濃度下具有較高活性。

ArcticZymes Technologies推出了SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶,為生物工藝領(lǐng)域提供了革新性、更高效的方案來解決大規(guī)模生產(chǎn)中核酸殘留問題。此前,受限于鹽濃度和核酸酶活性的負(fù)調(diào)控效應(yīng),行業(yè)在核酸殘留去除效果和酶成本之間尋找平衡,更多的是讓工藝選擇適應(yīng)酶。此后,行業(yè)可以根據(jù)工藝具體需求而選擇更合適的酶產(chǎn)品,既能達(dá)到理想的去除效果,又能輕松控制酶用量及綜合成本,真正實(shí)現(xiàn)讓酶適應(yīng)工藝選擇。SAN HQ和M-SAN HQ為行業(yè)提供更高效率的解決方案。常州中鹽核酸酶哪家好呢,歡迎咨詢上海倍篤生物 。江蘇生理鹽條件中鹽核酸酶70950-202
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ArcticZymes Technologies提供獨(dú)特特性的鹽活性核酸酶(Salt Active Nucleases,SANs)系列產(chǎn)品,主要包含SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶。這兩款酶都是非特異核酸內(nèi)切酶,跟Benzonase一樣能高效降解任何形式(雙鏈、單鏈、線狀、環(huán)狀)的DNA和RNA;都來自于深海microbes,通過Pichia pastoris發(fā)酵生產(chǎn)得到。這兩款酶的區(qū)別在于發(fā)揮酶活的適宜鹽濃度不同,——M-SAN HQ中鹽核酸酶的適宜鹽濃度在175mM-250mM,而SAN HQ高鹽核酸酶的適宜鹽濃度在400mM-600mM。浙江生理鹽條件中鹽核酸酶
對于含包膜的病毒載體,如慢病毒LV、逆轉(zhuǎn)錄病毒RV等,在細(xì)胞培養(yǎng)上清液中收獲。而M-SAN HQ中鹽...
【詳情】在生物工藝中,核酸酶的主要作用是高效消化宿主細(xì)胞DNA(HCD),并將其分解成足夠小的片段,以便在下...
【詳情】一般來說,生物生產(chǎn)工藝用的核酸酶以BenzonaseTM(BenzonaseTM是Merck的注冊商...
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【詳情】ArcticZymes Technologies產(chǎn)品大都來源于深海microbes中,具有一些共同的...
【詳情】ArcticZymes Technologies致力于提供高質(zhì)量產(chǎn)品,具有良好的批間一致性、穩(wěn)定可靠...
【詳情】ArcticZymes Technologies成立于20世紀(jì)80年代后期,致力于從海洋生物中識(shí)別新...
【詳情】基因藥物是指將外源基因引入靶細(xì)胞,糾正或補(bǔ)償基因缺陷或異常引起的疾病的。這種策略對許多疾病的康復(fù)有很...
【詳情】經(jīng)典的慢病毒載體(LV)的生產(chǎn)工藝如下,——三質(zhì)粒系統(tǒng)瞬時(shí)轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞系,轉(zhuǎn)染24小時(shí)后LV...
【詳情】跟其他類型的核酸酶一樣,SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶的滅活方法有很多,分為可逆...
【詳情】核酸酶活性受到很多因素影響,如鹽濃度、pH、底物、溫度等。因此,不同客戶、不同項(xiàng)目中核酸酶的使用條件...
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