一般來(lái)說(shuō),生物生產(chǎn)工藝用的核酸酶以BenzonaseTM(BenzonaseTM是Merck的注冊(cè)商標(biāo))為主,能高效降解任何形式(雙鏈、單鏈、線狀、環(huán)狀)的DNA和RNA。該酶來(lái)自于大自然界普遍存在的S.Marcescen,通過(guò)E.coli發(fā)酵生產(chǎn)得到。該酶的適宜反應(yīng)條件是低鹽濃度范圍(<100mM鹽濃度),且酶活隨著鹽濃度上升而下降,在300mM鹽濃度時(shí)酶活幾乎喪失。對(duì)于細(xì)胞基因藥物常用的兩種病毒載體LV和AAV,LV由于含有脂包膜結(jié)構(gòu)一般都在生理鹽條件下存在,而AAV在高鹽條件下不易團(tuán)聚、更穩(wěn)定。而在生理鹽濃度及更高濃度條件下,Benzonase活性受到抑制。浙江中鹽核酸酶服務(wù)哪家好呢,歡迎咨詢(xún)上海倍篤生物 。嘉興70950-160中鹽核酸酶供應(yīng)商

文章作者對(duì)酶法去除dsDNA進(jìn)行了優(yōu)化研究,兩種酶濃度梯度為25U/ml、50U/ml及100U/ml,Mg2+濃度為5mM,通過(guò)PicoGreen檢測(cè)dsDNA含量。結(jié)果發(fā)現(xiàn),25U/ml的M-SAN HQ中鹽核酸酶對(duì)dsDNA去除效果明顯優(yōu)于100U/ml的Benzonase。此外,在酶切反應(yīng)速度方面,M-SAN HQ有更明顯的優(yōu)勢(shì),——在低濃度底物dsDNA(如20ng/ml)條件下,50U/ml的M-SAN HQ在5分鐘內(nèi)將dsDNA降解到2ng/ml左右;而50U/ml的Benzonase在30分鐘孵育消化后,dsDNA濃度依然是12ng/ml左右。福建倍篤生物中鹽核酸酶廠家直銷(xiāo)常州中鹽核酸酶產(chǎn)品質(zhì)量哪家好呢,歡迎咨詢(xún)上海倍篤生物 。

病毒載體作為細(xì)胞藥物生產(chǎn)的關(guān)鍵原材料,直接關(guān)系到細(xì)胞產(chǎn)品質(zhì)量。載體質(zhì)量的控制和工藝穩(wěn)定性和批間一致性都是關(guān)系到產(chǎn)品能否產(chǎn)業(yè)化的關(guān)鍵。在生產(chǎn)純化過(guò)程中,需要去除上游過(guò)程中的培養(yǎng)基成分、誘導(dǎo)劑、宿主蛋白和核酸等雜質(zhì),但是由于逆轉(zhuǎn)錄病毒顆粒比較大,高異質(zhì)表面糖蛋白,而且活性易于受剪切影響,對(duì)下游純化提出了巨大的挑戰(zhàn)。目前病毒載體純化方法包括超速離心、離子交換層析、分子排阻層析、親和層析、滲濾等。各種方法各有利弊,就產(chǎn)業(yè)化而言,離子交換純化效果比較好,條件易于摸索,易于規(guī)模放大。
M-SAN HQ中鹽核酸酶發(fā)揮酶活性的條件比較廣。例如,該酶適宜的鹽濃度(NaCl)范圍是0mM-225mM,能耐受400mM NaCl濃度。適宜反應(yīng)溫度為20℃-37℃,能耐受4℃-40℃。Mg2+濃度大于0.5mM即可,在4-15mM范圍即可表現(xiàn)更高活性。跟其他核酸酶不同,M-SAN HQ中鹽核酸酶不是堿性核酸酶,其適宜pH為7.2-8.7,能耐受6.3-8.7。綜合這些特點(diǎn),在生理鹽條件下,M-SAN HQ的酶活是傳統(tǒng)全能核酸酶的5倍左右。因此,可以說(shuō)M-SAN HQ是更適合生理鹽條件下的核酸酶。US FDA指南要求:重組biologics終產(chǎn)品中,核酸雜質(zhì)含量低于10ng/dose。

ArcticZymes Technologies致力于提供高質(zhì)量產(chǎn)品,具有良好的批間一致性、穩(wěn)定可靠的質(zhì)量、及時(shí)的文件及技術(shù)支持。ArcticZymes所有產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)、生產(chǎn)及銷(xiāo)售等都符合ISO13485:2016質(zhì)量管理體系標(biāo)準(zhǔn);鑒于生物制品更嚴(yán)格的質(zhì)控要求,廠家對(duì)鹽活性核酸酶系列產(chǎn)品(Salt Active Nucleases,SANs)的生產(chǎn)及質(zhì)控,在符合ISO13485:2016體系基礎(chǔ)上,增加了cGMP相應(yīng)要求,如生產(chǎn)用原輔料是Non-animal和Non-plant來(lái)源的,終產(chǎn)品經(jīng)過(guò)0.22μm過(guò)濾sterilization,放行檢測(cè)包括microbes、fungus及內(nèi)毒檢測(cè)等,所有標(biāo)準(zhǔn)符合USP-EP要求。浙江中鹽核酸酶價(jià)格哪家好呢,歡迎咨詢(xún)上海倍篤生物 。南通70950-202中鹽核酸酶價(jià)格優(yōu)惠
M-SAN HQ中鹽核酸酶的生產(chǎn)用原輔料是Non-animal和Non-plant來(lái)源的。嘉興70950-160中鹽核酸酶供應(yīng)商
跟其他類(lèi)型的核酸酶一樣,SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶的滅活方法有很多,分為可逆滅活及不可逆滅活。金屬離子螯合劑如EDTA會(huì)可逆抑制兩者的活性,加入的EDTA濃度一般是溶液中Mg2+濃度的2倍左右即可完全抑制活性;后續(xù)補(bǔ)加過(guò)量的Mg2+即可恢復(fù)核酸酶活性。加熱、還原劑(如DTT)、咪唑、甘油及表面活性劑(如高于15%濃度的Triton X-100、SDS、尿素等)等都可以使其不可逆失活。在生物工藝流程,需要結(jié)合上下游應(yīng)用需要選擇合適的方法去除或滅活核酸酶。嘉興70950-160中鹽核酸酶供應(yīng)商
基因藥物是指將外源基因引入靶細(xì)胞,糾正或補(bǔ)償基因缺陷或異常引起的疾病的。這種策略對(duì)許多疾病的康復(fù)有很...
【詳情】經(jīng)典的慢病毒載體(LV)的生產(chǎn)工藝如下,——三質(zhì)粒系統(tǒng)瞬時(shí)轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞系,轉(zhuǎn)染24小時(shí)后LV...
【詳情】跟其他類(lèi)型的核酸酶一樣,SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶的滅活方法有很多,分為可逆...
【詳情】核酸酶活性受到很多因素影響,如鹽濃度、pH、底物、溫度等。因此,不同客戶(hù)、不同項(xiàng)目中核酸酶的使用條件...
【詳情】M-SAN HQ中鹽核酸酶發(fā)揮酶活性的條件比較廣。例如,該酶適宜的鹽濃度(NaCl)范圍是0mM-2...
【詳情】慢病毒載體既可以轉(zhuǎn)導(dǎo)分裂細(xì)胞也可以轉(zhuǎn)導(dǎo)非分裂細(xì)胞,被認(rèn)為是安全的,并且可以提供長(zhǎng)期的轉(zhuǎn)基因表達(dá),是目...
【詳情】宿主細(xì)胞DNA殘留的擔(dān)憂是基于致ai風(fēng)險(xiǎn)理論,特別是生產(chǎn)細(xì)胞系所包含的致ai序列,比如較常見(jiàn)腺病毒基...
【詳情】大規(guī)模生產(chǎn)階段,AAV/LV載體生產(chǎn)流程跟抗體、疫苗類(lèi)藥物的生產(chǎn)類(lèi)似,主要包含上游培養(yǎng)、下游純化及制...
【詳情】宿主細(xì)胞DNA殘留的擔(dān)憂是基于致ai風(fēng)險(xiǎn)理論,特別是生產(chǎn)細(xì)胞系所包含的致ai序列,比如較常見(jiàn)腺病毒基...
【詳情】文章作者按照經(jīng)典的慢病毒載體生產(chǎn)流程操作,在融化、核酸酶消化、澄清、超濾等步驟留樣,分別檢測(cè)dsDN...
【詳情】一般來(lái)說(shuō),生物生產(chǎn)工藝用的核酸酶以BenzonaseTM(BenzonaseTM是Merck的注冊(cè)商...
【詳情】病毒載體作為細(xì)胞藥物生產(chǎn)的關(guān)鍵原材料,直接關(guān)系到細(xì)胞產(chǎn)品質(zhì)量。載體質(zhì)量的控制和工藝穩(wěn)定性和批間一致性...
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