核酸酶活性受到很多因素影響，如鹽濃度、pH、底物、溫度等。因此，不同客戶、不同項目中核酸酶的使用條件都不一。目前，生物制藥行業(yè)對Benonase全能核酸酶的使用比較熟悉，如生理鹽或低鹽濃度、脫鹽操作等。對于大部分使用Benzonase的項目，使用M-SAN HQ中鹽核酸酶可以完全替代，而且溫度、Mg2+濃度等條件不用做任何調(diào)整，同樣酶量的M-SAN HQ對宿主細胞DNA（HCD）的去除效果更好、病毒載體得率更高。經(jīng)過工藝優(yōu)化后，可以將M-SAN HQ中鹽核酸酶的用量減少到原來的1/3-1/2，且HCD去除效果及產(chǎn)品得率更高。在細胞培養(yǎng)液或收獲的培養(yǎng)上清中，不需調(diào)整任何組分，M-SAN HQ中鹽核酸酶即可表現(xiàn)較高核酸酶活性。青海等滲條件中鹽核酸酶70950-202
在傳統(tǒng)生物技術行業(yè)（如抗體、疫苗領域）使用的下游純化工藝步驟，已經(jīng)用于慢病毒的大規(guī)模下游處理。主要是基于膜(過濾/澄清，利用切向流過濾TFF進行濃縮/滲濾，基于膜的色譜)和色譜(離子交換色譜IEC，親和色譜AC，體積排阻色譜SEC)的技術。這些不同的過程步驟的組合是可變的，在某些情況下，不同的純化方法可以用于相同的目的。此外，采用benzonase/M-SAN HQ中鹽核酸酶降解污染的DNA或者用于下游的一個步驟，或者用于病毒生產(chǎn)階段。河南等滲條件中鹽核酸酶70950-150M-SAN HQ ELISA kit檢測產(chǎn)品靈敏度高，定量范圍為0.12-7.5ng/ml。
ArcticZymes Technologies成立于20世紀80年代后期，總部位于挪威北部的特羅姆瑟(Troms?)；立足北極海洋區(qū)，致力于從海洋生物中識別新的冷適應酶，用于分子研究、體外診斷和藥物領域。以其產(chǎn)品的獨特性質及超過30年的生產(chǎn)經(jīng)驗積淀，ArcticZymes Technologies得到國際分子診斷及生物藥物領域客戶的肯定及大力支持，ArcticZymes產(chǎn)品線已用于診斷產(chǎn)品及生物藥物生產(chǎn)中。2005年，ArcticZymes在Olso證券交易所上市，并且持續(xù)得到挪威國家基金的支持。
在不同的鹽濃度條件下，AAV病毒載體的存在形式不同。低鹽濃度條件下，AAV病毒顆粒表面會通過電荷作用等非特異結合到HCD上，從而產(chǎn)生病毒顆粒團聚現(xiàn)象。隨著溶液鹽濃度上升，AAV病毒顆粒與HCD的離子相互作用會被破壞，AAV病毒顆粒會逐漸解離。當鹽濃度升到更高范圍（>400mM左右），AAV病毒顆粒與HCD的結合更弱，AAV顆粒更穩(wěn)定。因此，在高鹽濃度溶液中，AAV顆粒更加穩(wěn)定，且有數(shù)據(jù)表明高鹽濃度不會削弱AAV的侵染能力。所以，我們推薦提高AAV病毒生產(chǎn)中的鹽濃度。中鹽核酸酶具有純度高（≥99%）、 內(nèi)毒水平低（<0.25EU/1kU）的特點；
病毒載體作為細胞藥物生產(chǎn)的關鍵原材料，直接關系到細胞產(chǎn)品質量。載體質量的控制和工藝穩(wěn)定性和批間一致性都是關系到產(chǎn)品能否產(chǎn)業(yè)化的關鍵。在生產(chǎn)純化過程中，需要去除上游過程中的培養(yǎng)基成分、誘導劑、宿主蛋白和核酸等雜質，但是由于逆轉錄病毒顆粒比較大，高異質表面糖蛋白，而且活性易于受剪切影響，對下游純化提出了巨大的挑戰(zhàn)。目前病毒載體純化方法包括超速離心、離子交換層析、分子排阻層析、親和層析、滲濾等。各種方法各有利弊，就產(chǎn)業(yè)化而言，離子交換純化效果比較好，條件易于摸索，易于規(guī)模放大。瓊脂糖膠結果顯示，M-SAN HQ中鹽核酸酶能將HCD消化成小于8nt的片段。黑龍江ArcticZymes中鹽核酸酶70950-160
在biopharma生產(chǎn)，如細胞基因medicine及vaccine生產(chǎn)中，宿主細胞DNA殘留是關鍵質量參數(shù)之一。青海等滲條件中鹽核酸酶70950-202
市售的M-SAN HQ中鹽核酸酶有三個規(guī)格，分別是25kU、500kU及5MU，分別滿足研發(fā)初期及大規(guī)模生產(chǎn)各階段的要求。通過SDS-PAGE檢測蛋白純度在99%以上?；贏rcticZymes Technologies的30年的酶學開發(fā)及大規(guī)模生產(chǎn)經(jīng)驗，M-SAN HQ的生產(chǎn)體系穩(wěn)定，產(chǎn)品純度高，批次一致性好，無蛋白酶活性。廠家開發(fā)出特異的緩沖液體系，使M-SAN HQ保存起來更加穩(wěn)定，-15℃ - -30℃條件下保存4年沒有活性下降。研究數(shù)據(jù)表明，經(jīng)過5-6次的反復凍融，M-SAN HQ中鹽核酸酶活性沒有明顯變化。青海等滲條件中鹽核酸酶70950-202
對于含包膜的病毒載體，如慢病毒LV、逆轉錄病毒RV等，在細胞培養(yǎng)上清液中收獲。而M-SAN HQ中鹽...
【詳情】在生物工藝中，核酸酶的主要作用是高效消化宿主細胞DNA（HCD），并將其分解成足夠小的片段，以便在下...
【詳情】ArcticZymes Technologies推出了SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核...
【詳情】經(jīng)典的慢病毒載體（LV）的生產(chǎn)工藝如下，——三質粒系統(tǒng)瞬時轉染HEK293細胞系，轉染24小時后LV...
【詳情】一般來說，生物生產(chǎn)工藝用的核酸酶以BenzonaseTM（BenzonaseTM是Merck的注冊商...
【詳情】ArcticZymes Technologies于2019年推出了M-SAN HQ中鹽核酸酶，202...
【詳情】市售的M-SAN HQ中鹽核酸酶有三個規(guī)格，分別是25kU、500kU及5MU，分別滿足研發(fā)初期及大...
【詳情】除了獲得載體的滴度及產(chǎn)量，生產(chǎn)慢病毒更關心的指標主要是各種污染物的去除?？侱NA污染的去除百分比在9...
【詳情】宿主細胞DNA殘留的擔憂是基于致ai風險理論，特別是生產(chǎn)細胞系所包含的致ai序列，比如較常見腺病毒基...
【詳情】在傳統(tǒng)生物技術行業(yè)（如抗體、疫苗領域）使用的下游純化工藝步驟，已經(jīng)用于慢病毒的大規(guī)模下游處理。主要是...
【詳情】殘留的宿主DNA是生產(chǎn)中產(chǎn)生的雜質，其存在潛在的致瘤性、傳染性和免疫原性等風險。相關研究表明，基因的...
【詳情】文章作者按照經(jīng)典的慢病毒載體生產(chǎn)流程操作，在融化、核酸酶消化、澄清、超濾等步驟留樣，分別檢測dsDN...
【詳情】
