氯化銫(CsCl)/碘克沙醇密度梯度離心大概是經(jīng)典的AAV純化技術(shù)了。這種技術(shù)適用于所有血清型且分辨率高，但是因生產(chǎn)工藝很難放大，低通量等缺點(diǎn)阻礙了其在工業(yè)中的應(yīng)用。繼密度梯度離心之后，色譜法不斷發(fā)展，并逐漸成為一種成熟的、主流的方法。色譜法通過(guò)載體的凈電荷、疏水性、對(duì)配體的親和性、大小以及其他性質(zhì)來(lái)分離并純化載體。這類(lèi)技術(shù)有諸多的優(yōu)點(diǎn)：更具可擴(kuò)展性和成本效益，可多次重復(fù)使用，可并行運(yùn)行或串聯(lián)運(yùn)行，還可有效去除非定植劑，這是開(kāi)發(fā)后期的一個(gè)關(guān)鍵方面。SAN HQ提高核酸污染去除效率，同時(shí)提高目標(biāo)產(chǎn)物產(chǎn)量。北京SAN HQ高鹽核酸酶70921-150
綜合腺相關(guān)病毒AAV制備的三個(gè)工藝階段介紹，可以看出下游處理可以占病毒生產(chǎn)總成本的很大一部分，而且難度也是非常大，尤其是純化過(guò)程。原因之一是由于有超過(guò)100種不同血清型的變體AAV衣殼，不同血清型的AAV蛋白存在差異。因此，各種血清型的表面特性增加AAV純化難度。原因之二是：針對(duì)工藝和產(chǎn)品相關(guān)的雜質(zhì)（包括宿主細(xì)胞物質(zhì)，DNA和空衣殼），缺乏一個(gè)有效和可重復(fù)的平臺(tái)方法，尤其是來(lái)從空衣殼中分離出完整的衣殼。為了解決以上問(wèn)題，國(guó)內(nèi)外大的藥企公司都致力于純化新產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)，以期達(dá)到：（1）實(shí)現(xiàn)病毒顆粒的分離（2）減少產(chǎn)品相關(guān)雜質(zhì)（3）保持效力和產(chǎn)量的目標(biāo)。北京高鹽條件高鹽核酸酶70921SAN HQ是生物工藝流程中去除核酸污染的理想選擇。
宿主細(xì)胞DNA（HCD）殘留以染色質(zhì)形式存在，其中有帶負(fù)電荷的DNA、帶正電荷及疏水區(qū)段的組蛋白，就像膠帶一樣能夠吸附很多物質(zhì)，包括各種雜蛋白、色譜填料、目的病毒顆粒。非特異吸附雜蛋白，會(huì)影響蛋白雜質(zhì)（如HCP）等的去除；吸附到色譜填料上，會(huì)降低色譜分離純化效率；吸附到目的病毒顆粒時(shí)，會(huì)影響目的產(chǎn)物的穩(wěn)定性，從而降低目的產(chǎn)物的得率。因此，從生產(chǎn)工藝層面來(lái)講，一定要去除HCD，從而能夠簡(jiǎn)化工藝、提高目的產(chǎn)物的產(chǎn)量。
ArcticZymes廠家對(duì)鹽活性核酸酶系列產(chǎn)品（Salt Active Nucleases，SANs）的生產(chǎn)及質(zhì)控，在符合ISO13485:2016體系基礎(chǔ)上，增加了cGMP質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)，如microbes、endotoxin、蛋白酶等，符合USP-EP要求。廠家提供HQ級(jí)別和GMP級(jí)別的SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶，從成本角度分別滿(mǎn)足臨床前和早期臨床階段、商業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)階段的需求；且GMP級(jí)SAN HQ高鹽核酸酶已完成在FDA的藥物主文件（Drug Master File, DMF）申報(bào)備案，助力加快藥物申報(bào)流程。在AAV生產(chǎn)過(guò)程中使用SAN HQ高鹽核酸酶。
近年來(lái)，AAV在cancer疾病的醫(yī)治中顯示出巨大的價(jià)值。AAV作為基因藥物的載體已在肺、肝、眼、腦、肌肉等多個(gè)臨床試驗(yàn)(超過(guò)100次)中得到應(yīng)用，并在盲癥和血友病方面取得了巨大成功。2012年，AAV1載體編碼的脂蛋白脂肪酶成為歐盟批準(zhǔn)的shou個(gè)用于醫(yī)治脂蛋白脂肪酶缺乏癥的基因產(chǎn)物(Glybera)。5年后，另一種AAV介導(dǎo)的基因藥物(Luxturna)隨后獲準(zhǔn)在美國(guó)上市?；贏AV9的基因療(Zolgensma)也被用于醫(yī)治脊髓性肌肉萎縮。腺病毒在基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)研究有這么強(qiáng)的生命力原因在于：宿主范圍廣，對(duì)人致病率低；腺病毒粒子相對(duì)穩(wěn)定，病毒基因重排頻率低；安全性高，不整合到染色體中，無(wú)插入致病基因，不干擾其他宿主基因。SAN HQ高鹽核酸酶有兩個(gè)級(jí)別，分別是生物工藝級(jí)別SAN HQ和GMP級(jí)別SAN HQ GMP。浙江SAN HQ TF高鹽核酸酶70921-150
SAN HQ高鹽核酸酶促進(jìn)殘留DNA的消化，有助于符合FDA要求。北京SAN HQ高鹽核酸酶70921-150
在不同的鹽濃度條件下，AAV病毒載體的存在形式不同。低鹽濃度條件下，AAV病毒顆粒表面會(huì)通過(guò)電荷作用等非特異結(jié)合到HCD上，從而產(chǎn)生病毒顆粒團(tuán)聚現(xiàn)象。隨著溶液鹽濃度上升，AAV病毒顆粒與HCD的離子相互作用會(huì)被破壞，AAV病毒顆粒會(huì)逐漸解離。當(dāng)鹽濃度升到更高范圍（>400mM左右），AAV病毒顆粒與HCD的結(jié)合更弱，AAV顆粒更穩(wěn)定。因此，在高鹽濃度溶液中，AAV顆粒更加穩(wěn)定，且有數(shù)據(jù)表明高鹽濃度不會(huì)削弱AAV的侵染能力。所以，我們推薦提高AAV病毒生產(chǎn)中的鹽濃度。北京SAN HQ高鹽核酸酶70921-150
ArcticZymes Technologies成立于20世紀(jì)80年代后期，總部位于挪威北部的特羅姆...
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【詳情】在抗體藥物及核酸藥物領(lǐng)域，倍篤生物產(chǎn)品線(xiàn)涵蓋藥物研發(fā)的全流程，主要用——RNA轉(zhuǎn)染試劑、生物活性物質(zhì)...
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【詳情】經(jīng)過(guò)多年的經(jīng)驗(yàn)積累及市場(chǎng)積淀，倍篤生物已組合多條不同產(chǎn)品線(xiàn)，分別滿(mǎn)足體外診斷、organoid及干細(xì)...
【詳情】已有文獻(xiàn)表明，高鹽濃度能夠破壞染色質(zhì)結(jié)構(gòu)，讓核小體解聚。在能耐受高鹽條件的病毒載體（如AdV/AAV...
【詳情】ArcticZymes Technologies產(chǎn)品大都來(lái)源于深海microbes中，具有一些共同的...
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