譎詐明串珠菌(Leuconostoc fallax)是明串珠菌屬中“貌善心狠”的。菌落乳白、表面光滑,細(xì)胞球形成對(duì),發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣,看似溫順,卻能在泡菜前期迅速增殖,借“糖衣”胞外多糖包裹自己,欺騙宿主免疫系統(tǒng),故得“譎詐”之名?;蚪M分析揭示,它攜帶一套罕見(jiàn)的寡肽轉(zhuǎn)運(yùn)與組氨酸激酶雙組分系統(tǒng),可感知滲透壓與酸度變化,一旦環(huán)境pH降至4.0以下,便啟動(dòng)“式”產(chǎn)酸爆發(fā),短時(shí)間內(nèi)釋放大量乳酸與乙酸,排擠同壇的乳酸菌盟友,獨(dú)占發(fā)酵主導(dǎo)權(quán)。更“狡黠”的是,該菌能分泌一種細(xì)菌素Fallaxin,對(duì)李斯特菌、金黃色葡萄球菌等革蘭氏陽(yáng)性食源性致病菌具有窄譜殺傷,卻對(duì)自身及泡菜關(guān)鍵菌株無(wú)害,借此在微生態(tài)博弈中“借刀殺人”。然而,其高活性胞外多糖合成酶在低溫(4℃)仍持續(xù)表達(dá),導(dǎo)致泡菜后熟期口感發(fā)黏,被食品工程師視為“品質(zhì)陷阱”。研究嘗試通過(guò)CRISPR敲除其負(fù)調(diào)控基因rex,使譎詐明串珠菌在pH 3.8即自動(dòng)休眠,既保留抑菌特長(zhǎng),又避免過(guò)度產(chǎn)黏,為精細(xì)控制傳統(tǒng)發(fā)酵蔬菜的微生態(tài)提供了一把“基因開(kāi)關(guān)”。它能夠高效地分解硫胺素,生成多種有用的代謝產(chǎn)物,如核苷酸和氨基酸。苜蓿疫霉
乳酸鐵營(yíng)養(yǎng)瓊脂(Lactose Iron Nutrient Agar)是一種兼具選擇性、鑒別性與營(yíng)養(yǎng)性的復(fù)合培養(yǎng)基,常用于食品、水質(zhì)及臨床標(biāo)本中革蘭陰性腸道菌的快速分離與初步鑒定。其關(guān)鍵原理在于“雙指示”設(shè)計(jì):乳糖作為可發(fā)酵碳源,與鐵鹽共同構(gòu)成判別系統(tǒng)——能發(fā)酵乳糖的菌株產(chǎn)酸,使酚紅指示劑由紅變黃;若同時(shí)產(chǎn)氣,則可在培養(yǎng)基內(nèi)形成氣泡或裂縫。而鐵離子的加入,讓具備硫化氫(H?S)生成酶的細(xì)菌(如某些變形桿菌、沙門氏菌)將硫代硫酸鈉還原,與Fe2?結(jié)合生成黑色FeS沉淀,菌落中心呈現(xiàn)特征性黑心,實(shí)現(xiàn)“一眼辨菌”。配方上,乳酸鐵營(yíng)養(yǎng)瓊脂在營(yíng)養(yǎng)瓊脂基礎(chǔ)上添加1%乳糖、0.02%硫代硫酸鈉與0.02%檸檬酸鐵銨,pH調(diào)至7.4±0.2,既保證腸桿菌科的基本營(yíng)養(yǎng)需求,又通過(guò)高糖與鐵鹽抑制部分非目標(biāo)菌的過(guò)度生長(zhǎng)。傾注平板后呈淡紅色半透明,若室溫存放出現(xiàn)泛黃,說(shuō)明培養(yǎng)基已酸化,需棄用。接種時(shí),多采用分區(qū)劃線,35℃培養(yǎng)18–24小時(shí)即可讀取結(jié)果:乳糖發(fā)酵陽(yáng)性菌(如大腸埃希菌)形成黃色、邊緣整齊的大菌落;乳糖陰性菌(如志賀菌)則保持紅色;若菌落中心發(fā)黑,則提示H?S陽(yáng)性,需進(jìn)一步做血清學(xué)或質(zhì)譜確認(rèn)。毛革蓋菌產(chǎn)氣腸桿菌在適宜的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好,如在含有營(yíng)養(yǎng)的瓊脂培養(yǎng)基上可以形成光滑、濕潤(rùn)、圓形、凸起的菌落。

PS培養(yǎng)基(Peptococcus Broth),又名消化球菌肉湯,是專為厭氧革蘭陽(yáng)性球菌——消化球菌屬(Peptococcus)及消化鏈球菌(Peptostreptococcus)等嚴(yán)苛厭氧菌設(shè)計(jì)的富營(yíng)養(yǎng)液體培養(yǎng)基。關(guān)鍵配方含胰酪蛋白胨15 g、酵母粉5 g、葡萄糖5 g、L-半胱氨酸0.5 g、NaCl 5 g,補(bǔ)水至1 L,pH 7.2±0.1。L-半胱氨酸兼具還原與硫源,可瞬間降低氧化還原電位至-200 mV,無(wú)需額外預(yù)還原,即開(kāi)即用;葡萄糖提供可發(fā)酵碳源,使菌體在6 h內(nèi)進(jìn)入對(duì)數(shù)期,12 h活菌數(shù)可達(dá)10? CFU/mL,滿足快速擴(kuò)增需求。臨床檢驗(yàn)中,PS培養(yǎng)基常被用于厭氧菌血培養(yǎng)增菌:將5 mL靜脈血直接注入含PS的真空厭氧瓶,35℃靜置培養(yǎng)48 h,若瓶底出現(xiàn)絮狀沉淀、培養(yǎng)液混濁并伴酸臭,即提示可能存在消化球菌或厭氧鏈球菌沾染;結(jié)合MALDI-TOF質(zhì)譜,可在72 h內(nèi)完成種水平鑒定,比傳統(tǒng)厭氧平板法縮短2天??蒲蓄I(lǐng)域,PS肉湯亦是研究厭氧菌鐵代謝、短鏈脂肪酸產(chǎn)量的優(yōu)先平臺(tái):只需在基礎(chǔ)液中去除葡萄糖,換用可溶性淀粉或乳酸鈉,即可考察不同碳源對(duì)丁酸、己酸合成路徑的影響;若添加0.1 %血紅素,更能啟動(dòng)厭氧呼吸鏈,使細(xì)胞干重提升30%。質(zhì)量控制方面,PS培養(yǎng)基滅菌后應(yīng)呈淺黃色透明,若氧化變粉,需棄用。
蘇云金芽孢桿菌蠟冥亞種(Bacillus thuringiensis subsp. galleria)是一種重要的昆蟲(chóng)病原細(xì)菌,在生物防治領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。其獨(dú)特的生物特性以及高效的殺蟲(chóng)機(jī)制使其成為現(xiàn)代農(nóng)業(yè)和環(huán)境科學(xué)中不可或缺的微生物資源。生物特性蘇云金芽孢桿菌蠟冥亞種是一種革蘭氏陽(yáng)性的芽孢桿菌,具有形成孢子的能力,這種孢子能夠在不利的環(huán)境條件下存活,展現(xiàn)出強(qiáng)大的耐受性。在營(yíng)養(yǎng)豐富條件下,它能產(chǎn)生殺蟲(chóng)蛋白,而在營(yíng)養(yǎng)不良時(shí)則進(jìn)入芽孢期,同時(shí)生成具有殺蟲(chóng)作用的伴孢晶體。其生長(zhǎng)周期分為營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞分裂期和芽孢期,前者產(chǎn)生殺蟲(chóng)蛋白,后者形成耐逆境的芽孢和伴孢晶體。殺蟲(chóng)機(jī)制蠟冥亞種的殺蟲(chóng)機(jī)制主要依賴于其產(chǎn)生的伴孢晶體蛋白(δ-內(nèi))。當(dāng)害蟲(chóng)取食含有蘇云金芽孢桿菌蠟冥亞種的植物或制劑后,伴孢晶體在害蟲(chóng)腸道的堿性環(huán)境中被蛋白酶降解,釋放出活性的。這些與害蟲(chóng)中腸上皮細(xì)胞的特異性受體結(jié)合,破壞細(xì)胞膜的完整性,導(dǎo)致細(xì)胞破裂、腸道麻痹,更終使害蟲(chóng)因饑餓和敗血癥死亡。其殺蟲(chóng)范圍廣,對(duì)多種鱗翅目、雙翅目等害蟲(chóng)均有效。應(yīng)用領(lǐng)域農(nóng)業(yè)生產(chǎn)蘇云金芽孢桿菌蠟冥亞種在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中作為生物農(nóng)藥廣泛應(yīng)用。這種能力使其在微生物界中獨(dú)樹(shù)一幟,也為它在多個(gè)領(lǐng)域的應(yīng)用提供了基礎(chǔ)。

YPG培養(yǎng)基(Yeast Extract-Peptone-Glucose Medium)是酵母提取物-蛋白胨-葡萄糖培養(yǎng)基的簡(jiǎn)稱,堪稱微生物實(shí)驗(yàn)室的“快餐”。配方極簡(jiǎn):酵母粉5 g、蛋白胨10 g、葡萄糖20 g,補(bǔ)水至1 L,pH 6.2±0.2,無(wú)需調(diào)節(jié)即可滿足大多數(shù)菌、酵母及部分細(xì)菌的快速增殖需求。酵母粉提供B族維生素和微量元素,蛋白胨供給多肽與氨基酸,葡萄糖以高碳濃度啟動(dòng)酵母發(fā)酵型代謝,短短12 h就能讓釀酒酵母OD???沖破1.0,是發(fā)酵工程與分子生物學(xué)過(guò)夜預(yù)培養(yǎng)的優(yōu)先。若用于絲狀菌,只需降低葡萄糖至10 g,并加入微量元素液,28 ℃靜置2天,孢子產(chǎn)量可比PDA提高30%。YPG的另一優(yōu)勢(shì)是“可鹽可甜”:補(bǔ)加15%甘油即成YPG/甘油,用于酵母感受態(tài)制備;添加2%瓊脂便是YPG平板,藍(lán)白斑篩選、轉(zhuǎn)化子計(jì)數(shù)兩不誤。實(shí)驗(yàn)室里還流行“富氧版”——把葡萄糖提前115 ℃單獨(dú)滅菌,避免美拉德反應(yīng),培養(yǎng)液顏色淺,下游HPLC檢測(cè)有機(jī)酸無(wú)干擾。質(zhì)量控制也輕松:高壓后若顏色發(fā)黃,說(shuō)明葡萄糖與氨基酸高溫反應(yīng),可改用過(guò)濾除菌;室溫保存1周仍澄清,即可繼續(xù)使用。憑借組分明確、成本低廉、配制快速,YPG培養(yǎng)基已從傳統(tǒng)釀酒實(shí)驗(yàn)室走向合成生物學(xué)、代謝工程與益生菌高密度發(fā)酵,成為微生物學(xué)家手中“養(yǎng)菌如泡茶”的經(jīng)典底牌。木糖氧化無(wú)色桿菌氧化應(yīng)激特點(diǎn):抗氧化有體系,酶類物質(zhì)協(xié)同,基因調(diào)控應(yīng)激,維持胞內(nèi)氧化還原穩(wěn)態(tài)。紅色鹽場(chǎng)粒狀古菌
青銅小單胞菌通常分布在土壤或湖底泥土中,堆肥和廄肥中也不少,約有30多種,是產(chǎn)生抗生物質(zhì)較多的一個(gè)屬 。苜蓿疫霉
維涅蘭德固氮菌(Azotobacter vinelandii)是一種革蘭氏陰性的好氧自生固氮菌,屬于固氮菌科。這種細(xì)菌以其獨(dú)特的固氮能力和氧保護(hù)機(jī)制,在農(nóng)業(yè)、工業(yè)和環(huán)境科學(xué)中展現(xiàn)出巨大的應(yīng)用價(jià)值。微生物特性維涅蘭德固氮菌是一種多形態(tài)桿狀細(xì)菌,直徑約2-4微米。它具有高呼吸速率,能夠通過(guò)快速消耗氧氣來(lái)保護(hù)對(duì)氧敏感的固氮酶。此外,該菌還能形成厚壁的孢囊,以抵抗干旱等逆境。其固氮酶復(fù)合體由鉬鐵蛋白和鐵蛋白組成,每固定1分子氮?dú)庑柘?0-30分子ATP。固氮機(jī)制維涅蘭德固氮菌的固氮機(jī)制包括呼吸保護(hù)、構(gòu)象保護(hù)和莢膜屏障。呼吸保護(hù)通過(guò)高代謝率快速消耗細(xì)胞內(nèi)氧氣;構(gòu)象保護(hù)則通過(guò)固氮酶與伴侶蛋白結(jié)合減少氧損傷;莢膜屏障則通過(guò)分泌多糖限制氧擴(kuò)散。這種獨(dú)特的氧保護(hù)機(jī)制使其能夠在有氧環(huán)境下進(jìn)行固氮作用,這在固氮菌中較為罕見(jiàn)。生態(tài)作用在生態(tài)系統(tǒng)中,維涅蘭德固氮菌通過(guò)固氮作用增加土壤氮含量,促進(jìn)植物生長(zhǎng)。它與植物根系(如小麥、玉米)松散聯(lián)合,分泌生長(zhǎng)(如IAA),間接促進(jìn)植物發(fā)育。這種固氮菌廣分布于土壤、植物根際等微環(huán)境中,是自然界中重要的游離氮固定生物。應(yīng)用價(jià)值維涅蘭德固氮菌在農(nóng)業(yè)中作為生物肥料,可減少化學(xué)氮肥的使用,提升可持續(xù)農(nóng)業(yè)。苜蓿疫霉
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