基因療法制造商面臨的挑戰(zhàn)與抗體療法剛出現(xiàn)時單克隆抗體制造商面臨的挑戰(zhàn)相似。例如，在生產(chǎn)、儲存和處理過程中，單克隆抗體也會受到低滴度、產(chǎn)品和工藝相關(guān)雜質(zhì)和降解的挑戰(zhàn)。盡管與重組單克隆抗體相比，單劑量AAV產(chǎn)品與工藝相關(guān)雜質(zhì)相關(guān)的風(fēng)險可能更低（取決于雜質(zhì)的類型、劑量和給藥途徑），但這也不能忽視。由于這些...

經(jīng)典的慢病毒載體（LV）的生產(chǎn)工藝如下，——三質(zhì)粒系統(tǒng)瞬時轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞系，轉(zhuǎn)染24小時后LV由轉(zhuǎn)染陽性細(xì)胞生產(chǎn)并排出到培養(yǎng)上清液中；收獲上清培養(yǎng)液后，加入核酸酶去除HCD污染，通過澄清步驟去除大的細(xì)胞碎片等雜質(zhì)；下游純化步驟分離LV載體，純化方法包括切向流過濾TFF、色譜純化及超速離心；純化...

SANHQ(生物工藝級)是用Pichiapastoris表達(dá)的重組非特異性內(nèi)切核酸酶，廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)工藝流程中，有效去除核酸污染。該酶在高鹽濃度下具有良好的活性，應(yīng)用在生產(chǎn)工藝流程中提高去除效率和目標(biāo)產(chǎn)物產(chǎn)量。在生物制品生產(chǎn)，如AAV載體及腺病毒載體疫苗生產(chǎn)中，宿主細(xì)胞DNA殘留是關(guān)鍵質(zhì)量參數(shù)之一。...

一個美國客戶做了對照實驗，比較Benzonase和SAN HQ高鹽核酸酶純化病毒載體的效率。實驗設(shè)計如下，HEK293細(xì)胞轉(zhuǎn)染及培養(yǎng)后，分別取了150Million的293細(xì)胞進(jìn)行裂解，分別在各自適宜的條件下（即SAN HQ組反應(yīng)條件為500mM鹽濃度，而Benzonase組反應(yīng)條件是150mM鹽濃...

經(jīng)過多年的經(jīng)驗積累及市場積淀，倍篤生物已組合多條不同產(chǎn)品線，分別滿足體外診斷、organoid及干細(xì)胞、細(xì)胞基因藥物等領(lǐng)域的需求。其中，細(xì)胞基因藥物領(lǐng)域產(chǎn)品線包含SAN HQ高鹽核酸酶及M-SAN HQ中鹽核酸酶、泊洛沙姆P 188 Bio、GMP級MSC/PSC培養(yǎng)基、GMP級膠原酶、AAV滴度檢...

ArcticZymes Technologies產(chǎn)品大都來源于深海microbes中，具有一些共同的特性。1. 熱不穩(wěn)定性，使酶產(chǎn)品相對容易失活，簡化工作流程，方便自動化過程；2. 低溫活性，即在低溫或常溫下具有更高活性，縮短酶與底物的孵育時間，提高反應(yīng)速度及效率；3. 耐鹽特性，是指大部分酶產(chǎn)品能...

殘留的宿主DNA是生產(chǎn)中產(chǎn)生的雜質(zhì)，其存在潛在的致瘤性、傳染性和免疫原性等風(fēng)險。相關(guān)研究表明，基因的大小普遍在200bp以上，因此大于200bp有可能會有一定的致病性，而且殘留DNA片段越大，生物制品的風(fēng)險等級越高。因此，各國監(jiān)管機(jī)構(gòu)對其提出了嚴(yán)格要求。美國食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）在《關(guān)于人類基...

有研究發(fā)現(xiàn)，桿狀病毒表達(dá)載體體系BEV生產(chǎn)的rAAV發(fā)生了與293生產(chǎn)體系不同的衣殼蛋白翻譯后修飾（post-translationalmodifications,PTMs）。這一差異是否會影響載體趨向性和轉(zhuǎn)導(dǎo)效率還需要進(jìn)一步驗證。除此之外，桿狀病毒多重infection會導(dǎo)致載體蛋白VP1、VP2...

在不同的鹽濃度條件下，AAV病毒載體的存在形式不同。低鹽濃度條件下，AAV病毒顆粒表面會通過電荷作用等非特異結(jié)合到HCD上，從而產(chǎn)生病毒顆粒團(tuán)聚現(xiàn)象。隨著溶液鹽濃度上升，AAV病毒顆粒與HCD的離子相互作用會被破壞，AAV病毒顆粒會逐漸解離。當(dāng)鹽濃度升到更高范圍（>400mM左右），AAV病毒顆粒與...

核酸酶活性受到很多因素影響，如鹽濃度、pH、底物、溫度等。因此，不同客戶、不同項目中核酸酶的使用條件都不一。目前，生物制藥行業(yè)對Benonase全能核酸酶的使用比較熟悉，如生理鹽或低鹽濃度、脫鹽操作等。對于大部分使用Benzonase的項目，使用M-SAN HQ中鹽核酸酶可以完全替代，而且溫度、Mg...

通過三質(zhì)粒瞬轉(zhuǎn)體系生產(chǎn)病毒載體，會引入宿主細(xì)胞DNA殘留（HCD）、蛋白殘留（HCP）、工藝雜質(zhì)（如antibiotics、核酸酶等外源物質(zhì)）等污染，存在潛在的致瘤性和免疫原性等風(fēng)險。藥品監(jiān)管機(jī)構(gòu)一般允許生物制品中存在10ng/dose以下的殘留DNA。此外，根據(jù)雜質(zhì)來源、工藝以及產(chǎn)品類型不同，也會...

大多數(shù)研究級別的慢病毒是通過批次濃縮而不是粗制劑之后應(yīng)用的，濃縮基本上是通過兩步離心法產(chǎn)生的。在70000g通過超速離心濃縮后的慢病毒再通過蔗糖緩沖(50000g)純化，然后溶解在配方緩沖液中。一種改進(jìn)，特別是純度方面的改進(jìn)，基于離心/色譜聯(lián)用的純化方法。例如，Kutner等評估了組合純化/濃縮方法...

ArcticZymes Technologies產(chǎn)品大都來源于深海microbes中，具有一些共同的特性。1. 熱不穩(wěn)定性，使酶產(chǎn)品相對容易失活，簡化工作流程，方便自動化過程；2. 低溫活性，即在低溫或常溫下具有更高活性，縮短酶與底物的孵育時間，提高反應(yīng)速度及效率；3. 耐鹽特性，是指大部分酶產(chǎn)品能...

細(xì)胞基因藥物的基因遞送有病毒及非病毒兩種方式，其中病毒遞送更為常用。在病毒遞送路徑中，腺相關(guān)病毒（AAV）和慢病毒（Lentivirus）是常用的兩種載體；差別是病毒基因組的存在形式，AAV的基因組一般不整合到染色體中，以游離形式存在于染色體之外，且一般會表達(dá)數(shù)年之久；而慢病毒的基因組則會整合到染色...

市售的M-SAN HQ中鹽核酸酶有三個規(guī)格，分別是25kU、500kU及5MU，分別滿足研發(fā)初期及大規(guī)模生產(chǎn)各階段的要求。通過SDS-PAGE檢測蛋白純度在99%以上?；贏rcticZymes Technologies的30年的酶學(xué)開發(fā)及大規(guī)模生產(chǎn)經(jīng)驗，M-SAN HQ的生產(chǎn)體系穩(wěn)定，產(chǎn)品純度高，...

逆轉(zhuǎn)錄病毒載體可以將7.5Kb左右外源基因整合入靶細(xì)胞基因組，并穩(wěn)定持久地表達(dá)，已經(jīng)在批準(zhǔn)的CAR-T產(chǎn)品和許多臨床產(chǎn)品中得到應(yīng)用。Shou個成功的基因藥物臨床試驗是利用小鼠白血病病毒(Murin Leukemia Virus,MLV，gamma逆轉(zhuǎn)錄病毒)作為基因轉(zhuǎn)移載體醫(yī)治兒童的X性染色體連鎖嚴(yán)...

經(jīng)過多年的經(jīng)驗積累及市場積淀，倍篤生物已組合多條不同產(chǎn)品線，分別滿足體外診斷、organoid及干細(xì)胞、細(xì)胞基因藥物等領(lǐng)域的需求。其中，細(xì)胞基因藥物領(lǐng)域產(chǎn)品線包含SAN HQ高鹽核酸酶及M-SAN HQ中鹽核酸酶、泊洛沙姆P 188 Bio、GMP級MSC/PSC培養(yǎng)基、GMP級膠原酶、AAV滴度檢...

染色質(zhì)由組蛋白和DNA組成，——147個堿基對的DNA纏繞在8個組蛋白（由H2A、H2B、H3和H4形成的八聚體）周圍，形成基本的染色質(zhì)單位，即核小體。核小體像珠串一樣串連在一起，并被包裝成更高階的染色質(zhì)結(jié)構(gòu)。DNA帶負(fù)電荷，富含堿性氨基酸的組蛋白帶正電荷，且組蛋白多聚物有很多疏水區(qū)段。所有這些特點...

有研究發(fā)現(xiàn)，桿狀病毒表達(dá)載體體系BEV生產(chǎn)的rAAV發(fā)生了與293生產(chǎn)體系不同的衣殼蛋白翻譯后修飾（post-translationalmodifications,PTMs）。這一差異是否會影響載體趨向性和轉(zhuǎn)導(dǎo)效率還需要進(jìn)一步驗證。除此之外，桿狀病毒多重infection會導(dǎo)致載體蛋白VP1、VP2...

這款核酸酶的適宜pH范圍很廣（pH 7.2 - 8.7），且在125 – 250 mM鹽濃度內(nèi)具有優(yōu)活性。在細(xì)胞培養(yǎng)液或收獲的培養(yǎng)上清中，不需調(diào)整任何組分，直接加入M-SAN HQ即可表現(xiàn)良好核酸酶活性。相比傳統(tǒng)的全能核酸酶，M-SAN HQ中鹽核酸酶在生理鹽條件下，對HCD的去除更高效、更徹底。因...

ArcticZymes Technologies產(chǎn)品大都來源于深海microbes中，具有一些共同的特性。1. 熱不穩(wěn)定性，使酶產(chǎn)品相對容易失活，簡化工作流程，方便自動化過程；2. 低溫活性，即在低溫或常溫下具有更高活性，縮短酶與底物的孵育時間，提高反應(yīng)速度及效率；3. 耐鹽特性，是指大部分酶產(chǎn)品能...

逆轉(zhuǎn)錄病毒載體可以將7.5Kb左右外源基因整合入靶細(xì)胞基因組，并穩(wěn)定持久地表達(dá)，已經(jīng)在批準(zhǔn)的CAR-T產(chǎn)品和許多臨床產(chǎn)品中得到應(yīng)用。Shou個成功的基因藥物臨床試驗是利用小鼠白血病病毒(Murin Leukemia Virus,MLV，gamma逆轉(zhuǎn)錄病毒)作為基因轉(zhuǎn)移載體醫(yī)治兒童的X性染色體連鎖嚴(yán)...

在不同的鹽濃度條件下，AAV病毒載體的存在形式不同。低鹽濃度條件下，AAV病毒顆粒表面會通過電荷作用等非特異結(jié)合到HCD上，從而產(chǎn)生病毒顆粒團(tuán)聚現(xiàn)象。隨著溶液鹽濃度上升，AAV病毒顆粒與HCD的離子相互作用會被破壞，AAV病毒顆粒會逐漸解離。當(dāng)鹽濃度升到更高范圍（>400mM左右），AAV病毒顆粒與...

慢病毒大規(guī)模純化的捕獲步驟包括：膜過濾澄清，隨后切向流過濾/超濾或者體積排阻色譜濃縮。此外，需用核酸酶（benzonase或M-SAN HQ中鹽核酸酶）來去除細(xì)胞殘留的、質(zhì)粒來源的DNA污染。這兩個步驟順序可以調(diào)整，依據(jù)項目工藝而定。兩種工藝路線各有優(yōu)缺點：先用核酸酶消化的優(yōu)點是可去除大的DNA片段...

一般來說，生物生產(chǎn)工藝用的核酸酶以BenzonaseTM（BenzonaseTM是Merck的注冊商標(biāo)）為主，能高效降解任何形式（雙鏈、單鏈、線狀、環(huán)狀）的DNA和RNA。該酶來自于大自然界普遍存在的S.Marcescen，通過E.coli發(fā)酵生產(chǎn)得到。該酶的適宜反應(yīng)條件是低鹽濃度范圍（<100mM...

在抗體藥物及核酸藥物領(lǐng)域，倍篤生物產(chǎn)品線涵蓋藥物研發(fā)的全流程，主要用——RNA轉(zhuǎn)染試劑、生物活性物質(zhì)純化分離用填料產(chǎn)品、ADC的payload抗體（如anti-DXD、anti-Eribulin、anti-MMAE等）、動物造模用陽性及陰性抗體、泊洛沙姆P 188 Bio、工藝雜質(zhì)及外源污染物殘留檢...

染色質(zhì)由組蛋白和DNA組成，——147個堿基對的DNA纏繞在8個組蛋白（由H2A、H2B、H3和H4形成的八聚體）周圍，形成基本的染色質(zhì)單位，即核小體。核小體像珠串一樣串連在一起，并被包裝成更高階的染色質(zhì)結(jié)構(gòu)。DNA帶負(fù)電荷，富含堿性氨基酸的組蛋白帶正電荷，且組蛋白多聚物有很多疏水區(qū)段。所有這些特點...

細(xì)胞基因藥物領(lǐng)域的進(jìn)展使得對高質(zhì)量基因轉(zhuǎn)移技術(shù)的需求急劇增加，包括高質(zhì)量慢病毒載體(LV)的大規(guī)模生產(chǎn)。宿主細(xì)胞DNA殘留（HCD）是一類主要的工藝相關(guān)雜質(zhì)，對下游純化帶來很大挑戰(zhàn)。根據(jù)相關(guān)法規(guī)要求，需要去除HCD才能達(dá)到臨床級LV。HCD去除是通過核酸酶處理聯(lián)合下游工藝（DSP）共同實現(xiàn)的。文章作...

ArcticZymes Technologies致力于提供高質(zhì)量產(chǎn)品，具有良好的批間一致性、穩(wěn)定可靠的質(zhì)量、及時的文件及技術(shù)支持。ArcticZymes所有產(chǎn)品的開發(fā)、生產(chǎn)及銷售等都符合ISO13485:2016質(zhì)量管理體系標(biāo)準(zhǔn)；鑒于生物制品更嚴(yán)格的質(zhì)控要求，廠家對鹽活性核酸酶系列產(chǎn)品（Salt A...

M-SAN HQ中鹽核酸酶發(fā)揮酶活性的條件比較廣。例如，該酶適宜的鹽濃度（NaCl）范圍是0mM-225mM，能耐受400mM NaCl濃度。適宜反應(yīng)溫度為20℃-37℃，能耐受4℃-40℃。Mg2+濃度大于0.5mM即可，在4-15mM范圍即可表現(xiàn)更高活性。跟其他核酸酶不同，M-SAN HQ中鹽核...