進口PEI轉染試劑轉染效率

瞬時轉染方法1.接種細胞：轉染前，用膠原酶消化細胞并計數(shù)（不建議用胰酶）。調整細胞濃度，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿，總體積如表1所示，每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用2-5μL線性PEI轉染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管，例如Falcon5mL/14mL離心管。3.轉染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉染時，去除生長培養(yǎng)基，替換成無血清培養(yǎng)基，然后滴DNA-PEI復合物。轉染3h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。4.孵育細胞和分析結果：在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉染后快7h即可檢測到轉入基因的表達。請自行確定檢測時間。更多關于Polysciences PEI相關內(nèi)容歡迎咨詢上海曼博生物！歡迎關注公眾號Mine-bio有誰用過Polysciences的PEI轉染試劑？進口PEI轉染試劑轉染效率

產(chǎn)品特點：PEIMAX40K是線性聚乙烯亞胺鹽酸鹽形式（LinearPolyethylenimineHydrochloride），是線性化聚乙烯亞胺PEI25K的升級產(chǎn)品。相比于PEI25K，PEIMAX40K：1.完全水解（去乙?；?；2.鹽酸鹽形式，具更高的水溶特性；3.含更長連續(xù)性乙烯亞胺片段，其質子化氮水平比PEI25K提高11%以上。應用領域：PEIMAX40K（cat#24765）是一款非GMP等級的PEI轉染試劑，適用于基礎學術研究和藥物研發(fā)早期階段，以固體粉末形式提供，需用戶自行配置（詳情見使用方法）。也歡迎關注我們的公眾號：Mine-bio，查看更多詳情信息！支鏈PEI轉染試劑品牌哪個品牌的P日轉染試劑轉染效率更高呢?

Polysciences 轉染試劑系列是基于聚乙烯亞胺（Polyethylenimine，PEI）的產(chǎn)品，因其較高的轉染效果，已廣泛應用于工業(yè)化生產(chǎn)。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子，每相隔二個碳原子，即每“第三個原子都是質子化的氨基氮原子，使得聚合物網(wǎng)絡在任何pH下都能充當有效的“質子海綿”體(proton sponge)。PEI可用作轉染試劑，它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉染真核細胞。有實驗證明，分子量為25000的線性PEI即Polysciences 23966（PEI 25K）轉染效率表現(xiàn)優(yōu)良。

產(chǎn)品簡介Transporter5轉染試劑是一種非GMP等級的即用型線性聚乙烯亞胺（PEI轉染試劑）溶液，由PEIMAX配置而成，采用0.1umPES無菌過濾器，完全消除支原體污染風險。Transporter5將DNA縮聚成帶正電荷的復合物，這些復合物很容易通過內(nèi)吞作用進入細胞，并且Transporter5-DNA復合物能很好地抵御溶酶體的降解作用，有效提高轉染效率。適用于工藝開發(fā)、臨床前和早期臨床研究，可無縫過渡到MAXgeneGMP用于商業(yè)化生產(chǎn)。Transporter5轉染試劑能高效地將DNA轉染入HEK-293、CHO、COS、HELA、昆蟲（SF9、SF21）等真核細胞系，可作用于大到135,000個核苷酸的質粒，所以較大的質粒也可以成功地轉染。Transporter5可節(jié)省試劑準備時間，加快項目進度。經(jīng)過嚴格的性能檢測，確保品質，在新藥研發(fā)過程中是一款快速、重復性好、可用于批量產(chǎn)的轉染試劑。更多關于KyforaBiobyPolysciencesPEI轉染試劑，歡迎咨詢上海曼博生物！PEI轉染試劑，高效助力基因轉染研究，試用裝輕松上手。

注意事項質粒質量：請務必使用高質量轉染級無內(nèi)質粒（推薦使用QIAGEN或者MN公司去內(nèi)質粒提取試劑盒）。通過260nm光吸收測定DNA濃度，260nm/280nm比值確定DNA純度（比值應該在1.8~2.0的范圍之內(nèi)）。如有可能，請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質粒的完整性。細胞條件：使用適當保存和經(jīng)常傳代的健康細胞。確保培養(yǎng)基沒有被細菌、或支原體污染。如果細胞是近期復蘇的液氮凍存細胞，請在轉染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細胞。近期還有PEIfree申請活動，歡迎咨詢上海曼博生物！歡迎關注我們的公眾號：Mine-bio，回復關鍵詞“申請PEI”，即可參加活動！更多關于Polysciences PEI轉染試劑相關產(chǎn)品信息，歡迎咨詢上海曼博生物！或者關注我們的公眾號：Mine-bioPEI轉染試劑和其他轉染試劑相比有什么優(yōu)勢？cGMP級PEI轉染試劑好用么

配制PEI轉染試劑的注意事項有哪些？進口PEI轉染試劑轉染效率

穩(wěn)定轉染方法：1.接種細胞：轉染前一晚，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)（不建議用胰酶）。調整細胞濃度，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿，每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑(這個需要客戶自行摸索配比，每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉染時，去除生長培養(yǎng)基，替換成無血清培養(yǎng)基，然后滴DNA-PEI復合物。轉染1.5h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。若想咨詢更多關于PEI轉染試劑相關信息，歡迎咨詢上海曼博生物！進口PEI轉染試劑轉染效率