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    PEI轉(zhuǎn)染試劑基本參數(shù)
    • 品牌
    • Kyfora Bio by Polysciences
    • 產(chǎn)品名稱
    • PEI轉(zhuǎn)染試劑
    • 主要組成成分
    • 聚乙烯亞胺
    • 貯藏
    • 4度
    • 生產(chǎn)企業(yè)
    • Kyfora Bio by Polysciences
    • 規(guī)格
    • 1g
    • 產(chǎn)地
    • 美國
    • 廠家
    • Kyfora Bio by Polysciences
    • 有效期
    • 24個月
    PEI轉(zhuǎn)染試劑企業(yè)商機

    材料:質(zhì)粒DNA指數(shù)生長的真核細胞PEI(聚乙烯亞胺)1×HBS(pH7.4)配方:PEI儲存液(100μM):稱取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS(pH7.4)中,0.2μm濾膜過濾,儲存于4℃?zhèn)溆谩?×HBS(pH7.4):將8.76gNaCl溶解于900ml超純水,加入20ml1M的HEPES,調(diào)pH值到7.4,定容至1L,過濾(0.2μm濾膜)后儲存于4℃?zhèn)溆谩7椒ǎ?.細胞分盤:通過胰酶消化收集細胞,用適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養(yǎng)皿上(根據(jù)實驗需要選擇培養(yǎng)皿,使細胞貼壁后所占總面積達到培養(yǎng)皿面積的70-90%)。根據(jù)細胞貼壁情況于含5%CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當細胞貼壁完全后即可開始轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染前換入2mL預(yù)熱的無血清培養(yǎng)基。


    PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種高分子化學(xué)類轉(zhuǎn)染試劑。即用型PEI轉(zhuǎn)染試劑中國代理權(quán)

    即用型PEI轉(zhuǎn)染試劑中國代理權(quán),PEI轉(zhuǎn)染試劑

    穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法1.接種細胞:轉(zhuǎn)染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細胞濃度,將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,每個孔置入的細胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同)。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。更多Polysciences PEI產(chǎn)品歡迎咨詢上海曼博生物!低毒性PEI轉(zhuǎn)染試劑如何儲存哪個品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑比較好用?

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    穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法:準備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同)。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時,去除生長培養(yǎng)基,替換成無血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。4.孵育細胞和分析結(jié)果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉(zhuǎn)染后5h即可檢測到轉(zhuǎn)入基因的表達。5.轉(zhuǎn)染24h后,將細胞傳代至新鮮的生長培養(yǎng)基中(將細胞稀釋10倍以上),在CO2培養(yǎng)箱中37℃孵育過夜。第二天加入與轉(zhuǎn)染抗性基因相匹配的篩選藥物。約1~2周可篩選到耐藥性克隆,在這期間需經(jīng)常更換含篩選藥物的生長培養(yǎng)基。


    瞬時轉(zhuǎn)染方法1.接種細胞:轉(zhuǎn)染前,用膠原酶消化細胞并計數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細胞濃度,將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,總體積如表1所示,每個孔置入的細胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用2-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如Falcon5mL/14mL離心管。


    PEI轉(zhuǎn)染試劑的殘留檢測方法怎么開發(fā)?

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    美國Polysciences提供化學(xué)PEI轉(zhuǎn)染試劑。即用型PEI轉(zhuǎn)染試劑中國代理權(quán)

    上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司始終致力于為客戶提供一站式生物醫(yī)藥科技服務(wù),以創(chuàng)新和為價值理念,通過自身研發(fā)團隊,以及與國內(nèi)外專業(yè)科研團隊強強聯(lián)合,不斷創(chuàng)新,為生命科學(xué)和醫(yī)藥研發(fā)行業(yè)提供產(chǎn)品和服務(wù)。生物醫(yī)學(xué)工程是綜合應(yīng)用生命科學(xué)與工程科學(xué)的原理和方法,從工程學(xué)角度在分子、細胞、組織、乃至整個人體系統(tǒng)多層次認識人體的結(jié)構(gòu)、功能和其他生命現(xiàn)象,研究用于防病、治病、人體功能輔助及衛(wèi)生保健的人工材料、制品、裝置和系統(tǒng)技術(shù)的總稱。


    即用型PEI轉(zhuǎn)染試劑中國代理權(quán)

    曼博生物,2019-02-15正式啟動,成立了血小板裂解液,WB自動孵育系統(tǒng),微流控器官芯片,藍牙無線標簽機等幾大市場布局,應(yīng)對行業(yè)變化,順應(yīng)市場趨勢發(fā)展,在創(chuàng)新中尋求突破,進而提升PL Bioscienc,Quan-Lab,Polysciences,Sirion Biote,CN-Bio,Dharmacon,Horizon,Pfenex,Visual Prote的市場競爭力,把握市場機遇,推動醫(yī)藥健康產(chǎn)業(yè)的進步。旗下PL Bioscienc,Quan-Lab,Polysciences,Sirion Biote,CN-Bio,Dharmacon,Horizon,Pfenex,Visual Prote在醫(yī)藥健康行業(yè)擁有一定的地位,品牌價值持續(xù)增長,有望成為行業(yè)中的佼佼者。隨著我們的業(yè)務(wù)不斷擴展,從血小板裂解液,WB自動孵育系統(tǒng),微流控器官芯片,藍牙無線標簽機等到眾多其他領(lǐng)域,已經(jīng)逐步成長為一個獨特,且具有活力與創(chuàng)新的企業(yè)。上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司業(yè)務(wù)范圍涉及生物醫(yī)藥科技(人體干細胞、基因診斷與zhiliao技術(shù)開發(fā)和應(yīng)用除外)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、自有技術(shù)轉(zhuǎn)讓,并提供相關(guān)的技術(shù)咨詢和技術(shù)服務(wù);計算機軟件的開發(fā)、設(shè)計、制作(音像制品、電子出版物除外)、銷售自產(chǎn)產(chǎn)品;實驗室試劑及耗材(藥品、危險品除外)、化工原料及產(chǎn)品(除危險化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、煙花爆竹、民用baozha物、易制毒化學(xué)品)、儀器儀表、機械設(shè)備、電子設(shè)備、塑料制品、玻璃制品、辦公用品、電子產(chǎn)品的批發(fā)、進出口、傭金代理(拍賣除外)。【依法須經(jīng)批準的項目,經(jīng)相關(guān)部門批準后方可開展經(jīng)營活動】等多個環(huán)節(jié),在國內(nèi)醫(yī)藥健康行業(yè)擁有綜合優(yōu)勢。在血小板裂解液,WB自動孵育系統(tǒng),微流控器官芯片,藍牙無線標簽機等領(lǐng)域完成了眾多可靠項目。

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