常用總RNA提取試劑:異硫氰酸胍法和Trizol法是動(dòng)物組織及動(dòng)物細(xì)胞總RNA提取較常用的方法,異硫氰酸胍法操作簡單快捷,適用于樣本足夠大的常規(guī)動(dòng)物組織;Trizol法裂解能力較強(qiáng),尤其適合小樣本及特別難提取的組織,如兔子皮膚,動(dòng)物結(jié)締組織等總RNA的提??;另外Trizol作為一種通用型的裂解試劑,還可以用于植物組織、細(xì)菌、菌類等組織的提取。對于含多糖多酚的植物組織如油茶、茶葉、油菜等還可以使用CTAB法進(jìn)行總RNA的提取。提取RNA時(shí)我們經(jīng)常遇到的問題是:(1)RNA產(chǎn)量較低;(2)RNA有嚴(yán)重的鹽類污染;(3)RNA有嚴(yán)重的有機(jī)溶劑污染;(4)樣品降解等問題。拭子RNA提取試劑的選擇?操作簡便性。溫州正規(guī)RNA提取試劑生產(chǎn)廠家

總RNA快速提取試劑盒背景資料;EpiQuik?總RNA分離快速試劑盒為從哺乳動(dòng)物細(xì)胞和組織中分離總RNA提供了一種快速、簡單和經(jīng)濟(jì)有效的方法。洗滌劑用于溶解細(xì)胞和滅活核糖核酸酶。特殊的高鹽緩沖系統(tǒng)允許蛋白質(zhì)/DNA被去除,RNA結(jié)合到自旋柱的玻璃纖維基質(zhì)上,同時(shí)污染物通過柱。雜質(zhì)被有效地沖洗掉,純凈的RNA被洗脫。該試劑盒純化的RNA適用于多種常規(guī)應(yīng)用,包括RT-PCR、cDNA合成、northernblotting、差異顯示、引物延伸和mRNA選擇??俁NA快速提取試劑盒描述:本試劑盒包含了直接從培養(yǎng)細(xì)胞或組織中成功分離RNA所需的所有試劑。經(jīng)過裂解、結(jié)合和洗滌后,使用特殊設(shè)計(jì)的柱可以很容易地回收高達(dá)10個(gè)氧化格的RNA。然后,總RNA準(zhǔn)備用于各種下游應(yīng)用。寧波南昌RNA提取試劑加入氯仿離心后,裂解液分層成水相和有機(jī)相。

血漿/血清中miRNA提取試劑盒:是專門針對血清、血漿樣本中miRNA提取而開發(fā)的,利用吸附柱法從血清、血漿樣品中簡單快捷提取高純度高質(zhì)量的miRNA。該試劑盒中的裂解液miRBP1及柱結(jié)合液miRBP2具有高效裂解及提取效果。試劑盒中的吸附柱采用特殊的硅基質(zhì)膜材料,對RNA尤其是smallRNA(<200nt)具有結(jié)合能力,與常用的抗凝劑(包括肝素、EDTA、檸檬酸鈉、草酸鈉)兼容,得到的miRNA可直接用于RT-PCR和Northern雜交等后續(xù)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)操作。普通植物總RNA提取試劑盒:采用進(jìn)口硅基質(zhì)膜制作的總RNA吸附柱,可以從普通植物的根、莖、葉中快速提取總RNA,30~40分鐘內(nèi)即可完成提取過程,提取的總RNA純度高,沒有DNA和蛋白質(zhì)的污染,適用于RT-PCR、qRT-PCR、芯片分析、Northernblot雜交等實(shí)驗(yàn)??俁NA吸附柱保證RNA提取速度快,提取效率高。高效去除植物組織中的色素、酚類等雜質(zhì),提取RNA的純度高,產(chǎn)量大。
RNA充當(dāng)遺傳物質(zhì):其實(shí)RNA并不是只能干這些臟活累活,實(shí)際上,它也是可以充當(dāng)遺傳物質(zhì)的。病菌的遺傳物質(zhì)大多都是RNA,比如,這次的病菌的遺傳物質(zhì)就是RNA。不過,如今具有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的生物,它們的遺傳物質(zhì)基本上都是DNA。而科學(xué)家認(rèn)為,其實(shí)較早的生物,其實(shí)都是以RNA作為遺傳物質(zhì)的。這個(gè)假說也被叫做RNA世界假說。其實(shí)這個(gè)也很好理解,我們都知道RNA和DNA都有堿基,而且就是利用的堿基互補(bǔ)原則來完成任務(wù)的。DNA要完成生命活動(dòng)就指導(dǎo)RNA。因此,只要RNA能夠完成類似于DNA的自我復(fù)制,那么就可以作為遺傳物質(zhì)。RNA提取試劑注意事項(xiàng):TRIReagent抽提總RNA的同時(shí),理論上也可抽提蛋白和DNA。

經(jīng)典Trizol法并不能獲得總RNA:這個(gè)事實(shí)可能會(huì)刷不少新手甚至老手的三觀,但確有實(shí)驗(yàn)支持:經(jīng)典Trizol法會(huì)選擇性丟失低GC比的miRNA。這一點(diǎn),源自一則作者自撤稿的故事。V.NarryKim是韓國鼎鼎大名的美女科學(xué)家,專做RNA相關(guān)的研究,包括miRNA。幾年前她們組發(fā)現(xiàn)一個(gè)奇怪的“現(xiàn)象”,即貼壁細(xì)胞在消化之后,會(huì)有一些miRNA的豐度突然降低,看起來好像是被快速“降解”掉了,并據(jù)此寫了一篇文章發(fā)到MolecularCell上。但很快她們就發(fā)現(xiàn),這個(gè)“現(xiàn)象”難以重復(fù):如果用Trizol做實(shí)驗(yàn),就一定是陽性結(jié)果,而用試劑盒提RNA,就重復(fù)不出來。難道是號(hào)稱能提總RNA的Trizol方案出了問題?確實(shí)如此。經(jīng)進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)后發(fā)現(xiàn),經(jīng)典的Trizol方案會(huì)使得低GC比的miRNA丟失。該EpiQuik?總RNA提取試劑盒提供了一種快速,簡單,經(jīng)濟(jì)有效的方法。深圳正規(guī)RNA提取試劑廠家
RNA提取試劑注意事項(xiàng):其它器物去除RNA酶可考慮用0.01%的DEPC水浸泡過夜,滅菌,烘干。溫州正規(guī)RNA提取試劑生產(chǎn)廠家
RNA提取關(guān)鍵點(diǎn):RNA的產(chǎn)量和質(zhì)量也是另無數(shù)人頭疼的問題,較佳方法是保證樣品完全裂解,但相同的裂解方案換了一個(gè)樣本可能就沒轍了。為了提高裂解效果,可以將裂解緩沖液與機(jī)械裂解步驟(研磨珠破碎)匹配,或者在裂解液上游加入酶裂解步驟(如蛋白酶K、溶菌酶等)。BIOG血液RNA快速提取試劑盒是公司研發(fā)團(tuán)隊(duì)在綜合比較了國外同類較好產(chǎn)品的基礎(chǔ)上反復(fù)研制優(yōu)化而成,專門用于血液RNA的快速提取純化。本試劑盒采用獨(dú)特的裂解液配方,可直接從新鮮、冷凍或陳舊的全血中提取高質(zhì)量的RNA,操作簡便快速,只需15分鐘即可完成血液RNA提取。RNA提取得率較高,可在200μL全血中提取5μg左右RNA。BIOG血液RNA快速提取試劑盒采用了較新的較好離子膜,裂解液和洗脫液經(jīng)過多次優(yōu)化,有效地去除了蛋白、色素、脂類等雜質(zhì)污染,特別適用于血液包括細(xì)菌、病菌等傳染的分子檢測。溫州正規(guī)RNA提取試劑生產(chǎn)廠家
Trizol是一種總RNA抽提試劑,內(nèi)含異硫氰酸胍等物質(zhì),能迅速裂解細(xì)胞,壓制細(xì)胞釋放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法進(jìn)行提取組織或細(xì)胞中的RNA。原理:在勻質(zhì)化或溶解樣品中,Trizol試劑可保持RNA的完整性,同時(shí)能破壞細(xì)胞及溶解細(xì)胞成分。加入氯仿離心后,裂解液分層成水相和有機(jī)相。RNA存在于水相中。水相轉(zhuǎn)移后,RNA通過異丙醇沉淀回收。移去水相后,用乙醇可從中間相沉淀得到DNA,加入異丙醇沉淀可從有機(jī)相得到蛋白質(zhì)。異硫氰酸胍氯化銫超速離心法:原理:使用蛋白質(zhì)變性劑異硫氰酸胍有效壓制RNA酶的活性,經(jīng)過起始密度為1.78g/ml的氯化銫介質(zhì),進(jìn)行密度梯度超速離心,RNA沉淀于管底,而...