外泌體提取試劑廠家批發(fā)價(jià)

外泌體的提取方法：1、磁珠免疫法。外泌體表面有其特異性標(biāo)記物（如CD63、CD9蛋白），用包被抗標(biāo)記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結(jié)合，即可將外泌體吸附并分離出來(lái)。磁珠法具有特異性高、操作簡(jiǎn)便、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點(diǎn)，但是效率低，外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響，不利于下游實(shí)驗(yàn)，難以普遍普及。2、多聚物沉淀法。聚乙二醇（PEG）為常用的多聚物，可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀，早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集病毒，現(xiàn)在也被用來(lái)沉淀外泌體，其原理可能與競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合游離水分子有關(guān)。利用PEG沉淀外泌體存在不少問(wèn)題：比如純度和回收率低，雜蛋白較多（假陽(yáng)性），顆粒大小不均一，產(chǎn)生難以去除的聚合物，機(jī)械力或者吐溫-20等化學(xué)添加物將會(huì)破壞外泌體等。外泌體作為內(nèi)源性的天然藥物載體有著獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，表面由脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成。外泌體提取試劑廠家批發(fā)價(jià)

外泌體的生物學(xué)功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒，而傳統(tǒng)超速離心方法步驟繁瑣、硬件要求高、操作難度大。李記生物自主開(kāi)發(fā)的外泌體快速提取試劑盒，組分經(jīng)過(guò)優(yōu)化處理，適用于細(xì)胞培養(yǎng)上清液、血清、血漿、尿液及其他體液（腦脊液、腹水、羊水、乳汁以及唾液等）中的外泌體提取，并搭配純化過(guò)濾裝置，可快速高效地獲得高純度外泌體顆粒。注意事項(xiàng)：1.對(duì)于待測(cè)樣品粘度過(guò)大時(shí)，可將樣本用4℃預(yù)冷的1×PBS緩沖液進(jìn)行等體積稀釋處理。2.當(dāng)血清、血漿、唾液等樣品收獲的外泌體濃度較高，收獲的外泌體顆粒無(wú)法通過(guò)EPF柱純化時(shí)，可用4℃預(yù)冷的1×PBS進(jìn)行稀釋后再通過(guò)EPF柱離心。3.針對(duì)外泌體標(biāo)志蛋白（CD63,CD9,CD81等）進(jìn)行Westernblot檢測(cè)，可以鑒定所提的外泌體。通過(guò)超速離心(120000g/分鐘)20小時(shí)以上才能獲得足夠的外泌體量成都外泌體提取試劑直銷(xiāo)價(jià)人尿液來(lái)源細(xì)胞的外泌體的獲取方法，是首先分離培養(yǎng)人尿液來(lái)源細(xì)胞并收集培養(yǎng)基。

由歐洲多國(guó)細(xì)胞外囊泡領(lǐng)域的學(xué)者發(fā)起并成立的國(guó)際細(xì)胞外囊泡協(xié)會(huì)（ISEV）于2014年在協(xié)會(huì)會(huì)刊Journal of Extracellular Vesicles發(fā)表了一個(gè)指導(dǎo)性意見(jiàn)，也就是我們常說(shuō)的MISEV2014。2018版《指導(dǎo)要求》進(jìn)行了修訂。2018版的《指導(dǎo)要求》首先討論了對(duì)這些細(xì)胞來(lái)源的非細(xì)胞具膜結(jié)構(gòu)如何稱(chēng)呼。學(xué)者們普遍認(rèn)為應(yīng)當(dāng)使用細(xì)胞外囊泡（extracellular vesicle）來(lái)稱(chēng)呼這些具膜囊泡，當(dāng)我們使用常規(guī)方法分離這些結(jié)構(gòu)時(shí)不推薦使用其他的名稱(chēng)來(lái)稱(chēng)呼它們。

外泌體的提取、分離方法：開(kāi)發(fā)高效、快速、穩(wěn)定，并且保持外泌體結(jié)構(gòu)和生物功能完整性的方法，是目前外泌體應(yīng)用于臨床的基礎(chǔ)和前提。從細(xì)胞上清和體液中提取分離外泌體的方法很多，但是外泌體的純度和產(chǎn)量卻和分離方法息息相關(guān)。通常分離步驟少、產(chǎn)率高，但是純度會(huì)受到影響。鑒于每種分離方法都有其優(yōu)缺點(diǎn)，實(shí)驗(yàn)可以根據(jù)樣本來(lái)源、下游實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡?，選擇合適的外泌體分離方法。2015年，國(guó)際囊泡組織(InternationSocietyforExtracelluarVesicles,ISEV)指出，簡(jiǎn)單依靠一種分離方法得到的外泌體的純度和產(chǎn)量都難滿足實(shí)驗(yàn)的需求。因此，推薦聯(lián)合使用各種方法，從而得到高純度和高產(chǎn)量的外泌體。外泌體提?。壕哂懈哒扯鹊纳飿悠?。

外泌體研究的主要應(yīng)用：外泌體的功能取決于其所來(lái)源的細(xì)胞類(lèi)型，其可參與到機(jī)體免疫應(yīng)答、抗原提呈、細(xì)胞遷移、細(xì)胞分化、一些病癥侵襲等方方面面。有研究表明一些病癥來(lái)源的外泌體參與到一些病癥細(xì)胞與基底細(xì)胞的遺傳信息的交換，從而導(dǎo)致大量新生血管的生成，促進(jìn)了一些病癥的生長(zhǎng)與侵襲。一些病癥。一些病癥轉(zhuǎn)移。來(lái)自白血病干細(xì)胞的外泌體促進(jìn)急性骨髓性白血?。ˋML）細(xì)胞的增殖、遷移和壓制細(xì)胞凋亡。治病靶標(biāo)。利用外泌體遞送小干擾RNA來(lái)沉默KRASG12D，從而特異性高效靶向至胰腺病細(xì)胞，以明顯降低RAS活化、病細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移過(guò)程。免疫。β細(xì)胞將含有蛋白質(zhì)和miRNA的外泌體釋放到細(xì)胞外，并可轉(zhuǎn)移到其他代謝部位或免疫內(nèi)皮細(xì)胞，有利于維持葡萄糖體內(nèi)平衡或造成胰島素抵抗。心血管。外泌體介導(dǎo)miR-155從平滑肌細(xì)胞轉(zhuǎn)移到內(nèi)皮細(xì)胞導(dǎo)致了內(nèi)皮細(xì)胞的損傷促進(jìn)動(dòng)脈硬化。分子標(biāo)記。疾病診斷。在酒精性肝病、NASH、菌類(lèi)性肝炎、藥物性肝損傷和肝細(xì)胞病中發(fā)現(xiàn)循環(huán)EVs的水平上升。預(yù)后標(biāo)志外泌體提?。捍胖榉ň哂刑禺愋愿摺⒉僮骱?jiǎn)便、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點(diǎn)。合肥正規(guī)外泌體提取試劑推薦廠家

外泌體提?。撼x法是較常用的外泌體純化手段，采用低速離心、高速離心交替進(jìn)行。外泌體提取試劑廠家批發(fā)價(jià)

外泌體的提取、分離方法：免疫親和層析法。免疫親和層析法是利用生物體內(nèi)存在的抗原、抗體之間高度特異性的親和力進(jìn)行分離的方法，主要用于生物大分子的分離、純化。將其應(yīng)用于外泌體的分離主要是借助外泌體表面的特異性抗體，如TSG101或四跨膜蛋白。此方法的原理是利用抗原抗體的特異性結(jié)合，只有囊泡表面有特異性的抗體才可以被識(shí)別，這使得提取的外泌體純度高，但是產(chǎn)量低。Zarovni等分別用超速離心、密度梯度離心和免疫層析法，從血漿和細(xì)胞上清中提取外泌體蛋白，結(jié)果表明，免疫親和層析法得到的外泌體表面存在多種標(biāo)記蛋白(Alix、CD9、CD63)，同時(shí)，ELISA和PCR結(jié)果也證明了該方法的可行性。外泌體提取試劑廠家批發(fā)價(jià)