徐州RNA提取試劑直銷廠家

與DNA不同，RNA一般為單鏈長分子，不形成雙螺旋結構，但是很多RNA也需要通過堿基配對原則形成一定的二級結構乃至三級結構來行使生物學功能。RNA的堿基配對規(guī)則基本和DNA相同，不過除了A-U、G-C配對外，G-U也可以配對。在細胞中，根據結構功能的不同，RNA主要分三類，即tRNA（轉運RNA），rRNA（核糖體RNA），mRNA（信使RNA）。mRNA是合成蛋白質的模板，內容按照細胞核中的DNA所轉錄；tRNA是mRNA上堿基序列（即遺傳密碼子）的識別者和氨基酸的轉運者；rRNA是組成核糖體的組分，是蛋白質合成的工作場所?？俁NA提取試劑是廣譜型總RNA提取試劑。實驗操作快速方便，顏色鮮明，便于分層。徐州RNA提取試劑直銷廠家

RNA提?。侯A備工作RNA酶（Rnase）是導致RNA降解較主要的物質。此酶非常穩(wěn)定，在一些極端的條件下只可暫時失活，但限制因素去除后又迅速恢復活性。常規(guī)高溫高壓滅菌方法和蛋白壓制劑不能使所有的Rnase完全失活。1.它普遍存在于人的皮膚上，因此制備RNA時必須戴手套。2.RNase的又一污染源是取液器。根據取液器制造商的要求對取液器進行處理。一般情況下采用以DEPC配制的70%乙醇擦洗取液器的內部和外部，可基本達到要求。3.塑料制品、玻璃和金屬物品的處理。廈門石家莊RNA提取試劑快速程序在25-40分鐘內提供高質量的總RNA。

RNA提取：預備工作（1）塑料制品：盡量使用一次性無菌塑料制品。已標明RNase-free的塑料制品，如沒有開封使用過，通常不必再處理。處理的步驟如下：O在玻璃燒杯中注入去離子水，加入DEPC使其終濃度為0.05%~0.1%（DEPC-H2O）。（DEPC二乙基焦碳酸酯為活性很強的劇毒物，須在通風櫥中小心使用）O將待處理的塑料制品放入一個可以高溫滅菌的容器中，注入DEPC-H2O，使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中，在通風柜中37℃或室溫下處理過夜。O將DEPC-H2O小心倒入廢液瓶中，將裝有DEPC-H2O處理過的塑料制品的容器以鋁箔封口，高溫高壓蒸汽滅菌至少30分鐘。O滅菌塑料制品烘烤干燥，置潔凈處備用。（2）玻璃和金屬物品250℃烘烤3小時以上。

總RNA提取試劑是廣譜型總RNA提取試劑。實驗操作快速方便，顏色鮮明，便于分層。本試劑適用范圍普遍，可以從動物組織、植物材料、各種微生物及培養(yǎng)細胞等樣品中提取總RNA。該方法對少量的組織(50-100mg)和細胞(5×106)以及大量的組織(≥1g)和細胞(>107)均有較好的分離效果。樣品在總RNA提取試劑中被充分裂解的同時能夠較大限度地保證RNA的完整性。在加入氯仿離心后，溶液會分成三層：上層無色水相、中間層和下層紅色有機相，RNA分布在上清層中。收集上清層后，經異丙醇沉淀便可以回收得到總RNA。提取的總RNA完整性好，無蛋白和DNA污染，可用于各種分子生物學常規(guī)實驗，如RT-PCR、Real-timeRT-PCR、Northernblot、DotBlot、體外翻譯等。提取的RNA樣品中不應存在對酶存在壓制作用的有機溶劑及過高濃度的金屬離子。

細胞RNA提取的方法：實驗提取步驟：標準Trizol提取步驟為液氮研磨--加入Trizol裂解--加入氯仿抽提--離心--加入氯丙醇沉淀--離心--酒精洗滌--離心。將細胞培養(yǎng)皿置于冰上，加入Trizol裂解5-10分鐘，用泵頭輕輕吹打后吸取液體放入進口EP管中。加入1/5體積的氯仿，上下混勻液體，4度靜置10-15分鐘。（氯仿為有機溶劑，有效的使有機相和無機相迅速分離。有機相中主要是酚和蛋白結合，從而使得蛋白和RNA脫離，RNA進入水相）。4度離心15分鐘，一定注意選擇低溫離心。離心后分成三層，RNA在上清里，從離心機輕輕拿出EP管，以免管內物質震蕩導致下層沉淀激起。吸取上清的時候一定要動作輕柔，切忌吸取太多，一般吸到400-500ul，避免吸到下層沉淀，將液體置于新的EP管中。加入等體積異丙醇，4度靜置10min，然后12000rpm離心10min。血漿/血清RNA提取試劑盒：總RNA吸附柱保證RNA提取速度快，提取效率高。廈門RNA提取試劑產品介紹

細菌總ＲＮＡ提取試劑盒：提取的總RNA純度高，沒有DNA和蛋白質污染，適用于RT-PCR。徐州RNA提取試劑直銷廠家

昆蟲RNA柱式提取試劑盒使用方法：將一半的溶液轉移到離心吸附柱中，12000rmp室溫離心半分鐘，棄穿透液。將剩下的一半溶液轉移到同一離心吸附柱中，12000rmp室溫離心半分鐘，棄穿透液。加0.7mL通用洗柱液，室溫12000rmp離心半分鐘，棄穿透液。加0.3mL通用洗柱液，室溫12000rmp離心半分鐘，棄穿透液。此步可以省略。室溫12000rmp離心半分鐘。此步十分重要，否則殘留的乙醇會影響RNA的使用。將離心吸附柱轉移到RNase-free收集管中，加入50～100μLRNA洗脫液，室溫放置1～2分鐘。12000rmp室溫離心半分鐘，離心管中溶液即為RNA樣品，可以立即使用或存放于-80℃待用。徐州RNA提取試劑直銷廠家