激光破膜儀的操作流程是什么？

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上海嵩皓科學儀器有限公司2025-07-03

一、操作前準備設備檢查與調(diào)試開機預熱：啟動激光破膜儀及配套顯微鏡，確保設備運行穩(wěn)定，激光系統(tǒng)校準無誤（如光斑聚焦、能量參數(shù)初始化）。參數(shù)設置：根據(jù)操作目的（如輔助孵化、活檢打孔）和胚胎 / 卵母細胞狀態(tài)（如透明帶厚度、發(fā)育階段），預設激光參數(shù)（包括功率、脈沖次數(shù)、脈沖寬度等，通常功率范圍在 1-10mW，脈沖次數(shù) 1-5 次）。無菌環(huán)境準備：操作臺消毒，更換無菌耗材（如培養(yǎng)皿、顯微操作針、吸管），確保操作區(qū)域符合 IVF 實驗室無菌標準。樣本準備將待處理的胚胎或卵母細胞轉(zhuǎn)移至含培養(yǎng)液的無菌培養(yǎng)皿中，置于顯微鏡載物臺，調(diào)整焦距使透明帶清晰成像。標記目標區(qū)域：通過顯微鏡目鏡或顯示屏定位需破膜的位置（如輔助孵化時選擇透明帶較薄處，活檢時避開內(nèi)細胞團）。二、主要操作步驟定位與瞄準通過設備的定位系統(tǒng)（如 Red-I 目標定位器、十字光標）將激光光斑精確對準目標區(qū)域，確保光斑聚焦于透明帶表面（避免聚焦過深損傷內(nèi)部細胞）。若設備支持動態(tài)追蹤（如 DTS 系統(tǒng)），可通過計算機控制激光頭移動，實現(xiàn)自動化定位，減少手動操作誤差。激光發(fā)射與破膜確認參數(shù)無誤后，啟動激光發(fā)射（單脈沖或多脈沖模式），通過激光的光熱效應或光機械效應在透明帶上形成小孔（孔徑通常為 5-30μm，根據(jù)需求調(diào)整）。實時觀察破膜效果：通過顯微鏡確認透明帶是否成功打孔，孔的大小和位置是否符合預期，避免過度照射導致胚胎熱損傷。操作后處理破膜完成后，立即將胚胎 / 卵母細胞轉(zhuǎn)移至新鮮培養(yǎng)液中，避免長時間暴露在操作環(huán)境中。記錄操作參數(shù)和結(jié)果（如打孔位置、脈沖次數(shù)、胚胎狀態(tài)），納入實驗室操作日志。三、操作后設備維護關(guān)閉激光系統(tǒng)和顯微鏡，清潔載物臺及接觸區(qū)域，避免培養(yǎng)液殘留污染。定期對激光系統(tǒng)進行校準（如光斑一致性、能量穩(wěn)定性），確保設備性能符合臨床或?qū)嶒炓蟆?