庫(kù)爾勒海洋桿菌

細(xì)胞壁缺陷型細(xì)菌培養(yǎng)基（L-型細(xì)菌培養(yǎng)基）是一種為支持細(xì)胞壁缺失或缺陷型細(xì)菌（如L-型細(xì)菌）生長(zhǎng)而設(shè)計(jì)的高滲、低毒、富營(yíng)養(yǎng)的培養(yǎng)基。這類(lèi)細(xì)菌因缺乏完整的細(xì)胞壁，不能耐受常規(guī)培養(yǎng)基的滲透壓，因此必須在培養(yǎng)基中加入高濃度的滲透穩(wěn)定劑，如蔗糖（10–15%）、NaCl（2–5%）或甘露醇，以維持細(xì)胞膜的穩(wěn)定性，防止細(xì)胞破裂。L-型細(xì)菌通常由某些抗生物質(zhì)（如青霉素、頭孢類(lèi)）誘導(dǎo)產(chǎn)生，也可在某些慢性沾染或免疫抑制狀態(tài)下自然出現(xiàn)。由于其生長(zhǎng)緩慢、形態(tài)多變、常規(guī)培養(yǎng)難以檢出，因此需要的培養(yǎng)基進(jìn)行分離與培養(yǎng)。細(xì)胞壁缺陷型細(xì)菌培養(yǎng)基通常以腦心浸液（BHI）或蛋白胨酵母膏為基礎(chǔ)，提供豐富的氨基酸、維生素和其他生長(zhǎng)因子，促進(jìn)L-型細(xì)菌的復(fù)蘇與增殖。部分配方還會(huì)加入馬血清或人血清（5–10%），以提供膽固醇和脂質(zhì)，進(jìn)一步增強(qiáng)膜的穩(wěn)定性。該培養(yǎng)基可用于臨床標(biāo)本（如尿液、血液、關(guān)節(jié)液）中L-型細(xì)菌的分離，尤其適用于慢性、反復(fù)沾染但常規(guī)培養(yǎng)陰性的病例。接種后通常在35–37℃、5% CO?條件下培養(yǎng)3–7天，L-型細(xì)菌可形成“油煎蛋”樣菌落，即致密、邊緣擴(kuò)散的微小菌落，需用倒置顯微鏡觀(guān)察確認(rèn)。這種革蘭氏陰性、嚴(yán)格好氧的桿狀細(xì)菌，泛分布于土壤和水體中。庫(kù)爾勒海洋桿菌

MB培養(yǎng)基基礎(chǔ)（Marine Broth Base）是一種專(zhuān)為海洋細(xì)菌設(shè)計(jì)的富營(yíng)養(yǎng)液體培養(yǎng)基，由蛋白胨、酵母粉及多種無(wú)機(jī)鹽組成，pH 7.2–7.6，滲透壓與海水相當(dāng)。配方中氯化鈉濃度約2–3%，并補(bǔ)充鎂、鉀、鈣等海水中主要離子，可瞬時(shí)啟動(dòng)依賴(lài)高鹽環(huán)境的嗜鹽菌與耐鹽菌，縮短延滯期。實(shí)驗(yàn)室常規(guī)做法是將培養(yǎng)基干粉溶解于蒸餾水后，補(bǔ)加陳海水或人工海鹽，即可恢復(fù)接近自然海水的離子譜，使挑剔的海洋放線(xiàn)菌、弧菌、假單胞菌等迅速進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)，用于后續(xù)分離、保藏或活性物質(zhì)篩選。由于海洋微生物常產(chǎn)色素、抗生物質(zhì)及胞外多糖，MB培養(yǎng)基的高營(yíng)養(yǎng)特性可充分展現(xiàn)這些次級(jí)代謝潛能：弧菌在28℃、180 r/min振蕩培養(yǎng)12小時(shí)，菌濃即可達(dá)10? CFU/mL，菌液呈乳白或淡粉；某些Planococcus則分泌墨藍(lán)色素，使整瓶培養(yǎng)液變?yōu)榈逅{(lán)，成為天然色素研究的理想起點(diǎn)。若需固體培養(yǎng)，只需補(bǔ)加1.5%瓊脂，即成MBA平板，可在表面涂布沉積物懸液，28℃培養(yǎng)2–3天，挑取形態(tài)各異的單菌落進(jìn)行16S rDNA鑒定，流程簡(jiǎn)潔高效。在質(zhì)量控制方面，MB培養(yǎng)基需用人工海水或陳海水配制，切忌直接使用自來(lái)水，以免鈣鎂離子不足或氯殘留抑制菌體；滅菌后若出現(xiàn)沉淀，多為鎂鹽析出，可50℃水浴復(fù)溶，不影響使用。

鹽反硝化枝芽孢桿菌（Virgibacillus halodenitrificans）是芽孢桿菌科中兼具“嗜鹽”與“反硝化”雙重技能的稀有物種。模式菌株 ATCC 49067 分離自法國(guó)太陽(yáng)能鹽場(chǎng)，可在 2–23 % NaCl、10–45 °C 范圍內(nèi)生長(zhǎng)，更適鹽度 3–7 %、pH 7.4–7.5，細(xì)胞壁含 meso-DAP，肽聚糖厚且膜脂分支，賦予其耐高滲與堿脅迫的能力。一、鹽中反硝化該菌攜帶完整的 narG/napA-nirK-nor-nosZ 基因簇，能在 3–12 % 鹽度下將 NO?? 依次還原為 N?，并同步積累四氫嘧啶作為相容溶質(zhì)，既完成脫氮又抵御滲透沖擊。實(shí)驗(yàn)室搖瓶試驗(yàn)顯示，鹽度 8 % 時(shí)其對(duì) NO??-N 去除率仍達(dá) 90 % 以上，N?O 釋放量低于檢測(cè)限，為高鹽廢水生物脫氮提供了“零碳源”方案。二、油田與暗管應(yīng)用菌株 WH-6 被制成“熱-鹽雙耐”菌劑，在 55–80 °C、0.5–3.5 % NaCl 的采出水體系中，通過(guò)優(yōu)先利用 NO?? 作電子受體，抑制硫酸鹽還原菌活性，使 H?S 產(chǎn)量下降 70 %，延長(zhǎng)注水井管柱壽命。同時(shí)，含該菌的清淤劑與多孔沸石復(fù)配，用于鹽堿地暗管排鹽，一年后鹽水收集率提高 35 %，出口渾濁度降至 4.7 mg L?1，明顯緩解因泥沙堵塞造成的維護(hù)難題。三、農(nóng)業(yè)與生態(tài)修復(fù)在 1 % 鹽度盆栽中，接種 10? CFU g?1 土壤，可使生菜根際鉀提高 20 %，硝酸鹽含量下降 15 %，產(chǎn)量增 12 %。

侄子根瘤菌是土壤里的微型氮廠(chǎng)，直徑不過(guò)微米，卻能把天空搬上餐桌。當(dāng)春雨浸潤(rùn)，休眠的它隨水流游向豆科稚嫩的根毛，像機(jī)敏的牧羊犬識(shí)別前列聲啼哭。雙方以化學(xué)密語(yǔ)互通：根分泌類(lèi)黃酮，菌回贈(zèng)Nod因子，根毛收到暗號(hào)立刻蜷曲內(nèi)陷，把菌請(qǐng)進(jìn)“客廳”，并發(fā)出指令讓皮層細(xì)胞分裂，幾天便鼓出粉白瘤狀“育嬰室”。瘤內(nèi)氧氣被植物合成的血紅蛋白調(diào)到恰好，菌體也變形為膨大“類(lèi)菌體”，固氮酶開(kāi)始運(yùn)轉(zhuǎn)，把空氣中占七成卻極穩(wěn)定的N?裂成NH?，再經(jīng)谷氨酰胺合成酶轉(zhuǎn)化為氨基酸，沿維管束晝夜輸送給宿主，自己只留一口碳糖作為“房租”。溫室示蹤顯示，一畝接種的春豌豆可少施18公斤尿素，籽粒蛋白卻增3.6%，相當(dāng)于多收兩袋奶粉；收獲后根瘤脫落，礦化釋氮，后茬玉米吸氮量提15%，土壤硝態(tài)淋失降四成，地下水不再喊“又咸又綠”。在西南山區(qū)，農(nóng)民把菌劑與草木灰拌種，坡地扁豆畝產(chǎn)翻半，省錢(qián)買(mǎi)化肥，村里小學(xué)因此添了圖書(shū)角。更妙的是，菌渣富含多糖，能把沙粒粘成團(tuán)粒，三年后板結(jié)田的孔隙度增加一成，蚯蚓回歸，雨后不再硬如磚。如今生物公司把菌液封裝成鋁箔袋，春耕拌種即可，比化肥便宜三成，比糞肥干凈百倍。鼠傷寒沙門(mén)菌經(jīng)胃入腸，在腸道內(nèi)增殖，粘附于腸黏膜上皮細(xì)胞，進(jìn)而侵入固有層，釋放有毒物質(zhì)，導(dǎo)致其充血。

環(huán)狀芽孢桿菌（Bacillus circulans）是芽孢桿菌屬的“多面手”，因菌落邊緣呈規(guī)則的環(huán)狀擴(kuò)散而得名。菌體短桿、革蘭氏陽(yáng)性，具周生鞭毛，可形成橢圓芽孢，更適溫度30–37 ℃，pH 6–9，廣分布于土壤、淡水與海洋沉積物中。一、細(xì)胞壁“”該菌能產(chǎn)生幾丁質(zhì)酶、β-1,3-葡聚糖酶和纖維素酶，可分解菌細(xì)胞壁、植物殘?bào)w和甲殼類(lèi)廢料，為碳循環(huán)打開(kāi)“綠色通道”。實(shí)驗(yàn)室條件下，其幾丁質(zhì)酶粗酶液4 h內(nèi)可降解蟹殼粉60 %，為甲殼素提取提供環(huán)保方案。二、生物防治與促生菌株BC-01分泌circulin A/B環(huán)肽，對(duì)立枯絲核菌、番茄青枯拉爾氏菌抑菌帶寬達(dá)25 mm；同時(shí)產(chǎn)IAA 20 mg·L?1，使玉米根長(zhǎng)增30 %，吸磷量提22 %。大棚試驗(yàn)每畝滴灌200 g菌粉，黃瓜枯萎病指下降40 %，產(chǎn)量增12 %。三、工業(yè)酶寶庫(kù)環(huán)狀芽孢桿菌的堿性蛋白酶在pH 10、50 ℃下活性比較高，已用于無(wú)磷洗滌劑，血漬去污力提升30 %；耐熱β-淀粉酶可將淀粉轉(zhuǎn)化為麥芽糖，糖漿得率提高15 %，為食品與發(fā)酵工業(yè)提供綠色催化劑。四、醫(yī)藥與環(huán)保該菌能合成胞外多糖，具有良好的乳化和增稠性能，已用于面包保鮮，貨架期延長(zhǎng)3天。該菌的耐熱密碼在于：細(xì)胞膜富含支鏈脂肪酸和鈣-吡啶二羧酸復(fù)合物，降低膜流動(dòng)性。紫色紅曲

這種細(xì)菌的蛋白質(zhì)降解能力較強(qiáng)，能夠分解復(fù)雜的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，這在生物技術(shù)應(yīng)用中具有潛在用途。庫(kù)爾勒海洋桿菌

嗜碳芽孢桿菌（Bacillus carboniphilus）是芽孢桿菌屬里少見(jiàn)的“高碳”。菌體桿狀、革蘭氏陽(yáng)性，可形成橢圓芽孢，更適溫度 45–50 ℃，pH 7.0–8.5，可在高濃度可溶性淀粉、糖蜜或木質(zhì)纖維素水解液中快速生長(zhǎng)，因而得名“碳愛(ài)好者”。一、高效利用碳源菌株 ATCC 700101 攜帶多拷貝 α-淀粉酶、普魯蘭酶和木聚糖酶基因，48 h 內(nèi)可將 15 % 淀粉液化糖化至還原糖 180 g L?1，轉(zhuǎn)化率 > 90 %，為濃醪發(fā)酵提供廉價(jià)糖源；與酵母共培養(yǎng)，乙醇產(chǎn)量提 12 %，蒸餾能耗降 8 %。二、高滲耐受胞內(nèi)積累相容溶質(zhì)四氫嘧啶，使菌體在糖濃度 300 g L?1、滲透壓 1.8 MPa 下仍保持 80 % 活性；芽孢耐 80 ℃ 30 min，便于濃糖液滅菌后直投，縮短發(fā)酵周期 12 h。三、農(nóng)業(yè)應(yīng)用菌株 BC-20 產(chǎn) IAA 20 mg L?1 并溶磷 2.9 mg L?1，玉米盆栽根長(zhǎng)增 28 %，吸磷量提 22 %；與秸稈復(fù)配堆肥，堆溫 24 h 升至 65 ℃，纖維素降解率提高 30 %，堆肥周期縮短 7 d，殺滅病原菌和雜草種子效果明顯。四、工業(yè)酶潛力其耐熱耐堿普魯蘭酶更適 pH 9、65 ℃，已用于淀粉糖化“一步法”，節(jié)省中和酸 20 %；木聚糖酶在 pH 10、60 ℃仍保持 85 % 活性，用于紙漿漂白，氯用量減少 30 %，降低可吸附有機(jī)鹵化物（AOX）排放。庫(kù)爾勒海洋桿菌