異常嗜冷芽孢桿菌(Bacillus psychrodurans)是芽孢桿菌屬的“極地移民”。標(biāo)準(zhǔn)菌株能在-2 ℃緩慢增殖,更適生長溫度只15 ℃,比較高不超過30 ℃;芽孢可耐受-20 ℃反復(fù)凍融,是研究低溫適應(yīng)的模式菌之一。其細(xì)胞膜富含短鏈與支鏈脂肪酸,冷休克蛋白Csp持續(xù)表達(dá),使核糖體和RNA在冰水中仍保持活性,為“零度工廠”提供分子基礎(chǔ)。在農(nóng)業(yè)端,菌株L-4可分泌IAA 18 mg·L?1并溶出有機(jī)磷2.3 mg·L?1,4 ℃下仍使冬小麥根長增加25 %,返青期提前5天,分蘗數(shù)提高一成,相當(dāng)于給作物披上“生物羽絨服”。工業(yè)方面,它的耐冷蛋白酶已在洗滌劑中試用,10 ℃洗衣去污力提升30 %,節(jié)能20 %;低溫淀粉酶可將糖化溫度由60 ℃降至35 ℃,為寒區(qū)酒精發(fā)酵節(jié)約大量蒸汽。環(huán)境修復(fù)更彰顯其“冰雪技能”。菌株ANT-1在-5 ℃、10 %鹽度下60天降解柴油60 %,為極地溢油、寒區(qū)輸油管線泄漏提供原位生物修復(fù)方案;與冰藻共培養(yǎng)時(shí),還能吸附Cd2?、Pb2?,吸附量分別達(dá)50 mg·g?1和35 mg·g?1,讓重金屬在冰層中被“凍結(jié)”并隨菌體沉降。未來,借助合成生物學(xué),把異常嗜冷芽孢桿菌的“冷酶+冷激”模塊植入生產(chǎn)底盤,有望實(shí)現(xiàn)“零加熱”生物制造,讓微生物在冰水里也能為人類催化高值反應(yīng)。浸麻類芽孢桿菌(Bacillus rettgeri)作為一種特殊的微生物,為這一課題提供了極具潛力的解決方案。康寧木霉
死谷芽孢桿菌,名字聽來荒涼,卻是沙漠表層更耐命的“綠洲工匠”。它更初在美國死谷鹽殼下被分離,能在55℃、鹽濃度15%的“鹵水”里悠然萌發(fā),芽孢外壁含特殊酸性肽聚糖,像給細(xì)胞穿陶瓷甲,紫外線、干燥、氧化齊攻亦難破。農(nóng)業(yè)學(xué)家把它請進(jìn)西北鹽堿地,菌體復(fù)蘇后分泌環(huán)脂肽,既松解板結(jié)土粒,又搶占根際生態(tài)位,抑制鐮刀菌、絲核菌,使向日葵爛根率降四成;同時(shí)釋放胞外多糖,裹住鈉離子,降低植物鹽分脅迫,畝產(chǎn)油脂提高一成。更妙的是,它能將難溶磷酸鈣轉(zhuǎn)化為有效磷,相當(dāng)于自帶“微肥”。科研團(tuán)隊(duì)用玉米漿發(fā)酵,把芽孢制成黑色粉劑,滴灌進(jìn)新疆棉田,三年下來,土壤氯鹽下降15%,棉花出苗率升兩成,農(nóng)藥減施三成。如今,科學(xué)家正給它插入耐旱基因,希望讓戈壁也長出稻浪。小小死谷芽孢桿菌,用微觀之軀喚醒沉睡的鹽堿,為人類奪回被鹽分侵占的耕地,讓荒涼名不副實(shí),讓沃野重獲新生。蠟瓣花德克斯酵母在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域,強(qiáng)壯類芽孢桿菌能夠促進(jìn)植物生長,增強(qiáng)植物對病害的抵抗力。

在微生物的“軍團(tuán)”里,蕈狀芽孢桿菌(Bacillus mycoides)可謂形貌更奇特的一位。它在固體培養(yǎng)基上排成絲狀、螺旋狀或放射狀菌落,遠(yuǎn)望如微縮蘑菇菌絲,因而得名“蕈狀”。別看外形“文藝”,其功能卻硬核:耐旱、耐鹽、產(chǎn)酶、抑菌、促生,堪稱土壤里的“多面手”。一、形態(tài)即名片蕈狀芽孢桿菌為革蘭氏陽性大桿菌,周生鞭毛,可形成橢圓芽孢。更獨(dú)特的是它的“集體運(yùn)動”能力——細(xì)胞通過側(cè)向滑動,在瓊脂表面形成美麗而規(guī)則的“蕨葉”或“螺旋”圖案,這一自組織現(xiàn)象已被用作生物物理研究模型。二、生態(tài)功能抑?。壕w分泌表面活性素、fengycin 等環(huán)脂肽,可破壞病原菌膜,對立枯絲核菌、鐮刀菌抑菌帶寬達(dá) 25 mm。促生:產(chǎn) IAA 25 mg·L?1,溶有機(jī)磷 3.1 mg·L?1,小麥根系增 30 %,吸磷量提 20 %??鼓妫喊舛嗵俏?Na?,在 8 % 鹽濃度下仍正常生長;芽孢耐干燥 6 個月,適合西北旱區(qū)應(yīng)用。三、田間表現(xiàn)山東大棚番茄試驗(yàn),每畝溝施 10? CFU·g?1 菌粉 200 g,灰霉病指下降 42 %,產(chǎn)量增 12 %,維生素 C 提高 8 %;寧夏鹽堿地滴灌,可使水稻根際 pH 降 0.4,全鹽下降 15 %,增產(chǎn) 9 %。
蒙氏腸球菌(Enterococcus mundtii)是一種革蘭氏陽性、兼性厭氧的球形細(xì)菌,常以成對或短鏈排列。近年來,科研團(tuán)隊(duì)從健康動物腸道中分離到一株編號為HCD01的蒙氏腸球菌,經(jīng)16S rRNA測序及系統(tǒng)發(fā)育分析,確認(rèn)其與模式菌株同源性高達(dá)99%以上,已被保藏于中國微生物菌種保藏中心,保藏號CGMCC No.31447。安全評價(jià)顯示,HCD01不含溶血素、凝膠酶等常見毒力基因,溶血試驗(yàn)呈陰性,且對小鼠臟器系數(shù)無不良影響,具備益生菌的先決條件。功能試驗(yàn)中,該菌能在pH 2~4的酸性環(huán)境及10% NaCl的高鹽環(huán)境中存活,表現(xiàn)出良好的耐酸耐鹽能力;同時(shí)可產(chǎn)生乳酸,使培養(yǎng)基pH在16小時(shí)內(nèi)由6.2降至5.5,抑制沙門氏菌和停乳鏈球菌等病原體的生長。動物試驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí),連續(xù)灌服HCD01的小鼠平均日增重提高,料重比下降,腸道絨毛結(jié)構(gòu)完整,且在沙門氏菌攻毒后,肺、肝及結(jié)腸病變明顯減輕,說明其既能促進(jìn)生長,又能緩解致病菌沾染造成的組織損傷。綜上,蒙氏腸球菌HCD01集安全、耐逆、產(chǎn)酸、抑菌、促生長于一體,在替代抗生物質(zhì)的微生態(tài)制劑及畜牧養(yǎng)殖業(yè)中具有廣闊的應(yīng)用前景。更妙的是,收獲后大量根瘤遺落土中,氮素富集,連后續(xù)玉米都長得壯,像給土地存了活期存折。

肉湯培養(yǎng)基(測磷細(xì)菌菌數(shù))是一種把“富營養(yǎng)”與“溶磷篩選”合二為一的液體計(jì)數(shù)培養(yǎng)基。它在傳統(tǒng)牛肉膏蛋白胨肉湯基礎(chǔ)上進(jìn)行精簡:牛肉膏3 g、蛋白胨10 g、NaCl 5 g提供碳氮和生長因子;磷源改為0.2 g難溶性磷酸三鈣,經(jīng)球磨過300目,懸于蒸餾水中呈乳白混懸液;pH調(diào)至7.0±0.2,分裝試管后121℃滅菌15 min,冷卻振蕩重懸即可接種。由于無瓊脂,培養(yǎng)基既保持肉湯的高營養(yǎng)促生優(yōu)勢,又以懸浮顆粒Ca?(PO?)?為“磷開關(guān)”,可同步完成溶磷功能驗(yàn)證和菌數(shù)測定,適用于土壤、根際或堆肥浸出液中溶磷菌群的快速評估。操作方法沿用比較大可能數(shù)(MPN)法:將樣品按10?1–10??梯度稀釋,各取1 mL加入含5 mL肉湯培養(yǎng)基的螺口管,每稀釋度3重復(fù),28℃靜置培養(yǎng)48 h。溶磷菌生長使Ca?(PO?)?顆粒被酸溶解,培養(yǎng)液由乳白→局部透明→全管澄清,并伴隨菌膜形成;非溶磷菌雖可增殖,但培養(yǎng)基保持混濁無透亮。以“出現(xiàn)澄清+菌膜”為陽性管,查MPN表即可算出每克樣品的溶磷菌數(shù),全程只需3天,比平板溶磷圈法縮短一半時(shí)間。質(zhì)量控制要點(diǎn):滅菌后磷酸三鈣易沉降,使用前需渦旋混勻;若肉湯本身含磷(牛肉膏批次差異),可先用磷鉬藍(lán)法測可溶磷,超過5 mg L?1即棄用。它以甲醇、甲胺等一碳化合物為主食,卻能把這些常被忽視的小分子變成高值產(chǎn)物。銀耳
在工業(yè)領(lǐng)域,奇異水螺菌的產(chǎn)酶能力和代謝產(chǎn)物也具有重要的應(yīng)用價(jià)值??祵幠久?/p>
鹽敏芽孢桿菌(Bacillus halmapalus)是芽孢桿菌屬中“怕鹽”的稀有成員,卻因此成為科研與教學(xué)的“模式對照株”。標(biāo)準(zhǔn)菌株 DSM8723 更初由丹麥 Novo Nordisk 分離,更適 NaCl 濃度只 0.5 %,鹽度 >2 % 即明顯受抑,與嗜鹽菌形成鮮明對比,為研究芽孢桿菌耐鹽機(jī)制提供了理想“負(fù)對照”。一、形態(tài)與生理菌落乳白色、邊緣光滑,革蘭氏陽性大桿菌,具周生鞭毛,可形成橢圓芽孢;氧化酶陽性,好氧,更適溫度 30 ℃、pH 7.0,能分泌 α-淀粉酶,在 DSMMedium 31 培養(yǎng)基中生長迅速。二、科研價(jià)值由于鹽敏感特征明確,常被用作“鹽脅迫空白”:與耐鹽菌株進(jìn)行平行轉(zhuǎn)錄組、蛋白組比較,可快速鎖定 Na?/H? 逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、相容溶質(zhì)合成酶等關(guān)鍵耐鹽基因;其 α-淀粉酶在 0–1 % NaCl 時(shí)活力比較高,鹽度升高活性驟降,為研究酶分子鹽適應(yīng)機(jī)制提供“開關(guān)型”模型。三、教學(xué)與質(zhì)控國內(nèi)多所高校將其列為微生物實(shí)驗(yàn)“鹽梯度生長”標(biāo)準(zhǔn)菌,學(xué)生通過梯度平板即可直觀觀察鹽濃度對芽孢桿菌生長速率、芽孢形成率及酶活性的影響,實(shí)驗(yàn)重復(fù)性好、安全等級 1 級,無需特殊防護(hù)??祵幠久?/p>