嗜堿芽孢桿菌(Bacillus alcalophilus)是芽孢桿菌屬的“高堿”。菌體桿狀、周生鞭毛,能在 pH 9–11 的極端堿性環(huán)境中旺盛生長,芽孢可耐 100 ℃ 沸水 30 min,是研究堿適應(yīng)與工業(yè)酶的模式菌株。一、耐堿機制基因組編碼多拷貝 Na?/H? 逆向轉(zhuǎn)運蛋白(nhaA、nhaC)和碳酸酐酶,將胞內(nèi)多余 Na? 泵出并維持 pH 穩(wěn)態(tài);細胞壁肽聚糖富含 meso-二氨基庚二酸,膜脂分支化程度高,為高溫高堿酶表達提供穩(wěn)定平臺。二、工業(yè)酶寶庫其耐堿淀粉酶更適 pH 10、90 ℃,用于紡織退漿可省略中和步驟,節(jié)能 15 %;耐堿蛋白酶在 pH 11、40 ℃仍保持 90 % 活性,已列入無磷洗滌劑,血漬、奶漬去污力提升 30 %;耐堿木聚糖酶用于紙漿漂白,氯用量減少 30 %,降低可吸附有機鹵化物(AOX)排放。三、農(nóng)業(yè)應(yīng)用菌株 AB-10 產(chǎn) IAA 15 mg·L?1,并溶磷 2.6 mg·L?1,使玉米根系增 28 %,吸磷量提 18 %;與秸稈復(fù)配堆肥,24 h 堆溫升至 65 ℃,纖維素降解率提高 30 %,堆肥周期縮短 7 d,殺滅病原菌和雜草種子效果明顯。四、環(huán)境修復(fù)胞外多糖能吸附 Cd2?、Pb2?,吸附量分別達 50 mg·g?1 與 35 mg·g?1;在 pH 9 的蘇打鹽堿土中定殖后,水稻產(chǎn)量增加 10 %,土壤交換性鈉下降 15 %。更妙的是,它能分解有機磷長鏈,釋放正磷酸供作物吸收,相當(dāng)于給土壤配了“微肥”。艾阿華諾卡氏菌
乳酸鐵營養(yǎng)瓊脂(Lactose Iron Nutrient Agar)是一種兼具選擇性、鑒別性與營養(yǎng)性的復(fù)合培養(yǎng)基,常用于食品、水質(zhì)及臨床標(biāo)本中革蘭陰性腸道菌的快速分離與初步鑒定。其關(guān)鍵原理在于“雙指示”設(shè)計:乳糖作為可發(fā)酵碳源,與鐵鹽共同構(gòu)成判別系統(tǒng)——能發(fā)酵乳糖的菌株產(chǎn)酸,使酚紅指示劑由紅變黃;若同時產(chǎn)氣,則可在培養(yǎng)基內(nèi)形成氣泡或裂縫。而鐵離子的加入,讓具備硫化氫(H?S)生成酶的細菌(如某些變形桿菌、沙門氏菌)將硫代硫酸鈉還原,與Fe2?結(jié)合生成黑色FeS沉淀,菌落中心呈現(xiàn)特征性黑心,實現(xiàn)“一眼辨菌”。配方上,乳酸鐵營養(yǎng)瓊脂在營養(yǎng)瓊脂基礎(chǔ)上添加1%乳糖、0.02%硫代硫酸鈉與0.02%檸檬酸鐵銨,pH調(diào)至7.4±0.2,既保證腸桿菌科的基本營養(yǎng)需求,又通過高糖與鐵鹽抑制部分非目標(biāo)菌的過度生長。傾注平板后呈淡紅色半透明,若室溫存放出現(xiàn)泛黃,說明培養(yǎng)基已酸化,需棄用。接種時,多采用分區(qū)劃線,35℃培養(yǎng)18–24小時即可讀取結(jié)果:乳糖發(fā)酵陽性菌(如大腸埃希菌)形成黃色、邊緣整齊的大菌落;乳糖陰性菌(如志賀菌)則保持紅色;若菌落中心發(fā)黑,則提示H?S陽性,需進一步做血清學(xué)或質(zhì)譜確認。發(fā)酵乳桿菌 CECT5716隨后,細菌釋放信號,誘導(dǎo)根部細胞分裂,三天鼓出乳白根瘤,像給根系掛上微型氮肥廠。

冷解糖芽孢桿菌(Bacillus psychrosaccharolyticus)是芽孢桿菌屬的“低溫工匠”。菌體在10–40℃皆能生長,更適25–30℃;芽孢橢圓、中生,可耐干燥、耐紫外,貨架期長,為制劑化提供質(zhì)量材料。其名字里的“解糖”源于強大的胞外酶系:淀粉酶、纖維素酶、瓊脂糖酶活性高,能把大分子碳源切成低聚糖,既供自己能量,也為周圍菌群“開糧倉”,成為低溫堆肥、海藻殘渣降解的先鋒。更難得的是它“抑菌+保水”雙技能。平板對峙試驗顯示,對黃瓜尖孢鐮刀菌、棉花立枯絲核菌、茄青枯拉爾氏菌等7種病原菌抑制率超50%,其中對黃瓜枯萎病原抑菌帶寬達8mm,抑制率80%以上。機理在于分泌環(huán)脂肽和胞外多糖:多糖成膜后降低葉片水分散失,同時吸附Pb2?、Cd2?、Cu2?,1h內(nèi)對鉛吸附量可達50mg/g,為重金屬污染農(nóng)田提供“微膠囊修復(fù)”。農(nóng)業(yè)應(yīng)用上,研究者將冷解糖芽孢桿菌HD-3與枯草、巨大、膠凍樣芽孢桿菌復(fù)配,再添海藻提取物、氨基酸和微量元素,制成有效活菌數(shù)2–10億/g、有機質(zhì)20–40%的“復(fù)合微生物海藻肥料”。大田試驗中,白菜、番茄、棉花增產(chǎn)幅度均超30%,線蟲侵染率下降70%,農(nóng)藥用量減少三成;在滴灌肥中添加1‰胞外多糖,玉米抗旱期延長7天,產(chǎn)量提高18%。
環(huán)狀芽孢桿菌(Bacillus circulans)是芽孢桿菌屬的“多面手”,因菌落邊緣呈規(guī)則的環(huán)狀擴散而得名。菌體短桿、革蘭氏陽性,具周生鞭毛,可形成橢圓芽孢,更適溫度30–37 ℃,pH 6–9,廣分布于土壤、淡水與海洋沉積物中。一、細胞壁“”該菌能產(chǎn)生幾丁質(zhì)酶、β-1,3-葡聚糖酶和纖維素酶,可分解菌細胞壁、植物殘體和甲殼類廢料,為碳循環(huán)打開“綠色通道”。實驗室條件下,其幾丁質(zhì)酶粗酶液4 h內(nèi)可降解蟹殼粉60 %,為甲殼素提取提供環(huán)保方案。二、生物防治與促生菌株BC-01分泌circulin A/B環(huán)肽,對立枯絲核菌、番茄青枯拉爾氏菌抑菌帶寬達25 mm;同時產(chǎn)IAA 20 mg·L?1,使玉米根長增30 %,吸磷量提22 %。大棚試驗每畝滴灌200 g菌粉,黃瓜枯萎病指下降40 %,產(chǎn)量增12 %。三、工業(yè)酶寶庫環(huán)狀芽孢桿菌的堿性蛋白酶在pH 10、50 ℃下活性比較高,已用于無磷洗滌劑,血漬去污力提升30 %;耐熱β-淀粉酶可將淀粉轉(zhuǎn)化為麥芽糖,糖漿得率提高15 %,為食品與發(fā)酵工業(yè)提供綠色催化劑。四、醫(yī)藥與環(huán)保該菌能合成胞外多糖,具有良好的乳化和增稠性能,已用于面包保鮮,貨架期延長3天。因其安全無殘留,我國年產(chǎn)量已達3.5萬噸,覆蓋333萬公頃農(nóng)田,成為用量大的微生物殺蟲劑 。

MB培養(yǎng)基基礎(chǔ)(Marine Broth Base)是一種專為海洋細菌設(shè)計的富營養(yǎng)液體培養(yǎng)基,由蛋白胨、酵母粉及多種無機鹽組成,pH 7.2–7.6,滲透壓與海水相當(dāng)。配方中氯化鈉濃度約2–3%,并補充鎂、鉀、鈣等海水中主要離子,可瞬時啟動依賴高鹽環(huán)境的嗜鹽菌與耐鹽菌,縮短延滯期。實驗室常規(guī)做法是將培養(yǎng)基干粉溶解于蒸餾水后,補加陳海水或人工海鹽,即可恢復(fù)接近自然海水的離子譜,使挑剔的海洋放線菌、弧菌、假單胞菌等迅速進入對數(shù)生長,用于后續(xù)分離、保藏或活性物質(zhì)篩選。由于海洋微生物常產(chǎn)色素、抗生物質(zhì)及胞外多糖,MB培養(yǎng)基的高營養(yǎng)特性可充分展現(xiàn)這些次級代謝潛能:弧菌在28℃、180 r/min振蕩培養(yǎng)12小時,菌濃即可達10? CFU/mL,菌液呈乳白或淡粉;某些Planococcus則分泌墨藍色素,使整瓶培養(yǎng)液變?yōu)榈逅{,成為天然色素研究的理想起點。若需固體培養(yǎng),只需補加1.5%瓊脂,即成MBA平板,可在表面涂布沉積物懸液,28℃培養(yǎng)2–3天,挑取形態(tài)各異的單菌落進行16S rDNA鑒定,流程簡潔高效。在質(zhì)量控制方面,MB培養(yǎng)基需用人工海水或陳海水配制,切忌直接使用自來水,以免鈣鎂離子不足或氯殘留抑制菌體;滅菌后若出現(xiàn)沉淀,多為鎂鹽析出,可50℃水浴復(fù)溶,不影響使用。
小小威氏芽孢桿菌,用微米之軀守護綠色豐收,讓農(nóng)藥瓶少一個,飯碗多一粒。艾阿華諾卡氏菌
膠凍樣類芽孢桿菌(Paenibacillus mucilaginosus)是土壤里會“熬膠”的硅酸鹽細菌。菌落圓潤、表面像果凍,能把礦物中的鉀、磷、硅一股腦解離出來,被農(nóng)民親切地稱作“天然第二鉀肥廠”。一、解礦機制它分泌多糖和有機酸,在鉀長石表面形成生物膜,質(zhì)子交換+絡(luò)合雙管齊下,把難溶的礦物鉀轉(zhuǎn)化為可溶性鉀,盆栽試驗顯示,土壤鉀含量可提高25%,相當(dāng)于每畝白撿3公斤K?O。二、促生抗逆產(chǎn)IAA、 gibberellin,刺激玉米、土豆側(cè)根激增30%;生成的胞外多糖保水又固粒,使沙壤土含水率提升8%,幫助作物度過春旱。三、田間成績山東大蔥示范區(qū),畝施200g(10? CFU/g)菌粉,蔥白粗度增加0.3 cm,產(chǎn)量提高12%,化肥鉀用量降20%;寧夏葡萄溝灌后,糖酸比更協(xié)調(diào),果粉增厚,貨架期延長5天。四、工業(yè)發(fā)酵以糖蜜-玉米漿為培養(yǎng)基,28℃、200 r/min發(fā)酵36 h,芽孢數(shù)可達5×10? CFU/mL,噴霧干燥存活率>90%,與腐熟雞糞造粒,制成“生物硅鉀肥”,存放18個月活菌仍大于2億/克。五、未來方向科學(xué)家正把耐鹽堿、耐重金屬基因簇導(dǎo)入該菌,構(gòu)建“解鉀-降鹽-鈍化鎘”三合一工程菌,讓鹽堿灘、礦區(qū)復(fù)墾地也能長出高產(chǎn)莊稼。艾阿華諾卡氏菌