類芽胞桿菌屬

細(xì)胞壁缺陷型細(xì)菌培養(yǎng)基（L-型細(xì)菌培養(yǎng)基）是一種為支持細(xì)胞壁缺失或缺陷型細(xì)菌（如L-型細(xì)菌）生長而設(shè)計的高滲、低毒、富營養(yǎng)的培養(yǎng)基。這類細(xì)菌因缺乏完整的細(xì)胞壁，不能耐受常規(guī)培養(yǎng)基的滲透壓，因此必須在培養(yǎng)基中加入高濃度的滲透穩(wěn)定劑，如蔗糖（10–15%）、NaCl（2–5%）或甘露醇，以維持細(xì)胞膜的穩(wěn)定性，防止細(xì)胞破裂。L-型細(xì)菌通常由某些抗生物質(zhì)（如青霉素、頭孢類）誘導(dǎo)產(chǎn)生，也可在某些慢性沾染或免疫抑制狀態(tài)下自然出現(xiàn)。由于其生長緩慢、形態(tài)多變、常規(guī)培養(yǎng)難以檢出，因此需要的培養(yǎng)基進(jìn)行分離與培養(yǎng)。細(xì)胞壁缺陷型細(xì)菌培養(yǎng)基通常以腦心浸液（BHI）或蛋白胨酵母膏為基礎(chǔ)，提供豐富的氨基酸、維生素和其他生長因子，促進(jìn)L-型細(xì)菌的復(fù)蘇與增殖。部分配方還會加入馬血清或人血清（5–10%），以提供膽固醇和脂質(zhì)，進(jìn)一步增強(qiáng)膜的穩(wěn)定性。該培養(yǎng)基可用于臨床標(biāo)本（如尿液、血液、關(guān)節(jié)液）中L-型細(xì)菌的分離，尤其適用于慢性、反復(fù)沾染但常規(guī)培養(yǎng)陰性的病例。接種后通常在35–37℃、5% CO?條件下培養(yǎng)3–7天，L-型細(xì)菌可形成“油煎蛋”樣菌落，即致密、邊緣擴(kuò)散的微小菌落，需用倒置顯微鏡觀察確認(rèn)。該菌還能合成耐高溫木聚糖酶和脂肪酶，在造紙漂白和生物柴油合成中展現(xiàn)潛力。類芽胞桿菌屬

BM液體培養(yǎng)基，全名Basal Mineral Liquid Medium，是微生物學(xué)界公認(rèn)的“極簡配方”。它只提供生命必需的礦物元素：K?HPO? 1.0 g、KH?PO? 1.0 g、MgSO?·7H?O 0.2 g、CaCl?·2H?O 0.02 g、Fe-EDTA 0.01 g，加蒸餾水至1 L，pH 6.5±0.1，無碳、無氮、無有機(jī)微量元素，因此也被稱為“空白畫布”。研究者可根據(jù)目標(biāo)菌的代謝特點(diǎn)，精確添加單一碳源（如葡萄糖、苯甲酸、甲烷）、氮源（如NH?Cl、NO??或尿素）及特定金屬，實(shí)現(xiàn)代謝通路、降解基因或耐受機(jī)制的單變量研究。BM的高純度與低背景使其成為環(huán)境微生物分離的優(yōu)先。取河水或土壤浸提液，經(jīng)0.22 μm過濾除菌后，取1 mL加入含BM的50 mL血清瓶，再投加目標(biāo)污染物（如50 mg L?1多環(huán)芳烴），28℃、150 r/min培養(yǎng)7天，即可富集到以該污染物為碳能源的降解菌群。繼代3次后，稀釋涂布于含BM的固體平板，菌落純化率可達(dá)90%以上，極大減少雜菌干擾。此外，BM培養(yǎng)基在合成生物學(xué)中亦扮演重要角色。研究者可在BM中添加特定濃度的13C-葡萄糖或1?N-NH?Cl，實(shí)現(xiàn)全菌體同位素標(biāo)記，為蛋白質(zhì)組、代謝流分析提供干凈背景；也可通過缺鐵、缺鋅的BM，研究金屬調(diào)控蛋白的功能。黏瓊脂芽孢桿菌土地鞘氨醇盒菌（Sphingopyxis terrae）是一種具有重要環(huán)境修復(fù)潛力的微生物。

PS培養(yǎng)基（Peptococcus Broth），又名消化球菌肉湯，是專為厭氧革蘭陽性球菌——消化球菌屬（Peptococcus）及消化鏈球菌（Peptostreptococcus）等嚴(yán)苛厭氧菌設(shè)計的富營養(yǎng)液體培養(yǎng)基。關(guān)鍵配方含胰酪蛋白胨15 g、酵母粉5 g、葡萄糖5 g、L-半胱氨酸0.5 g、NaCl 5 g，補(bǔ)水至1 L，pH 7.2±0.1。L-半胱氨酸兼具還原與硫源，可瞬間降低氧化還原電位至-200 mV，無需額外預(yù)還原，即開即用；葡萄糖提供可發(fā)酵碳源，使菌體在6 h內(nèi)進(jìn)入對數(shù)期，12 h活菌數(shù)可達(dá)10? CFU/mL，滿足快速擴(kuò)增需求。臨床檢驗(yàn)中，PS培養(yǎng)基常被用于厭氧菌血培養(yǎng)增菌：將5 mL靜脈血直接注入含PS的真空厭氧瓶，35℃靜置培養(yǎng)48 h，若瓶底出現(xiàn)絮狀沉淀、培養(yǎng)液混濁并伴酸臭，即提示可能存在消化球菌或厭氧鏈球菌沾染；結(jié)合MALDI-TOF質(zhì)譜，可在72 h內(nèi)完成種水平鑒定，比傳統(tǒng)厭氧平板法縮短2天?？蒲蓄I(lǐng)域，PS肉湯亦是研究厭氧菌鐵代謝、短鏈脂肪酸產(chǎn)量的優(yōu)先平臺：只需在基礎(chǔ)液中去除葡萄糖，換用可溶性淀粉或乳酸鈉，即可考察不同碳源對丁酸、己酸合成路徑的影響；若添加0.1 %血紅素，更能啟動厭氧呼吸鏈，使細(xì)胞干重提升30%。質(zhì)量控制方面，PS培養(yǎng)基滅菌后應(yīng)呈淺黃色透明，若氧化變粉，需棄用。

威氏芽孢桿菌是土壤里低調(diào)的“多面手”。它先以桿狀活菌在根際游弋，一遇干旱、高溫便迅速縮成厚壁芽孢，可耐沸水煮十分鐘、紫外曝曬兩小時，仍能在十年后遇水萌發(fā)。植保學(xué)家把它當(dāng)“殺菌劑”：芽孢復(fù)蘇后分泌表面活性素、伊枯草菌素，像微型剪刀刺破病原菌膜，對白絹、根腐、灰霉的抑制率超七成；同時誘導(dǎo)植物開啟系統(tǒng)抗性，番茄未染病就先“武裝”葉片。溫室試驗(yàn)顯示，每畝用兩百克菌粉拌基質(zhì)，黃瓜枯萎率降四成，農(nóng)藥少打一半，果實(shí)仍青亮。更妙的是，它能分解有機(jī)磷長鏈，釋放正磷酸供作物吸收，相當(dāng)于給土壤配了“微肥”。東北大豆連作田因它緩解“磷饑餓”，畝產(chǎn)增8%。如今，生物公司以玉米漿發(fā)酵罐培養(yǎng)，把芽孢制成可濕性粉劑，拌種、滴灌皆宜，保質(zhì)期兩年，運(yùn)輸不必冷鏈。科學(xué)家還在其基因組里插入耐鹽基因，讓它在西北鹽堿地也能萌發(fā)，為棄荒灘涂奪回糧田。小小威氏芽孢桿菌，用微米之軀守護(hù)綠色豐收，讓農(nóng)藥瓶少一個，飯碗多一粒。因其安全無殘留，我國年產(chǎn)量已達(dá)3.5萬噸，覆蓋333萬公頃農(nóng)田，成為用量大的微生物殺蟲劑 。

嗜碳芽孢桿菌（Bacillus carboniphilus）是芽孢桿菌屬里少見的“高碳”。菌體桿狀、革蘭氏陽性，可形成橢圓芽孢，更適溫度 45–50 ℃，pH 7.0–8.5，可在高濃度可溶性淀粉、糖蜜或木質(zhì)纖維素水解液中快速生長，因而得名“碳愛好者”。一、高效利用碳源菌株 ATCC 700101 攜帶多拷貝 α-淀粉酶、普魯蘭酶和木聚糖酶基因，48 h 內(nèi)可將 15 % 淀粉液化糖化至還原糖 180 g L?1，轉(zhuǎn)化率 > 90 %，為濃醪發(fā)酵提供廉價糖源；與酵母共培養(yǎng)，乙醇產(chǎn)量提 12 %，蒸餾能耗降 8 %。二、高滲耐受胞內(nèi)積累相容溶質(zhì)四氫嘧啶，使菌體在糖濃度 300 g L?1、滲透壓 1.8 MPa 下仍保持 80 % 活性；芽孢耐 80 ℃ 30 min，便于濃糖液滅菌后直投，縮短發(fā)酵周期 12 h。三、農(nóng)業(yè)應(yīng)用菌株 BC-20 產(chǎn) IAA 20 mg L?1 并溶磷 2.9 mg L?1，玉米盆栽根長增 28 %，吸磷量提 22 %；與秸稈復(fù)配堆肥，堆溫 24 h 升至 65 ℃，纖維素降解率提高 30 %，堆肥周期縮短 7 d，殺滅病原菌和雜草種子效果明顯。四、工業(yè)酶潛力其耐熱耐堿普魯蘭酶更適 pH 9、65 ℃，已用于淀粉糖化“一步法”，節(jié)省中和酸 20 %；木聚糖酶在 pH 10、60 ℃仍保持 85 % 活性，用于紙漿漂白，氯用量減少 30 %，降低可吸附有機(jī)鹵化物（AOX）排放。對白絹、根腐、灰霉的抑制率超七成；同時誘導(dǎo)植物開啟系統(tǒng)抗性，番茄未染病就先“武裝”葉片。雅致葡萄穗霉

耐熱芽孢芽孢桿菌是微生物世界的“高溫鐵人”。類芽胞桿菌屬

MY培養(yǎng)基（Malt-Yeast Extract Medium）是“麥芽-酵母”雙營養(yǎng)的經(jīng)典富集培養(yǎng)基，配方簡潔卻營養(yǎng)爆棚：麥芽浸粉20 g、酵母粉4 g、葡萄糖10 g，補(bǔ)水至1 L，pH自然5.6±0.2，無需調(diào)節(jié)即可釋放麥芽淀粉酶持續(xù)供糖，形成“緩釋碳源”效應(yīng)。其低pH與高還原糖組合，既能抑制多數(shù)細(xì)菌蔓延，又為酵母、絲狀菌及嗜酸微藻提供“即食”氮碳，是實(shí)驗(yàn)室搖瓶、工業(yè)菌種活化與次級代謝研究的“第一步”。在釀酒酵母中，30℃、200 r/min培養(yǎng)16 h，OD???輕松破1.5，細(xì)胞活性>95%，直接轉(zhuǎn)接乙醇發(fā)酵罐可縮短延滯期6 h；若用于產(chǎn)赤霉素藤倉鐮刀菌，只需將葡萄糖降至5 g，并補(bǔ)加0.5 g NH?NO?，28℃靜置5天，赤霉素GA?產(chǎn)量可達(dá)320 mg L?1，比PDB提高40%。MY培養(yǎng)基的另一優(yōu)勢是“可視化”：含2%瓊脂即成MYA平板，菌落形態(tài)飽滿、色素鮮艷，青霉呈藍(lán)綠，紅酵母顯玫瑰紅，常被用作教學(xué)示范板。質(zhì)量控制亦輕松：高壓后若顏色加深，說明美拉德反應(yīng)過度，可改用115℃滅菌20 min；室溫存放1個月仍澄清，即可繼續(xù)使用。憑借其組分明確、成本低廉、配制快速，MY培養(yǎng)基已從傳統(tǒng)釀酒實(shí)驗(yàn)室走向合成生物學(xué)、次級代謝與益生菌高密度發(fā)酵，成為微生物學(xué)家手中“養(yǎng)菌如泡茶”的經(jīng)典底牌。類芽胞桿菌屬