PTYG培養(yǎng)基(Peptone-Tryptone-Yeast Extract-Glucose Medium)是一種高營養(yǎng)、通用型液體培養(yǎng)基,由蛋白胨、胰蛋白胨、酵母粉和葡萄糖四種關(guān)鍵成分組成,故名“PTYG”。其配方通常為蛋白胨5 g、胰蛋白胨5 g、酵母粉5 g、葡萄糖10 g,NaCl 5 g,補(bǔ)水至1 L,pH調(diào)至7.0±0.2,適用于大多數(shù)異養(yǎng)細(xì)菌、酵母及絲狀菌的快速增殖與代謝研究。該培養(yǎng)基營養(yǎng),蛋白胨與胰蛋白胨提供多肽與氨基酸,酵母粉富含維生素B群與微量元素,葡萄糖作為碳源,能迅速啟動微生物代謝,縮短延滯期。在常規(guī)培養(yǎng)條件下,大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、乳酸菌等常見菌株在37℃、180 r/min培養(yǎng)12小時即可達(dá)到對數(shù)后期,菌濃可達(dá)10? CFU/mL以上,適合用于質(zhì)粒提取、蛋白表達(dá)、酶活測定等下游實驗。此外,PTYG培養(yǎng)基也常被用于益生菌(如雙歧桿菌、乳酸菌)的高密度發(fā)酵,若需增強(qiáng)選擇性,可添加0.05% L-半胱氨酸和0.1% Tween-80,以提高厭氧菌的生長效率。若制備固體平板,只需加入1.5%瓊脂,即可用于菌落計數(shù)、分離純化及菌株保藏。由于其成分明確、配制簡便、適用廣,PTYG培養(yǎng)基已成為微生物實驗室中不可或缺的“基礎(chǔ)口糧”,在基礎(chǔ)研究、工業(yè)發(fā)酵、食品微生物檢測及教學(xué)實驗中均發(fā)揮著重要作用。小小耐熱芽孢芽孢桿菌,用極端環(huán)境下的生存智慧,為人類工業(yè)、農(nóng)業(yè)和環(huán)保打開一扇“高溫之門”。鼎湖山土壤桿狀菌
解糖腸球菌(Enterococcus saccharolyticus)是一種革蘭陽性、兼性厭氧的球菌,更早從英國稻草墊料中分離,模式菌株ATCC 43076被廣用于API及VITEK®系統(tǒng)的質(zhì)量控制。該菌因能發(fā)酵多種糖類產(chǎn)酸,故得名“解糖”,在分類學(xué)上與糞腸球菌、屎腸球菌并列,卻極少攜帶典型毒力基因,安全性較高。近年研究發(fā)現(xiàn),解糖腸球菌具有突出的益生潛力:它可在pH 2.5的胃酸和0.3%膽鹽中保持90%存活,并分泌乳酸、乙酸等短鏈脂肪酸,迅速降低腸道pH,抑制沙門氏菌、大腸桿菌等致病菌的定植。體外試驗還顯示,該菌能黏附于Caco-2細(xì)胞單層,上調(diào)緊密連接蛋白ZO-1與Occludin的表達(dá),增強(qiáng)腸屏障功能,減輕脂多糖誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)。在動物應(yīng)用中,日糧添加10^7 CFU/g解糖腸球菌可顯著提高斷奶仔豬平均日增重8.7%,降低料重比6.3%,并減少腹瀉率一半;其代謝產(chǎn)物還能促進(jìn)雙歧桿菌、乳酸菌等有益菌增殖,使結(jié)腸丁酸濃度升高30%,改善絨毛高度與隱窩深度比。此外,該菌對萬古霉素敏感,不含vanA/vanB耐藥操縱子,降低了基因橫向轉(zhuǎn)移風(fēng)險。綜上,解糖腸球菌憑借耐酸耐膽鹽、產(chǎn)酸抑菌、增強(qiáng)屏障及促生長等多重功能,被視為替代抗生物質(zhì)的潛力菌株,未來在嬰幼兒食品、畜禽養(yǎng)殖及微生態(tài)制劑領(lǐng)域具有廣闊前景。牛腎盂炎棒桿菌溫室試驗顯示,每畝用兩百克菌粉拌基質(zhì),黃瓜枯萎率降四成,農(nóng)藥少打一半,果實仍青亮。

黏瓊脂芽孢桿菌是2007年在深海沉積物里被“撈”出的新成員,因菌落能拉出長長瓊脂糖絲,得了“黏瓊脂”的綽號。它生活在低溫、高壓、寡營養(yǎng)的海底,靠分泌特殊β-瓊脂糖酶,把堅硬的海藻碎片分解成單糖,再經(jīng)乙酰-CoA途徑合成能量,既填飽自己,也為周圍菌群打開“糧倉”,成為深海碳循環(huán)的隱形樞紐。實驗室更看重的是它的“冷酶工廠”。其瓊脂糖酶更適溫度只25℃,在4℃仍保持60%活性,比陸源同類酶省電一半;若把粗酶液直接噴到石花菜漿里,40分鐘就能讓膠體黏度降80%,濾出的寡糖可作益生元、化妝品保濕劑,甚至用于微膠囊壁材。更妙的是,菌體在貧氮環(huán)境會自發(fā)形成厚壁芽孢,可耐55℃、紫外照射兩小時,噴霧干燥存活率仍超90%,給工業(yè)化降低了冷鏈與包被成本。國內(nèi)團(tuán)隊已把黏瓊脂芽孢桿菌制成灰粉末,用于即食涼粉、果凍的低溫脫膠,使生產(chǎn)周期從12小時縮到3小時,耗水減少四成;殘渣富含寡糖,可作飼料添加劑,提高仔豬日增重5%。未來,科學(xué)家計劃把耐冷酶基因轉(zhuǎn)進(jìn)枯草芽孢桿菌,讓“冷酶”在常溫海洋里就地降解漂浮海藻,為藍(lán)碳保護(hù)再添一把微生物鑰匙。小小黏瓊脂芽孢桿菌,用一縷黏絲,把千米深海的秘密縫進(jìn)人類綠色的產(chǎn)業(yè)鏈。
煙酸芽孢桿菌(Bacillus niacini)是芽孢桿菌屬里的“維生素工匠”。20 世紀(jì) 90 年代由日本科學(xué)家在腐殖土中分離,因其能利用煙酸(維生素 B?)為碳氮源生長而得名。菌體桿狀、周生鞭毛,可形成橢圓芽孢,耐堿、耐干燥,更適 pH 8–9、溫度 30–37 ℃,在貧瘠土壤里依然繁殖迅速。首要本領(lǐng)是“分解頑固”?;蚪M編碼煙酸脫氫酶、6-羥基煙酸加氧酶等關(guān)鍵基因,可把腐殖質(zhì)中的吡啶環(huán)打開,生成甲酸、酸和 NH?,既為自身供能,也為周圍微生物提供“開胃小菜”。在堆肥試驗中,接種 10? CFU/g 使稻草腐殖化度提高 25 %,堆體溫度 48 h 升至 65 ℃,纖維素降解率增加 30 %,堆肥周期縮短 7 天。第二技能是“促生抗逆”。菌株 IAEA 能分泌 IAA 12 mg/L,并溶出有機(jī)磷 2.8 mg/L,玉米根系增 28 %,葉綠素提高 1.8 SPAD;同時產(chǎn)生環(huán)脂肽,對番茄青枯、黃瓜枯萎抑菌帶寬達(dá) 24 mm,溫室防病效果 58 %,與多菌靈相當(dāng)。工業(yè)端,煙酸芽孢桿菌是“綠色催化劑”。其煙酸酶可將煙酸一步轉(zhuǎn)化為 6-羥基煙酸,用于合成降壓藥尼群地平,底物轉(zhuǎn)化率 98 %,比化學(xué)路線減少三廢 70 %;耐熱淀粉酶在 60 ℃仍保持 85 % 活性,已用于洗滌劑,節(jié)能 20 %。③分泌蛋白酶與脂肽,抑制番茄青枯、辣椒疫霉,病指下降四成。

嗜氣芽孢桿菌(Bacillus aerophilus)是芽孢桿菌屬里的“氧氣狂熱者”,2004年隨以色列高空氣球首先被分離,可在0.8–21 % O?范圍內(nèi)旺盛生長,更適氧分壓高于普通土壤芽孢桿菌2倍,故得名“嗜氣”。其菌落呈乳白色、邊緣卷發(fā)狀,革蘭氏陽性,具周生鞭毛,能形成橢圓芽孢,耐紫外、耐干燥,貨架期長達(dá)3年,為制劑化提供質(zhì)量載體。在土壤復(fù)蘇后,嗜氣芽孢桿菌迅速啟動“三效機(jī)制”:①分泌吲哚乙酸(IAA)25 mg/L,刺激玉米、番茄根系增長30 %;②產(chǎn)蛋白酶、纖維素酶,分解作物殘體,釋放養(yǎng)分;③合成表面活性素、fengycin,對番茄青枯、辣椒疫霉抑菌帶寬達(dá)28 mm,且能誘導(dǎo)植物ISR,降低農(nóng)藥用量40 %。田間試驗顯示,每畝用200 g菌粉(10? CFU/g)拌種,小麥返青期根際磷提高32 %,千粒重增1.8 g,產(chǎn)量提升8.5 %;在大棚番茄上,滴灌菌液可使灰霉病指下降45 %,果實Vc含量提高12 %,糖酸比更協(xié)調(diào)。工業(yè)端,嗜氣芽孢桿菌是“低溫酶工廠”。其耐有機(jī)溶劑蛋白酶在15 ℃、30 %乙醇中仍保持70 %活性,可用于洗滌劑;耐堿脂肪酶更適pH 10,適用于乳制品CIP清洗,節(jié)能20 %。菌株20Q9B-2-14對馬鈴薯軟腐病菌抑制明顯,為生防制劑添新選項。解脂假交替單胞菌
耐熱芽孢芽孢桿菌可耐受55 ℃、高鹽環(huán)境,利用原油為碳源,產(chǎn)生生物表面活性劑,提高采收率5–8%。鼎湖山土壤桿狀菌
膠凍樣類芽孢桿菌(Paenibacillus mucilaginosus)是土壤里會“熬膠”的硅酸鹽細(xì)菌。菌落圓潤、表面像果凍,能把礦物中的鉀、磷、硅一股腦解離出來,被農(nóng)民親切地稱作“天然第二鉀肥廠”。一、解礦機(jī)制它分泌多糖和有機(jī)酸,在鉀長石表面形成生物膜,質(zhì)子交換+絡(luò)合雙管齊下,把難溶的礦物鉀轉(zhuǎn)化為可溶性鉀,盆栽試驗顯示,土壤鉀含量可提高25%,相當(dāng)于每畝白撿3公斤K?O。二、促生抗逆產(chǎn)IAA、 gibberellin,刺激玉米、土豆側(cè)根激增30%;生成的胞外多糖保水又固粒,使沙壤土含水率提升8%,幫助作物度過春旱。三、田間成績山東大蔥示范區(qū),畝施200g(10? CFU/g)菌粉,蔥白粗度增加0.3 cm,產(chǎn)量提高12%,化肥鉀用量降20%;寧夏葡萄溝灌后,糖酸比更協(xié)調(diào),果粉增厚,貨架期延長5天。四、工業(yè)發(fā)酵以糖蜜-玉米漿為培養(yǎng)基,28℃、200 r/min發(fā)酵36 h,芽孢數(shù)可達(dá)5×10? CFU/mL,噴霧干燥存活率>90%,與腐熟雞糞造粒,制成“生物硅鉀肥”,存放18個月活菌仍大于2億/克。五、未來方向科學(xué)家正把耐鹽堿、耐重金屬基因簇導(dǎo)入該菌,構(gòu)建“解鉀-降鹽-鈍化鎘”三合一工程菌,讓鹽堿灘、礦區(qū)復(fù)墾地也能長出高產(chǎn)莊稼。鼎湖山土壤桿狀菌