血小板裂解液主要成分為人血小板裂解液,含有較高濃度的生長(zhǎng)因子等細(xì)胞培養(yǎng)必須物質(zhì),在體外細(xì)胞培養(yǎng)中可代替胎牛血清和自體血清。人源血小板裂解液就是直接將人類來(lái)源血小板細(xì)胞經(jīng)過(guò)連續(xù)的反復(fù)凍融裂解后,進(jìn)一步提純這些血小板脫顆粒的商品。血小板裂解液(platelet lysate,PL)是自體或異體血小板富集物經(jīng)細(xì)胞裂解后的產(chǎn)物,已經(jīng)被諸多研究推薦作為胎牛血清(fetal bovine serum,F(xiàn)BS)的替代品,應(yīng)用于間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSC)的大規(guī)模擴(kuò)增培養(yǎng)。GMP等級(jí)的血小板裂解液是不含動(dòng)物源成分的。Mill Creek血小板裂解液代理商

使用胎牛血清(FBS)和MSC的離體擴(kuò)增其他動(dòng)物衍生的已氣餒由監(jiān)管機(jī)構(gòu),以減少發(fā)送朊病毒和其他動(dòng)物傳染病的危險(xiǎn),并且避免在所述異種免疫反應(yīng)主辦。然而,由于缺乏FBS制劑標(biāo)準(zhǔn)化導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)性能不一致性和FBS生產(chǎn)已經(jīng)到來(lái),因?yàn)閯?dòng)物福利問(wèn)題很初提出血小板裂解液(PL)作為動(dòng)物血清的替代物,用于由Doucet等人體外擴(kuò)增MSC。包含在PL的生物活性分子和生長(zhǎng)因子支持的MSC從骨髓(BM)導(dǎo)出的膨脹,臍帶血(UCB),和脂肪組織(AT),與FBS相比顯示出有利的結(jié)果。此外,間充質(zhì)干擴(kuò)大了與PL-富集介質(zhì)已被用于zhiliao患有jisu難治性急性移植物抗宿主病(GVHD)造血干細(xì)胞移植后患者和患有幾種骨科疾病的患者,主要是中度至重度的膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎。 人血小板裂解液和血清比有什么優(yōu)勢(shì)血小板裂解液是由富含血小板的血漿純化萃取而成,包含很多不同的細(xì)胞生長(zhǎng)因子。

本發(fā)明涉及細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域,特別涉及一種血小板裂解液的制備方法及其應(yīng)用,用于替代動(dòng)物來(lái)源的血清,為間充質(zhì)干細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn)提供的營(yíng)養(yǎng)。該制備方法包括:將血小板在20~24℃振蕩保存1~5d,采用反復(fù)凍融法和超聲法進(jìn)行處理,離心,收集上清液,去除纖維蛋白,獲得血小板裂解液.本發(fā)明提供的血小板裂解液的制備方法可明顯提高血小板裂解液中細(xì)胞因子含量,且可進(jìn)行細(xì)胞因子的定量平衡,有利于減少產(chǎn)品批間的差異,可達(dá)到穩(wěn)定的促進(jìn)人源性細(xì)胞生長(zhǎng)的作用。
在本次研究中使用美國(guó)Sexton品牌的血小板裂解液hPL替代FBS或者人AB血清的Zui終實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較:1)使用hPL作為血清替代物培養(yǎng)T細(xì)胞,轉(zhuǎn)導(dǎo)效率、T細(xì)胞擴(kuò)增率并無(wú)明顯影響。2)使用hPL作為血清替代物培養(yǎng)T細(xì)胞,有助于維持T細(xì)胞CD4/CD8比例在40/60-60/40的范圍內(nèi)。3)使用hPL作為血清替代物培養(yǎng)T細(xì)胞,獲得的TN/TCM比例相對(duì)較高,TCM也為AB血清培養(yǎng)組的3-5倍,有文獻(xiàn)記載TN/TM表型的維持與對(duì)于ZhongLiu長(zhǎng)期殺傷能力的改善有一定相關(guān)性(Jclininvest.2008:Hinrichsetal.,ProcNatlacademySciUSA2009)。此外,值得期待的是:當(dāng)T細(xì)胞在hPL中培養(yǎng)時(shí),某些轉(zhuǎn)基因表達(dá)更穩(wěn)定意味著實(shí)現(xiàn)類似功能效果所需的慢病毒數(shù)量的減少。因此美國(guó)Sexton品牌的血小板裂解液hPL替代FBS或者人AB血清是CAR-T細(xì)胞zhi liao的中T細(xì)胞體外培養(yǎng)的理想培養(yǎng)基補(bǔ)充劑選擇,目前全球有數(shù)百個(gè)使用該品牌hPL產(chǎn)品的項(xiàng)目在臨床階段,并且有相關(guān)文獻(xiàn)分享!產(chǎn)品更多信息請(qǐng)根據(jù)下方信息聯(lián)系曼博生物!血小板裂解液的血源從哪里來(lái)?

前述所說(shuō)的生長(zhǎng)因子大多存在于血小板內(nèi)部的α顆粒中,當(dāng)血小板被活化后會(huì)產(chǎn)生脫顆粒作用(即血小板的α顆粒會(huì)和細(xì)胞膜融合),進(jìn)而釋放大量活化的生長(zhǎng)因子。而人源血小板裂解物就是直接將人類來(lái)源血小板細(xì)胞經(jīng)過(guò)連續(xù)的反復(fù)凍融裂解后,進(jìn)一步提純這些血小板脫顆粒的商品;人源血小板裂解物除了擁有比富血小板血漿更高的生長(zhǎng)因子濃度,更用特殊工藝去除了細(xì)胞碎片,大幅降低了使用過(guò)程中的免疫原性。Sexton人源血小板裂解物的使用方式非常方便簡(jiǎn)單,在培養(yǎng)基中添加5%血小板裂解物,混合均勻后即可直接用來(lái)培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞,且在傳代過(guò)程中不需要預(yù)包被培養(yǎng)皿。適合應(yīng)用在多種來(lái)源的間充質(zhì)原代干細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程呦!更多關(guān)于Sexton血小板裂解液的內(nèi)容歡迎咨詢上海曼博生物!血小板裂解液不能反復(fù)凍融。gamma射線輻照血小板裂解液授權(quán)代理商
血小板裂解液里面的沉淀對(duì)細(xì)胞有影響嗎?Mill Creek血小板裂解液代理商
為了排除肝素對(duì)于細(xì)胞增長(zhǎng)的抑制作用可能與防腐劑(這里采用芐醇作為防腐劑添加到UFH或LMWH中)有關(guān)。我們對(duì)不添加防腐劑的肝素進(jìn)行了相同實(shí)驗(yàn),結(jié)果對(duì)AT-MSC和BM-MSC細(xì)胞增殖抑制趨勢(shì)相同。在隨后的傳代培養(yǎng)到3代中的累積的群體中,兩種肝素UFH和LMWH對(duì)MSC增殖的影響也變得明顯,血小板裂解液中肝素濃度較低時(shí)累積細(xì)胞群體倍增指數(shù)(cPD) 較高。CFU-F的塑料粘附生長(zhǎng)性能是MSCs培養(yǎng)的先決條件,在96孔板中通過(guò)有限稀釋的方法結(jié)合泊松統(tǒng)計(jì)進(jìn)行CFU-F試驗(yàn),顯示集落形成率CFU-F在高濃度UFH時(shí)中度降低,而在高濃度Enoxaparin(LMWH)時(shí)明顯降低。這些結(jié)果表明高濃度的LMWH減少了CFU-F的形成,這與已報(bào)道的其他研究結(jié)論一致。
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