間充質間質細胞(MSCs)體外擴增的培養(yǎng)基一般添加胎牛血清FBS,但是考慮到異種ganran及免疫反應的風險,監(jiān)管機構并不鼓勵使用。人血小板裂解液除了不存在異種免疫反應或牛病原體ganran的風險,有助于增強間充質干細胞的擴增,也相對容易地根據(jù)良好的生產規(guī)范程序生產,并已用于臨床應用,因此現(xiàn)如很多資料顯示血小板裂解液已被證明是擴增MSCs一種非常有效的FBS替代方法(參考文獻1)。 血小板裂解液由血漿組成,含有纖維蛋白原和凝血因子,對于一般細胞培養(yǎng)中涉及的含鈣培養(yǎng)基來說通常需要加入抗凝劑(常用肝素、Rivaroxaban利伐沙班、argatroban阿加曲班等)來防止凝膠形成,其中肝素很為常用。 更多關于Sexton人血小板裂解液的相關產品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!血小板裂解液進口是不是很難?FBS替代品血小板裂解液常見問題

MSCs是異質性的細胞群,其組成可能受培養(yǎng)條件的影響。血小板裂解液中肝素及其濃度高低對細胞形態(tài)和生長模式并未有明顯的影響。通過免疫熒光顯微鏡分析未發(fā)現(xiàn)波形蛋白(一種通常在中胚層起源的細胞中表達的中間絲)和α-SMA表達的差異,肝素濃度對于α-SMA(綠色)和波形蛋白(紅色)的分布并無影響。脂肪組織源性間充質干細胞(AT-MSC)和骨髓源性間充質干細胞(BM-MSC)本身免疫表型就是相似的,經(jīng)添加不同濃度肝素的血小板裂解液培養(yǎng)擴增的AT-MSC和BM-MSC的流式細胞分析結果顯示出CD29、CD73、CD90和CD105表達,而表面標記CD14、CD31、CD34和CD45的缺失,可見肝素濃度對MSC免疫表型的表達水平幾乎是沒有影響的。更多關于Sexton血小板裂解液相關產品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!T細胞培養(yǎng)血小板裂解液作用原理血小板裂解液是由富含血小板的血漿純化萃取而成,其中包含很多不同的細胞生長因子。

通過BODIPY染色的脂肪滴來反映的成脂分化情況,發(fā)現(xiàn)兩種肝素UFH和LMWH在高濃度時,分化成脂細胞的百分比明顯降低。同樣的,通過茜素紅染色的磷酸鈣沉淀分析成骨分化情況,高濃度肝素也降低了成骨分化的百分比,特別是在脂肪組織來源的MSCs中,UFH肝素高濃度對成脂和成骨分化誘導的負面影響較為明顯。基于上述結果,我們現(xiàn)在知道血小板裂解液中添加的抗凝劑肝素在體外MSCs擴增的必要性,在購買血小板裂解液后,用戶應結合自己的實驗條件去合理的選擇合適的肝素濃度,而肝素濃度的選擇應該在有效防止含血小板裂解液培養(yǎng)基凝膠形成的基礎上盡量降低,以減少肝素對于MSCs的增殖能力、成纖維細胞體外集落形成單位(CFU-F)、MSCs體外分化等的影響。更多關于Sexton血小板裂解液相關產品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!
Sexton的血小板裂解液系列產品使用干冰運輸,全程確保產品處于凍存狀態(tài)。接收后立即儲存在-20°C環(huán)境中,使用的時候必須使用37°C水浴解凍,而非4°C冰箱或室溫解凍方法,否則會產生更多碎片,影響性能。對于不立即使用的整瓶/袋解凍的血小板裂解液產品,建議將剩余體積制備成一次性使用的等分試樣。在滿足生物血清相容性和低溫要求的條件下,可以使用錐形管或較小的瓶子進行等分儲存。等分試樣的制備將減少血小板裂解液產品的冷凍/解凍循環(huán)。血小板裂解液作為血清替代物,含有多種細胞生長因子,無動物源添加,批間差小。

安全信息遵循安全數(shù)據(jù)表(SDS)中概述的操作說明。穿戴適當?shù)淖o目鏡、衣物和手套。ELAREM Prime血小板裂解液由從EMA許可的血液中心的健康捐贈者那里獲得的血小板單位制造。獻血者已根據(jù)歐盟現(xiàn)行的獻血者資格標準指南獲得資格。注意:盡管進行了所有測試,但必須對潛在傳染源采取適當?shù)陌踩A防措施。所有人類血液制品都應按照目前可接受的生物安全實踐和預防血源病毒gan ran的指南進行處理。只能用于科研用途,不可用于zhi liao或診斷用途。血小板裂解液用于無血清分離和傳代培養(yǎng)臍帶間充質干細胞的方法。FBS替代品血小板裂解液生產商
血小板裂解液的制備方法是什么?FBS替代品血小板裂解液常見問題
本研究中使用的HPL是Stemulate公司兩款人源血小板裂解液(NH和H)是在工業(yè)規(guī)模(很小批量為20L)生產的,具備高度的批間一致性。將脂肪來源的間充質干細胞在DME/F-12中添加10%Stemulate-NH或10%FBS進行傳代培養(yǎng)11代。在DME/F-12中分別添加5、7.5或10%Stemulate-NH,并與10%胎牛血清進行比較。羊膜來源間充質干細胞也在2.5或5%Stemulate中培養(yǎng),與10%胎牛血清相比。牙髓來源的骨髓間充質干細胞在DME/F-12中添加不同濃度的Stemulate-NH或Stemulate-H,并與添加10%FBS的培養(yǎng)基進行比較。在所有實驗中,每天都監(jiān)測細胞,每次傳代結束時,收獲細胞,并使用臺盼藍和一個自動細胞計數(shù)器計數(shù)然后繼續(xù)傳代。更多關于血小板裂解液的相關信息,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關注我們的公眾號:Mine-bio,查看更多技術文章!
FBS替代品血小板裂解液常見問題
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