產(chǎn)品簡介我們經(jīng)過長期的實驗研究與反復(fù)驗證,研發(fā)出一系列新型細(xì)胞凍存產(chǎn)品,能有效地提高常規(guī)細(xì)胞、原代細(xì)胞與干細(xì)胞的復(fù)蘇后存活率與活力。產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定可靠,使用方便,助力科研工作者擺脫程序繁瑣、操作復(fù)雜、容易污染的傳統(tǒng)凍存方法,專注于后續(xù)實驗研究。LiveCyteTM(LC-1601)是即用型細(xì)胞凍存液,所含化學(xué)成分明確,無動物源性成分,可一步實現(xiàn)細(xì)胞凍存并長期在-80℃冰箱保存,保護(hù)細(xì)胞免受冰晶和溶質(zhì)損傷,適用于大多數(shù)常規(guī)細(xì)胞。LiveCyteTM(LC-1602)是原代細(xì)胞及干細(xì)胞**凍存液,可進(jìn)一步提高原代細(xì)胞和干細(xì)胞凍存效率。待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后,立即加入1 ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合。上海貴陽無血清細(xì)胞凍存液

細(xì)胞凍存的注意事項:1、各種細(xì)胞對凍存速度的要求也不一樣;上皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞耐受性可能大些,骨髓干細(xì)胞-2~-3℃/分鐘合適;胚胎細(xì)胞耐受性較小,不宜太快。總之在一開始時,下降速度不能超過-10℃/分鐘。2、用什么防護(hù)劑合適和用量多大,要依細(xì)胞而定,初代培養(yǎng)細(xì)胞用DMSO較好,一般細(xì)胞可用甘油;用量以較小為好。有人認(rèn)為人皮膚上皮細(xì)胞貯存在20%-30%甘油中很好。3、原則上細(xì)胞在液氮中可貯存多年,但為妥善起見,凍存一年后,應(yīng)再復(fù)蘇培養(yǎng)一次,然后再繼續(xù)凍存。4、將凍存管放入液氮容器或從中取出時,要做好防護(hù)工作,以免凍壞。5、注意自身的安全,對于來自人源性或病毒傳染的細(xì)胞株應(yīng)特別小心。操作過程中,應(yīng)避免引起氣溶膠的產(chǎn)生,小心有毒性試劑例如DMSO,并避免尖銳物品傷人等。青島正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液供應(yīng)商無血清凍存液特性:不需回溫,完全即用型。

細(xì)胞凍存注意事項:離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細(xì)胞,這個是標(biāo)準(zhǔn)流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少,細(xì)胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇,結(jié)果無有異常。
無血清細(xì)胞凍存液相對于含血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢有:1.即用型,無需現(xiàn)配,直接將細(xì)胞懸浮于凍存液中即可。2.通用型,適用于凍存各種細(xì)胞系、原代細(xì)胞。3.無需程序降溫,可直接放置-80℃凍存,操作簡單。4.不含血清,較大減少細(xì)胞污染。5.因不含血清,批次間差異小。6.無需液氮,-80℃冰箱長期凍存。7.可培養(yǎng)板整板凍存,例如雜交瘤細(xì)胞凍存時可節(jié)省篩選過程。無血清細(xì)胞凍存液是不含血清和動物源成分,含DMSO、糖類、氨基酸等成分的一款通用型細(xì)胞凍存液??焖賰龃婧喕藘龃娌襟E,同時不需要使用梯度凍存盒。

細(xì)胞凍存,我們應(yīng)該注意哪些事項:1、凍存液比例一般是培養(yǎng)基:血清:DMSO=7:2:1或5:4:1;動物種屬的原代細(xì)胞凍存液可采用的比例是培養(yǎng)基:血清:DMSO=0:9:1,即直接用血清重懸細(xì)胞再加入DMSO,盡管如此,原代細(xì)胞的復(fù)蘇成活率還是很低。2、有文獻(xiàn)表明,細(xì)胞以l℃/min的速度冷凍存活率較髙,因為這一速度可以很好的控制細(xì)胞內(nèi)部晶體的產(chǎn)生。我們實際操作不可能將速度控制的這么精確,目前慣用的就是4℃30min、-20℃1h30min、-80℃2h后轉(zhuǎn)入液氮中??梢苑乐够驕p少冷凍冰晶對細(xì)胞的損傷作用。長沙無血清細(xì)胞凍存液
無任何外源蛋白和血清,適用于各類動物細(xì)胞株凍存。上海貴陽無血清細(xì)胞凍存液
凍存溫度:凍存溫度是指能長期保存細(xì)胞的較低溫度,在此溫度下,細(xì)胞生化反應(yīng)極其緩慢甚至停止,但經(jīng)過長期保存,在復(fù)蘇后仍能保持正常的結(jié)構(gòu)和功能。不同的細(xì)胞和生物體以及使用不同的冷凍保存方法要取得同樣的冷凍保存效果,冷凍保存溫度可以不同。但從實際和效益的觀點(diǎn)出發(fā),液氮溫度-196℃是目前較佳的冷凍保存溫度。在-196℃時,細(xì)胞的生命活動幾乎完全停止,但復(fù)蘇后細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能完好。如果冷凍過程得當(dāng),一般生物樣品在-196℃下均可保存十年以上。應(yīng)用-70℃~-80℃保存細(xì)胞,短期內(nèi)對細(xì)胞的活性無明顯影響,但隨著凍存時間延長,細(xì)胞存活率明顯降低。在冰點(diǎn)到-40℃范圍內(nèi)保存細(xì)胞的效果不佳。上海貴陽無血清細(xì)胞凍存液
細(xì)胞凍存的操作步驟:1.配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;2.取對數(shù)生長期的細(xì)胞,去除舊培養(yǎng)液,用PBS清洗。3.去除PBS,加入適量胰蛋白酶(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長的細(xì)胞消化下來;4.離心1000rpm,5min;5.去除胰蛋白酶,加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,計數(shù),調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的較終密度為5×106/ml~1×107/ml;6.將細(xì)胞分裝入凍存管中,每管1~1.5ml;7.在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱,凍存時間及操作者;8.凍存:標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min;到-...