糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個方面:PAS染色時需于暗處加蓋反應(yīng),染色時間10~20min(染色時間長短取決于試劑的質(zhì)量和環(huán)境溫度,SO濃度高,染色時間適當縮短;環(huán)境溫度高,染色時間也應(yīng)適當縮短,反之則需適當延長反應(yīng)時間)。染色過程中不能接觸伊紅,以免造成顏色誤差[4]。作糖原染色時,較好作消化對照,即取兩張連續(xù)切片,其中一張脫蠟至水后,用1%淀粉酶于37℃消化30min,水洗后與不經(jīng)消化處理的切片一起置0.5%高碘酸液氧化,如經(jīng)消化處理的切片染色陰性,不經(jīng)消化處理的切片染色陽性,即肯定為糖原[6]。偏重亞硫酸鈉(鉀)溶液配置后,不能保存,因此,必須現(xiàn)配現(xiàn)用,用過一次即應(yīng)廢棄。各種試劑必須是化學(xué)純或者分析純。器皿、染色缸必須潔凈而干燥。糖原染色應(yīng)用的范圍比較廣。北京品牌糖原染色試劑盒

糖原染色(過碘酸-雪夫反應(yīng))原理多糖中乙二醇基經(jīng)過碘酸氧化成二醛基與無色品紅結(jié)合,形成紫紅色化合物。沉積于含糖原的胞漿中。結(jié)果:胞漿中出現(xiàn)彌散狀,顆粒狀,塊狀紅色為陽性。無紅色顆粒為陰性_x005f_x005f_x005f_x000c_臨床意義1、正常血細胞的染色反應(yīng)粒系:原粒細胞糖原含量很低,隨著細胞的分化成熟,糖原含量逐增加,至成熟階段糖原含量十分豐富。淋巴細胞:糖原常凝聚成顆?;驂K狀。巨核細胞-血小板系統(tǒng):PAS反應(yīng)呈粗大的紫色顆?;驁F塊。正常紅系:陰性。對疾病診斷的意義白血病類型的鑒別:急性粒細胞白血病:原始粒細胞呈陰性或弱陽性反應(yīng),以彌散性為主;急性淋巴細胞白血病原、幼淋巴細胞多呈粗顆粒、塊狀陽性反應(yīng)湖南提供糖原染色試劑盒哪家便宜亞硫酸鈉須有濃厚氣味,器皿必須潔凈而干燥。

PAS染色試劑配制及染色方法:1.材料與方1.1實驗材料新鮮小白鼠肝臟、腎臟標本各30例,均來自我室實驗材料。1.2主要試劑1.2.1AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液,其配方:無水乙醇80mL,冰醋酸5mL、甲醛10mL。1.2.2Carnoy固定液氯仿300mL,冰醋酸100mL,95%酒精600mL。1.2.3過碘酸溶液0.5g過碘酸(HIO)溶于100mL蒸餾水或者70%酒精溶液中,或者按如下配方配制:過碘酸0.8g,95%乙醇70mL,醋酸鈉0.27g,水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4無色品紅液(Schiff氏液)在三角燒內(nèi)加入蒸餾水500mL,煮沸后,在保持微沸的情況下,加入堿性品紅2.5g,并不斷搖動約5min(勿使之沸騰),使堿性品紅徹底溶解(溶解液為深紅色)。冷卻到50℃時,過濾,加入1N鹽酸50mL,再待冷卻至25℃時加入偏重亞硫酸鈉2.5g,塞住瓶口,搖動容器以充分混合(此時顏色明顯變淡),然后避光放置或冰箱內(nèi)24h
注意事項:染色前:①切出的石蠟切片要好,不能有皺褶或者刀痕,切片不能太厚。②撈片時,較好一張玻片撈一個組織,組織較好位于玻片的中間,美觀的同時也利于脫蠟(有時二甲苯的液面低于組織片的時候,達不到脫蠟的目的)。③石蠟切片脫蠟到水時,一定要注意組織切片脫蠟務(wù)必要徹底(脫蠟時間不能太少)以使脫蠟后的組織達到真正的“干凈”。否則剩余的未脫干凈的石蠟粘附在組織表面,在染色時染色液未能充分與組織接觸,較終導(dǎo)致染色效果不佳,甚至染不上顏色。④在染色過程中較好不要在玻片上貼標簽紙,以避免脫蠟時把標簽紙也浸沒,致使標簽紙上的膠黏到玻片上,造成染色不佳。該依據(jù)切片厚薄、組織的類別等決定。

染色的原理和臨床意義:在同一張涂片上進行兩種酯酶染色的方法稱為酯酶雙染色。多數(shù)采用一種特異性酯酶加一種非特異性酯酶染色,常用的有α-醋酸萘酚酯酶與氯乙酸AS-D萘酚酯酶雙染色、α-丁酸萘酚酯酶與氯乙酸AS-D萘酚酯酶雙染色等。反應(yīng)的原理基本上同各自的染色原理,同一張涂片上的細胞要分別在兩種不同的基質(zhì)液中作用一定時間,較后復(fù)染、顯微鏡觀察。酯酶雙染色可同時觀察兩種不同的白血病細胞,因此在鑒別白血病類型方面明顯優(yōu)于單項染色。急性粒-單核細胞白血病該染色法在急性粒-單核細胞白血病的同一張涂片上可分別出現(xiàn)α-NBE染色和NAS-DCE染色陽性反應(yīng)的細胞,甚至少數(shù)病例在單個細胞內(nèi)同時出現(xiàn)以上兩種酯酶染色的雙重陽性反應(yīng),因此酯酶雙染色反應(yīng)在急性粒-單核細胞白血病的診斷上具有獨特價值。糖類從組織化學(xué)技術(shù)角度來分,可分為多糖、中性粘液物質(zhì)。湖南提供糖原染色試劑盒哪家便宜
在滴加染液時,務(wù)必使染液完全覆蓋組織,但不能溢出圈外,避免浪費試劑。北京品牌糖原染色試劑盒
糖原染色的原理與操作方法是什么:(1)原理:過碘酸將血細胞內(nèi)的糖原氧化,生成醛基。醛基與雪夫液中的無色品紅結(jié)合,形成紫色化合物,定位于細胞質(zhì)中。(2)操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分鐘,流水沖洗,晾干。滴加過碘酸溶液作用20分鐘,流水沖洗,晾干。滴加雪夫液作用60分鐘,流水沖洗,晾干。滴加甲基綠溶液復(fù)染10分鐘,流水沖洗,晾干鏡檢。細胞的組織化學(xué)方法,是研究細胞成分常用的方法之一。它是利用化學(xué)試劑與細胞內(nèi)的某些物質(zhì)進行化學(xué)反應(yīng),從而在細胞局部形成有色沉淀物,再通過顯微鏡對組織內(nèi)的生物化學(xué)成分進行定性、定位、定量研究。北京品牌糖原染色試劑盒
糖原染色試劑盒(1)急性淋巴細胞白血病、淋巴組織惡性增生性疾病、紅白血病、戈謝病的原始細胞呈強陽性反應(yīng)或陽性反應(yīng);缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙、骨髓增生異常綜合征亦可呈陽性反應(yīng);急性粒細胞白血病、急性單核細胞白血病、良性淋巴細胞增多癥、尼曼-皮克細胞呈陰性反應(yīng)或弱陽性反應(yīng)。巨幼細胞性貧血、溶血性貧血、再生障礙性貧血等,幼紅細胞為陰性反應(yīng)。偶有個別幼紅細胞呈陽性反應(yīng)。(2)幫助鑒別不典型巨核細胞和霍奇金細胞,巨核細胞呈強陽性反應(yīng);霍奇金細胞呈弱陽性或陰性反應(yīng)。(3)幫助鑒別白血病細胞和腺骨髓轉(zhuǎn)移的腺細胞,腺細胞呈陽性反應(yīng)。細胞核、染色體以及基因表達的研究。福建品質(zhì)好的糖原染色試劑盒單價糖原染色是病...