糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一,McManus在1946年較先使用高碘酸-雪夫技術(shù)顯示黏蛋白,該法常用來(lái)顯示糖原和其他多糖,該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)以及軟骨、垂體、霉菌、色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜等。過(guò)碘酸(又稱高碘酸)是一種強(qiáng)氧化劑,它能氧化糖類及有關(guān)物質(zhì)中的1,2-乙二醇基,使之變?yōu)槎┎籗chiff試劑能結(jié)合成一種品紅化合物,產(chǎn)生紫紅色。由于高碘酸還可氧化細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì),使用時(shí)應(yīng)注意選擇好高碘酸濃度和氧化時(shí)間,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過(guò)氧化,這是很關(guān)鍵的步驟。PAS技術(shù)是很少可檢測(cè)不同種類的黏液物質(zhì)(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技術(shù)卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原。若要冸確鑒別黏液物質(zhì)(如黏蛋白或糖原),需加入糖原消化步驟。大多數(shù)情冴下可用α–淀粉酶或麥芽淀粉酶來(lái)催化糖原的糖苷鍵水解,形成水溶性的雙糖-麥芽糖,在應(yīng)用PAS技術(shù)之前將糖原從組織切片上除去。人類的唾液被認(rèn)為是消化糖原的一種有效手段,但是出于安全以及缺乏標(biāo)冸唾液的考慮,不主張應(yīng)用唾液巨幼紅細(xì)胞貧血、溶血性貧血、再障的幼紅細(xì)胞PAS染色為陰性??诒玫奶窃旧噭┖袕S家現(xiàn)貨

PAS染色試劑配制及染色方法:1.材料與方1.1實(shí)驗(yàn)材料新鮮小白鼠肝臟、腎臟標(biāo)本各30例,均來(lái)自我室實(shí)驗(yàn)材料。1.2主要試劑1.2.1AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液,其配方:無(wú)水乙醇80mL,冰醋酸5mL、甲醛10mL。1.2.2Carnoy固定液氯仿300mL,冰醋酸100mL,95%酒精600mL。1.2.3過(guò)碘酸溶液0.5g過(guò)碘酸(HIO)溶于100mL蒸餾水或者70%酒精溶液中,或者按如下配方配制:過(guò)碘酸0.8g,95%乙醇70mL,醋酸鈉0.27g,水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4無(wú)色品紅液(Schiff氏液)在三角燒內(nèi)加入蒸餾水500mL,煮沸后,在保持微沸的情況下,加入堿性品紅2.5g,并不斷搖動(dòng)約5min(勿使之沸騰),使堿性品紅徹底溶解(溶解液為深紅色)。冷卻到50℃時(shí),過(guò)濾,加入1N鹽酸50mL,再待冷卻至25℃時(shí)加入偏重亞硫酸鈉2.5g,塞住瓶口,搖動(dòng)容器以充分混合(此時(shí)顏色明顯變淡),然后避光放置或冰箱內(nèi)24h山東品質(zhì)好的糖原染色試劑盒廠家直銷特殊染色是為了顯示與確定組織或細(xì)胞中的正常結(jié)構(gòu)或病理過(guò)程中出現(xiàn)的異常物質(zhì)。

注意事項(xiàng):染色前:①切出的石蠟切片要好,不能有皺褶或者刀痕,切片不能太厚。②撈片時(shí),較好一張玻片撈一個(gè)組織,組織較好位于玻片的中間,美觀的同時(shí)也利于脫蠟(有時(shí)二甲苯的液面低于組織片的時(shí)候,達(dá)不到脫蠟的目的)。③石蠟切片脫蠟到水時(shí),一定要注意組織切片脫蠟務(wù)必要徹底(脫蠟時(shí)間不能太少)以使脫蠟后的組織達(dá)到真正的“干凈”。否則剩余的未脫干凈的石蠟粘附在組織表面,在染色時(shí)染色液未能充分與組織接觸,較終導(dǎo)致染色效果不佳,甚至染不上顏色。④在染色過(guò)程中較好不要在玻片上貼標(biāo)簽紙,以避免脫蠟時(shí)把標(biāo)簽紙也浸沒(méi),致使標(biāo)簽紙上的膠黏到玻片上,造成染色不佳。
特殊染色方法選擇應(yīng)遵循:1、特異性高、傳統(tǒng)或經(jīng)典的染色方法;特異、傳統(tǒng)/經(jīng)典的一些染色法在特殊染色方法的選擇中往往作為選擇。如顯示淀粉樣物質(zhì)。剛果紅染色作為經(jīng)典的方法,比天狼星紅、甲基紫等其他方法都要實(shí)用。淀粉樣物質(zhì)(剛果紅及天狼星紅染色)。2、染色流程相對(duì)簡(jiǎn)便、染液易配制的染色方法;選擇染色流程簡(jiǎn)便的方法,無(wú)論對(duì)于量較多的整批次染色,還是較少量的染色均能夠節(jié)省時(shí)間、更為便捷。選擇染液易配制的方法,對(duì)自配染液(尤其是保存較短的染液)是較為重要的選擇,不容易造成因染液配制問(wèn)題而影響染色結(jié)果。如顯示彈性纖維。醛品紅染色法無(wú)論是從染色流程,還是染液配制都要比鐵蘇木精、間苯二酚堿性品紅等染色方法要簡(jiǎn)單方便、省時(shí),同時(shí)陽(yáng)性著染對(duì)比度也很明顯。急性單核細(xì)胞白血病原、幼單核細(xì)胞POX染色多呈細(xì)小顆粒弱陽(yáng)性反應(yīng)。

特殊染色化學(xué)試劑的選擇:化學(xué)試劑的選擇主要針對(duì)自配試劑而言,對(duì)于商品化試劑盒則在于染液質(zhì)量。1、一般要求選用很好品牌的化學(xué)試劑,特別是一些染色中關(guān)鍵的試劑。很好的化學(xué)試劑(如Sigma、國(guó)藥、阿拉丁、西隴等)是保證高質(zhì)量染液的前提和關(guān)鍵,特別對(duì)于染液中的關(guān)鍵試劑尤為重要。如堿性品紅在一些染色液(抗酸、無(wú)色品紅、醛品紅等)中均為主要試劑,其質(zhì)量決定了較終的染色效果。如配制無(wú)色品紅染液時(shí),所使用的偏重亞硫酸鈉試劑質(zhì)量不合格,則會(huì)導(dǎo)致染液配制失敗,無(wú)法染出合格的切片。2、純度一般以分析純?yōu)橹?。素染色?00mlHE染色屬于常規(guī)切片HE染色的明礬蘇木素的一種。湖南口碑好的糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家
對(duì)臨床樣本進(jìn)行染色,以便樣本的進(jìn)一步篩查和檢測(cè)??诒玫奶窃旧噭┖袕S家現(xiàn)貨
糖原染色在使用過(guò)程中需要注意以下幾個(gè)方面:Schiff氏染液的配制是關(guān)鍵,尤其是偏重亞硫酸鈉的質(zhì)量,打開應(yīng)是粉劑,且?guī)в辛虻臍馕?,若成團(tuán)或沒(méi)有氣味,則不能用,配制時(shí)使用的容器、藥勺、稱藥天平與稱藥紙等必須潔凈、無(wú)污染。新配制好的Schiff劑為無(wú)色透明液體[1],配好后可分成小份置于-20℃保存,用時(shí)取一份恢復(fù)到室溫即可。沈洪武等通過(guò)對(duì)比染色發(fā)現(xiàn),冷凍保存1年的Schiff液的染色結(jié)果與新鮮配制的染色結(jié)果一致[5]。0.5%~1%高碘酸(pH值在3.0~5.0之間),環(huán)境溫度以不高于20℃為宜,室溫高時(shí)氧化時(shí)間適當(dāng)縮短;如果染色時(shí)環(huán)境溫度較高且高碘酸作用時(shí)間長(zhǎng),可使某些物質(zhì)成分發(fā)生非特異反應(yīng),使染色結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性。因此,室溫較高時(shí)可適當(dāng)縮短反應(yīng)時(shí)間??诒玫奶窃旧噭┖袕S家現(xiàn)貨
糖原染色:1、概況PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在組織學(xué)上,主要用來(lái)檢測(cè)組織中的糖類。過(guò)碘酸把糖類相鄰兩個(gè)碳上的羥基氧化成醛基,再用Schiff試劑和醛基反應(yīng)使呈現(xiàn)紫紅色。2、原理PAS染色又稱過(guò)碘酸雪夫染色,糖原染色。一般用來(lái)顯示糖元和其它多糖物質(zhì)。過(guò)碘酸能使細(xì)胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化成二醛,再與Schiff氏液的無(wú)色品紅結(jié)合,紅色,定位于胞漿上。3、應(yīng)用隨著醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展,糖原染色應(yīng)用的范圍更加普遍,如用以證明與鑒別細(xì)胞內(nèi)空泡狀的性質(zhì),心肌病變及其他心血管疾病的診斷,糖原累積病診斷和研究,糖尿病的診斷和研究,用于某些的診斷等特殊染色是為了顯示與確定組織或...