在定量PCR時(shí),我們常常糾結(jié)一個(gè)問(wèn)題,究竟是相對(duì)定量還是***定量呢?如今,你無(wú)需糾結(jié)了,因?yàn)閿?shù)字PCR(digitalPCR)來(lái)了。盡管這兩種技術(shù)有些類似,都是估計(jì)起始樣品中的核酸量,但它們有一個(gè)重要的區(qū)別。定量PCR是依靠標(biāo)準(zhǔn)曲線或參照基因來(lái)測(cè)定核酸量,而數(shù)字PCR則讓你能夠直接數(shù)出DNA分子的個(gè)數(shù),是對(duì)起始樣品的***定量。因此特別適用于依靠Ct值不能很好分辨的應(yīng)用領(lǐng)域:拷貝數(shù)變異、突變檢測(cè)、基因相對(duì)表達(dá)研究(如等位基因不平衡表達(dá))、二代測(cè)序結(jié)果驗(yàn)證、miRNA表達(dá)分析、單細(xì)胞基因表達(dá)分析等??:?上海)儀器科技有限公司為您提供數(shù)字PCR ,有想法的可以來(lái)電咨詢!新疆體積小數(shù)字PCR定制
我國(guó)擁有完全自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的微滴式數(shù)字PCR儀MiniDrop?研發(fā)成功并投入生產(chǎn)。這是國(guó)內(nèi)***微滴式數(shù)字PCR檢測(cè)系統(tǒng),能廣泛應(yīng)用于醫(yī)療、農(nóng)業(yè)、環(huán)境等領(lǐng)域,未來(lái),采用外周血、唾液、尿液、腦脊液等樣本進(jìn)行低成本、高靈敏、快速的無(wú)創(chuàng)檢測(cè)成為可能。MiniDrop?數(shù)字PCR儀由Creator微滴生成儀、Detector微滴檢測(cè)儀、MDMicrochip微流控芯片及MDPlotter數(shù)據(jù)分析軟件組成,該系統(tǒng)的**為微流控微滴生成技術(shù),采用原創(chuàng)性的油液,在40um微管道中利用氣壓驅(qū)動(dòng)在2分鐘內(nèi)生成50萬(wàn)微滴,單次運(yùn)行生成400萬(wàn)微滴,微滴體積達(dá)皮升級(jí),檢測(cè)線性范圍達(dá)到5個(gè)數(shù)量級(jí),各項(xiàng)指標(biāo)均超越國(guó)內(nèi)外主流產(chǎn)品。廣西經(jīng)濟(jì)數(shù)字PCR商家浚和(上海)儀器科技有限公司致力于提供數(shù)字PCR ,歡迎新老客戶來(lái)電!

研究方向低豐度及稀有序列的精確定量目前對(duì)于低豐度目標(biāo)序列的檢測(cè),定量PCR、雜交、毛細(xì)管測(cè)序及NGS等方法都因受到背景DNA的干擾,使得檢測(cè)靈敏度及精確性都達(dá)不到精細(xì)定量的要求(如定量PCR檢測(cè)中Ct值大于33的情況下,其重復(fù)性就不是很高),而微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)通過(guò)**的微滴化處理,使得稀有的核酸序列從大量的背景DNA中分離出來(lái),從而提高了檢測(cè)的靈敏度及重復(fù)性。此外,由于樣品微滴化處理的同時(shí),也將樣品中可能存在的***劑進(jìn)行了分裝,提高了數(shù)字PCR擴(kuò)增對(duì)于***劑的耐受程度,因此可具體應(yīng)用于很多臨床樣品(血液、尿液、糞便、痰液、腦脊液等)中對(duì)**核酸標(biāo)記物的檢測(cè)。一般而言,毛細(xì)管電泳和定量PCR的檢測(cè)靈敏度約在10%;NGS的靈敏度可達(dá)到1%;而ddPCR的檢測(cè)下限為0.001%。
無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前檢查鐮狀細(xì)胞貧血(sicklecellanemia)是HBB基因突變引起的常染色體顯性遺傳病,有嚴(yán)重的危害,可以導(dǎo)致高達(dá)5%的胎兒死亡率及4.62%的孕婦死亡率 。而精細(xì)有效的無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前診斷是預(yù)防鐮狀細(xì)胞貧血患兒出生的有效方法。研究人員采用dPCR技術(shù)檢測(cè)孕婦胎兒游離DNA(cff-DNA)HBB基因突變。結(jié)果顯示,dPCR技術(shù)能夠確定87%的男性胎兒(n=45)和75%的女性胎兒(n=20)HBB基因的突變狀態(tài)。當(dāng)cff-DNA濃度大于7%時(shí),可以**的檢測(cè)出HBB基因突變[3],可以說(shuō)是相當(dāng)厲害了。數(shù)字PCR 浚和(上海)儀器科技有限公司值得用戶放心。

相對(duì)于二代測(cè)序、基因芯片和定量PCR而言,數(shù)字PCR具備以下優(yōu)勢(shì):●靈敏度可達(dá)到單個(gè)核酸分子:檢測(cè)限低至0.001%,主要系為數(shù)字PCR可以實(shí)現(xiàn)靶標(biāo)DNA/RNA的生物濃縮;●無(wú)需標(biāo)準(zhǔn)曲線活參照基因進(jìn)行對(duì)比來(lái)測(cè)定核算量,可對(duì)靶分子起始量進(jìn)行***定量,直接獨(dú)處DNA分子 的個(gè)數(shù);●適合環(huán)境復(fù)雜樣品的檢測(cè):終點(diǎn)PCR檢測(cè),不依賴Ct值,不依賴擴(kuò)增效率,能克服PCR 劑的影響,避免樣品間的交叉 問(wèn)題,適合各類復(fù)雜環(huán)境中的樣本進(jìn)行 定量,如動(dòng)血樣、糞便、尿液、痰液、水樣、土壤、植物等;浚和(上海)儀器科技有限公司是一家專業(yè)提供數(shù)字PCR的公司,有想法的可以來(lái)電咨詢!上海JUE對(duì)定量數(shù)字PCR原理
數(shù)字PCR ,就選浚和(上海)儀器科技有限公司,有需求可以來(lái)電咨詢!新疆體積小數(shù)字PCR定制
目前數(shù)字PCR技術(shù)在臨床領(lǐng)域已經(jīng)有著非常***且***地應(yīng)用,例如在病原微生物檢測(cè)中的應(yīng)用:HBV檢測(cè)、HIV檢測(cè)、甲型流感病毒檢測(cè)等;在產(chǎn)前診斷中的應(yīng)用:13/18/21號(hào)染色體三倍體檢測(cè)、遺傳性耳聾檢測(cè)、地中海貧血檢測(cè)及優(yōu)生五項(xiàng)的病毒檢測(cè)等;在**靶向***相關(guān)基因檢測(cè)中的應(yīng)用:肺*EGFR基因突變、ALK基因融合檢測(cè)、結(jié)直腸*KRAS、BRAF基因突變檢測(cè)、乳腺*HER2基因 擴(kuò)增檢測(cè)、神經(jīng)膠質(zhì)瘤IDH基因突變檢測(cè)等。以**靶向***相關(guān)基因檢測(cè)為例,在**形成的超早期,會(huì)出現(xiàn)**細(xì)胞的壞死和凋亡,這些凋亡或壞死的**細(xì)胞會(huì)釋放其DNA進(jìn)入外周血,因此通過(guò)分析循環(huán)血液中是否含有**特異的游離DNA就可以達(dá)到**早期篩查的目的。然而此時(shí)DNA含量極低,對(duì)檢測(cè)的靈敏度和精確性要求極高,目前只有數(shù)字PCR技術(shù)可以檢測(cè)出來(lái)。另外進(jìn)行個(gè)體化***時(shí),需要對(duì)基因組樣本進(jìn)行分析,此時(shí)利用數(shù)字PCR技術(shù)也能**提高結(jié)果的可信性,進(jìn)而建立合理***方案。新疆體積小數(shù)字PCR定制
二代測(cè)序輔助建庫(kù)目前靶向測(cè)序建庫(kù)方法包括擴(kuò)增子方法,在均相溶液中,當(dāng)擴(kuò)增引物增加時(shí),由于擴(kuò)增引物之間的相互作用,從而影響擴(kuò)增的效率;如果將其分散到大量微液滴中擴(kuò)增,將可降低引物間相互作用,提高擴(kuò)增效率。同時(shí)還可以實(shí)現(xiàn)對(duì)于少量模板的有效擴(kuò)增,得到更多的有效測(cè)序數(shù)據(jù)。CRISPR-Cas9基因編輯結(jié)果驗(yàn)證CRISPR-Cas9技術(shù)的發(fā)明,是基因編輯技術(shù)的一大突破,但如何驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)是否成功,仍需要高靈敏度的檢測(cè)方法,數(shù)字PCR技術(shù)可以滿足這一需求。Broad研究所張鋒團(tuán)隊(duì)發(fā)明了以CRISPR為基礎(chǔ)的SHERLOCK技術(shù)可以對(duì)核酸進(jìn)行高靈敏度的定性檢測(cè),但精確定量評(píng)估時(shí)仍采取了數(shù)字PCR進(jìn)行確認(rèn)??:?...
感谢您访问我们的网站,您可能还对以下资源感兴趣:
欧美丰满爆乳无码A片-欧美肥妇BBB-免费观看做爰视频在线-公交车NP粗暴h强J-越南美女黄片十八岁的女人-zzji欧美成熟丰满