生物藥物生產(chǎn)過(guò)程中,DMEM 培養(yǎng)基扮演著關(guān)鍵角色。在單克隆抗體生產(chǎn)環(huán)節(jié),科研人員利用 DMEM 培養(yǎng)基培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞,使其大量增殖并分泌高純度的單克隆抗體。在疫苗生產(chǎn)方面,DMEM 培養(yǎng)基用于培養(yǎng)病毒抗原,如流感疫苗生產(chǎn)中,通過(guò)在 DMEM 培養(yǎng)基中培養(yǎng)流感病毒,獲取足夠的病毒抗原,進(jìn)而制備出安全有效的流感疫苗。此外,一些重組蛋白藥物的生產(chǎn)也依賴(lài) DMEM 培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞,這些細(xì)胞在培養(yǎng)基提供的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境下,高效表達(dá)出具有***價(jià)值的重組蛋白,為患者帶來(lái)希望。M199全稱(chēng)Medium 199,廣泛應(yīng)用于各種動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng),包括一些非哺乳類(lèi)動(dòng)物細(xì)胞。廣西RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基批發(fā)廠

RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基已廣泛應(yīng)用于各種正常細(xì)胞和ai細(xì)胞的培養(yǎng),包括HeLa細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞、PC12細(xì)胞、PBMC細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和ai細(xì)胞,是使用較廣的培養(yǎng)基之一。
HEPES是一種優(yōu)良的生物緩沖劑,對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性作用,添加HEPES的培養(yǎng)基能夠較長(zhǎng)時(shí)間保持恒定的PH范圍,可以有效的防止培養(yǎng)液PH波動(dòng)較大對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)產(chǎn)生不利的影響??捎糜跓o(wú)CO2培養(yǎng)箱。酚紅在培養(yǎng)基中被用來(lái)作為PH值的指示劑,用以持續(xù)監(jiān)測(cè)培養(yǎng)液的酸堿度,在低PH值時(shí)酚紅使培養(yǎng)液呈黃色,而較高的PH值時(shí)使培養(yǎng)液呈紫色,PH值~,常適合細(xì)胞培養(yǎng)。但酚紅也有一些缺點(diǎn),研究表明酚紅可以模擬固醇類(lèi)(特別是雌)的作用,因此在用到雌敏感的細(xì)胞時(shí)(如乳腺組織),比較好使用不含酚紅的培養(yǎng)基。酚紅會(huì)干擾流式細(xì)胞分析時(shí)候的檢測(cè)。此外,一些無(wú)血清培養(yǎng)基的配方中若存在酚紅會(huì)干擾鈉-鉀平衡。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱(chēng)為“雙抗”。 北京樣本細(xì)胞培養(yǎng)基檢測(cè)MEMα是一種改良的MEM培養(yǎng)基,在MEM的基礎(chǔ)上又添加了NEAA、硫酸鋅、VB12、生物素、抗壞血酸等成分。

可在血清含量低時(shí)用,適用于克隆化培養(yǎng)。F12適用于CHO細(xì)胞,也是無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基中常用的基礎(chǔ)細(xì)胞培養(yǎng)基。DMEM/F12細(xì)胞培養(yǎng)基將DMEM和F12按照1:1比例混合,混合后營(yíng)養(yǎng)成份豐富,血清使用量也減少。常作為開(kāi)發(fā)無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)的基礎(chǔ)細(xì)胞培養(yǎng)基。與天然培養(yǎng)基相比,有些天然的未知成分尚無(wú)法用已知的化學(xué)成分所替代,因此,細(xì)胞培養(yǎng)中使用合成培養(yǎng)基時(shí)必須加入一定量的天然培養(yǎng)基成分,以克服合成培養(yǎng)基的不足。普遍的做法是添加5~10%的血清,這樣才能維持細(xì)胞活力,促進(jìn)細(xì)胞增殖。針對(duì)不同的動(dòng)物細(xì)胞,現(xiàn)已開(kāi)發(fā)了多種商業(yè)化、個(gè)性化的低血清細(xì)胞培養(yǎng)基配方,營(yíng)養(yǎng)成份更加豐富,血清使用量可降低至1~3%,由此可減少了血清等動(dòng)物來(lái)源成份對(duì)生物制品安全性的影響。無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基(serumfreemedium,SFM)經(jīng)歷了天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基后,無(wú)血清培養(yǎng)基和無(wú)血清培養(yǎng)成為當(dāng)今細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域的一大趨勢(shì)。采用無(wú)血清培養(yǎng)可降低生產(chǎn)成本,簡(jiǎn)化分離純化步驟,避免病毒污染造成的危害。無(wú)血清培養(yǎng)基,一般是在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,加入成份完全明確的或部分明確的血清替代成份,達(dá)到既能滿(mǎn)足動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的要求,又能有效克服使用血清所帶來(lái)問(wèn)題的目的。
L-谷氨酰胺(Glutamine)是細(xì)胞培養(yǎng)中所必要的一種營(yíng)養(yǎng),但其在溶液中不安定,會(huì)自發(fā)降解生成氨和焦谷氨酸,其中氨對(duì)細(xì)胞危害;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中格外的安定,不會(huì)自發(fā)的降解。細(xì)胞運(yùn)用其機(jī)制是:在細(xì)胞培訓(xùn)時(shí),細(xì)胞會(huì)日益向培養(yǎng)液中獲釋一種肽酶,將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,而后細(xì)胞會(huì)將這兩種水解產(chǎn)物吸收運(yùn)用。細(xì)胞運(yùn)用L-丙氨酰-L-谷氨酰的過(guò)程與流加培養(yǎng)方針相像,連續(xù)的將低濃度水準(zhǔn)的L-谷氨酰胺加入到培養(yǎng)液中,從而提高了L-谷氨酰胺的利用率,且不會(huì)生成剩余的氨,更有利于細(xì)胞的生長(zhǎng)。L-丙氨酰-L-谷氨酰可以取而代之等摩爾的L-谷氨酰胺,適用于所有的細(xì)胞,幾乎無(wú)須適應(yīng),并且可以延長(zhǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)時(shí)間,縮減傳代次數(shù),即節(jié)約了時(shí)間也節(jié)省了錢(qián)財(cái)。與添加L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基中培訓(xùn)的細(xì)胞相比之下,活性減低得更慢。延滯期稍為延長(zhǎng)的緣故是肽酶的釋放和二肽的消化需一定的時(shí)間。NEAA(非須要氨基酸),是在MEM培養(yǎng)基的基本上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天(門(mén))冬酰胺、L-天(門(mén))冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA,能下降細(xì)胞培育時(shí)細(xì)胞自身生產(chǎn)非須要氨基酸的副作用,有效性推動(dòng)細(xì)胞增殖代謝。葡萄糖可以根據(jù)研究需。TNM-FH昆蟲(chóng)培養(yǎng)基不含蛋白質(zhì)、脂類(lèi)或任何生長(zhǎng)因子,故此產(chǎn)品需搭配血清或無(wú)血清添加物使用。

1.細(xì)胞培養(yǎng)基的種類(lèi)按照細(xì)胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史,細(xì)胞培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液、天然細(xì)胞培養(yǎng)基、合成細(xì)胞培養(yǎng)基、無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基、限定化學(xué)成分細(xì)胞培養(yǎng)基等幾大種類(lèi)。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由無(wú)機(jī)鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細(xì)胞滲透壓平衡,保持pH穩(wěn)定及提供簡(jiǎn)單的營(yíng)養(yǎng)。其主要用于細(xì)胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's與Hank's的一個(gè)主要區(qū)別是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因?yàn)镃a2+、Mg2+是細(xì)胞膜的重要組成成份,參與細(xì)胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細(xì)胞結(jié)團(tuán)。此外,Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎(chǔ)溶液,前者緩沖能力較弱,適合于密閉培養(yǎng);后者緩沖能力較強(qiáng),適合于5%CO2的培養(yǎng)條件。天然培養(yǎng)基指來(lái)自動(dòng)物體液或利用組織分離提取的一類(lèi)培養(yǎng)基,如血漿、血清、雞胚浸出液等。其優(yōu)點(diǎn)是營(yíng)養(yǎng)成分豐富,培養(yǎng)效果良好,但缺點(diǎn)是成分復(fù)雜,來(lái)源受限且制作過(guò)程復(fù)雜、批間差異大。目前使用的天然培養(yǎng)基是血清,另外各種組織提取液、促進(jìn)細(xì)胞貼壁的膠原類(lèi)物質(zhì)在培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也是必不可少。水解乳蛋白是乳白蛋白經(jīng)蛋白酶和肽酶水解的產(chǎn)物。MEM培養(yǎng)基含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素,主用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),修改后也可用于其他細(xì)胞培養(yǎng)。河北昆蟲(chóng)細(xì)胞培養(yǎng)基
靈活適配血清/無(wú)血清培養(yǎng),DMEM/F12助力定制化實(shí)驗(yàn)方案。廣西RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基批發(fā)廠
CMRL培養(yǎng)基是由康諾特醫(yī)學(xué)研究室(ConnaughtMedicalResearchLaboratories)設(shè)計(jì)出來(lái)的,初用于L細(xì)胞(Earle)的無(wú)血清培養(yǎng)。CMRL培養(yǎng)基添加馬血清或小牛血清后,特別適用于猴腎細(xì)胞的克隆培養(yǎng)以及其他哺乳動(dòng)物細(xì)胞系的培養(yǎng)。本產(chǎn)品含有多類(lèi)細(xì)胞培養(yǎng)所需的氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)鹽等多種成分,但不含蛋白質(zhì)、脂類(lèi)或任何生長(zhǎng)因子,故此產(chǎn)品需搭配血清或無(wú)血清添加物使用。注意事項(xiàng)本產(chǎn)品經(jīng)過(guò)濾除菌,使用時(shí)應(yīng)注意無(wú)菌操作,避免污染;為保持本產(chǎn)品的比較好使用效果,請(qǐng)勿進(jìn)行凍融處理;本產(chǎn)品用于科研或進(jìn)一步研究使用,不用于診斷和。廣西RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基批發(fā)廠
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