山西醫(yī)療細胞培養(yǎng)基檢測

    RPMI-1640細胞培養(yǎng)基RPMI-1640是Moore等人于1967年在美國紐約州法羅市的羅斯韋爾公園紀念研究所（RoswellParkMemorialInstitute,RPMI）開發(fā)出來的，RPMI是該研究所開發(fā)的一類細胞培養(yǎng)基，1640是培養(yǎng)基代號。RPMI-1640是改進型的McCoy‘s5A培養(yǎng)基，使用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng)，與大多數(shù)哺乳動物細胞培養(yǎng)基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培養(yǎng)基是為淋巴細胞培養(yǎng)專門設計的，現(xiàn)在已應用于各種正常細胞培養(yǎng)，包括HeLa細胞、Jurkat細胞、MCF-7細胞、PC12細胞、PBMC細胞、星形膠質細胞，是培養(yǎng)基之一。RPMIRPMI1640培養(yǎng)基相比其他培養(yǎng)基之所以具有獨特的效果，是因為其中含有還原劑谷胱甘肽和高濃度的維生素。RPMI1640培養(yǎng)基含有生物素、維生素B12以及PABA，這些成分是Eagle’sMEM和DMEM所不具備的。針對細胞培養(yǎng)應用，我們提供多種組分的RPMI1640改良培養(yǎng)基。添加HEPES的培養(yǎng)基能較長時間保持恒定的PH范圍，可有效的防止培養(yǎng)液PH波動較大對細胞生長產(chǎn)生不利的影響。山西醫(yī)療細胞培養(yǎng)基檢測

    L-谷氨酰胺（Glutamine）是細胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)素，但其在溶液中不穩(wěn)定，會自發(fā)降解生成氨和焦谷氨酸，其中氨對細胞有害；而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的穩(wěn)定，不會自發(fā)的降解。細胞利用其機制是：在細胞培養(yǎng)時，細胞會逐漸向培養(yǎng)液中釋放一種肽酶，將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺，而后細胞會將這兩種水解產(chǎn)物吸收利用。細胞利用L-丙氨酰-L-谷氨酰的過程與流加培養(yǎng)策略相似，連續(xù)的將低濃度水平的L-谷氨酰胺加入到培養(yǎng)液中，從而提高了L-谷氨酰胺的利用率，且不會生成多余的氨，更利于細胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨?？梢源娴饶柕腖-谷氨酰胺，適用于所有的細胞，幾乎無需適應，并且可以延長細胞的培養(yǎng)時間，減少傳代次數(shù)，即節(jié)省了時間也節(jié)約了金錢。與添加L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細胞相比，活性降低得更慢。延滯期略微延長的原因是肽酶的釋放和二肽的消化需要一定的時間。NEAA（非必須氨基酸），是在MEM培養(yǎng)基的基礎上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天（門）冬酰胺、L-天（門）冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA，能降低細胞培養(yǎng)時細胞自身生產(chǎn)非必須氨基酸的副作用，有效促進細胞增殖代謝。葡萄糖可以根據(jù)研究需要。黑龍江醫(yī)用細胞培養(yǎng)基DMEM 培養(yǎng)基擁有多種配方，低葡萄糖濃度（1g/L）的配方，溫柔呵護對高糖敏感的細胞。

    Dulbecco’s改良培養(yǎng)基–DMEM（Dulbecco’sModifiedEagleMedium）是在MEM培養(yǎng)基的基礎上研制的，與MEM培養(yǎng)基相比，氨基酸的含量增加了2倍，維生素的含量增加了4倍，同時還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及**酸鈉。DMEM培養(yǎng)基**初設計葡萄糖含量為1000mg/L（低糖型），后來又發(fā)展出葡萄糖含量為4500mg/L（高糖型），現(xiàn)已廣泛應用于各種細胞的培養(yǎng)。HEPES是一種優(yōu)良的生物緩沖劑，對細胞無毒性作用，添加HEPES的培養(yǎng)基能夠較長時間保持恒定的PH范圍，可以有效的防止培養(yǎng)液PH波動較大對細胞生長產(chǎn)生不利的影響?？捎糜跓oCO2培養(yǎng)箱。酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑，用以持續(xù)監(jiān)測培養(yǎng)液的酸堿度，在低PH值時酚紅使培養(yǎng)液呈黃色，而較高的PH值時使培養(yǎng)液呈紫色，PH值～，**適合細胞培養(yǎng)。但酚紅也有一些缺點，研究表明酚紅可以模擬固醇類***（特別是雌***）的作用，因此在用到雌***敏感的細胞時（如乳腺組織），比較好使用不含酚紅的培養(yǎng)基。酚紅會干擾流式細胞分析時候的檢測。此外，一些無血清培養(yǎng)基的配方中若存在酚紅會干擾鈉-鉀平衡。

    可在血清含量低時用，適用于克隆化培養(yǎng)。F12適用于CHO細胞，也是無血清細胞培養(yǎng)基中常用的基礎細胞培養(yǎng)基。DMEM/F12細胞培養(yǎng)基將DMEM和F12按照1:1比例混合，混合后營養(yǎng)成份豐富，血清使用量也減少。常作為開發(fā)無血清細胞培養(yǎng)基時的基礎細胞培養(yǎng)基。與天然培養(yǎng)基相比，有些天然的未知成分尚無法用已知的化學成分所替代，因此，細胞培養(yǎng)中使用合成培養(yǎng)基時必須加入一定量的天然培養(yǎng)基成分，以克服合成培養(yǎng)基的不足。普遍的做法是添加5~10%的血清，這樣才能維持細胞活力，促進細胞增殖。針對不同的動物細胞，現(xiàn)已開發(fā)了多種商業(yè)化、個性化的低血清細胞培養(yǎng)基配方，營養(yǎng)成份更加豐富，血清使用量可降低至1～3%，由此可減少了血清等動物來源成份對生物制品安全性的影響。無血清細胞培養(yǎng)基（serumfreemedium，SFM）經(jīng)歷了天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基后，無血清培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)成為當今細胞培養(yǎng)領域的一大趨勢。采用無血清培養(yǎng)可降低生產(chǎn)成本，簡化分離純化步驟，避免病毒污染造成的危害。無血清培養(yǎng)基，一般是在合成培養(yǎng)基的基礎上，加入成份完全明確的或部分明確的血清替代成份，達到既能滿足動物細胞培養(yǎng)的要求，又能有效克服使用血清所帶來問題的目的。Fischer’s培養(yǎng)基是Glen Fischer在美國國家ai癥研究所設計的，初用于小鼠白血病細胞的培養(yǎng)。

    Ham’sF-12營養(yǎng)混合物（Ham’sF-12NutrientMixture）Ham’sF-12營養(yǎng)混合物（Ham’sF-12NutrientMixture）是由Ham在1969年以Ham’sF-10營養(yǎng)混合物為基礎設計而成的，初用于CHO細胞的無血清培養(yǎng)。Ham’sF-12常作為無血清培養(yǎng)的基礎培養(yǎng)液，在低血清含量下時，特別適合單細胞培養(yǎng)和克隆化培養(yǎng)，添加血清后也廣泛應用于細胞和原代細胞的培養(yǎng)，如大鼠肝細胞、大鼠前列腺上皮細胞、軟骨細胞、大鼠成肌細胞、雞胚胎細胞等。此外，Ham’sF-12與DMEM等體積混合后，得到的DMEM/F12培養(yǎng)基營養(yǎng)更為豐富，使用更為較廣。Ham’sF-12營養(yǎng)混合物（Ham’sF-12NutrientMixture）L-谷氨酰胺（Glutamine）是細胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)元素，但其在溶液中不穩(wěn)定，會自發(fā)降解，不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基，可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量，在使用時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細胞的生長。 即用型DMEM/F12，確保細胞活力與實驗結果可靠性。湖北實驗細胞培養(yǎng)基源頭直供

Ham’sF-10營養(yǎng)混合物（Ham’sF-10Nutrient Mixture）是由Ham針對CHO細胞無血清培養(yǎng)設計出的一種培養(yǎng)基。山西醫(yī)療細胞培養(yǎng)基檢測

DMEM，即 Dulbecco 改良的 Eagle 培養(yǎng)基，在細胞培養(yǎng)領域占據(jù)著極為重要的地位。它源于經(jīng)典的 Eagle 培養(yǎng)基，經(jīng)科學家 Dulbecco 改良優(yōu)化后，煥發(fā)出全新活力。DMEM 培養(yǎng)基成分豐富，氨基酸濃度是原始 Eagle 培養(yǎng)基的兩倍，還涵蓋了非必需氨基酸，為細胞蛋白質合成筑牢根基。其維生素含量亦是 Eagle 培養(yǎng)基的四倍之多，積極參與細胞內(nèi)各類代謝反應，助力細胞維持正常生理功能。同時，培養(yǎng)基中包含酸，這一糖酵解途徑的關鍵物質，在細胞能量供應方面發(fā)揮著重要作用，時刻為細胞的生命活動提供動力支持。山西醫(yī)療細胞培養(yǎng)基檢測

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