Genovis將固定化酶固定在磁珠上,用于在鉸鏈下方自動消化IgG。FabRICATOR(IdeS)是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶,可消化鉸鏈下方單個氨基酸位點的抗體,產生均質的F(ab')2和Fc片段。FabRICATORMagIC磁珠含有FabRICATOR固定化酶。這些微球能夠在中級表征工作流程中并行快速自動酶解多種抗體。它們專為自動化平臺而設計,但在無法實現(xiàn)自動化的情況下,在振動臺上的表現(xiàn)同樣出色。酶切消解后,樣品可直接轉移到LC-MS的自動進樣器進行快速色譜分析,或轉移到其他分析方法進行分析。自動平行抗體酶切和亞基生成允許處理與克隆選擇、工藝開發(fā)和潛在生物制藥穩(wěn)定性研究相關的大量樣品。自動抗體亞基分析可減少操作人員的時間和樣品處理錯誤的風險,并提高通量。Genovis的FabDELLO酶在底物(包括LALA和LFLE突變的IgG1)上的有效性。安徽IgGZEROIdeS蛋白酶蛋白組學

與IdeS不同,Genovis的GlySERIAS是一種獨特的酶,可消化柔性富含甘氨酸的融合蛋白連接子,例如Gly4Ser和GlyxSery(GS)以及聚甘氨酸(G)接頭。該酶能夠分離多功能融合蛋白的各個結構域,以促進表征并增加對這些分子的理解。融合蛋白的中級分析既可以降低整體樣品的復雜性,又可以對翻譯后修飾進行結構域特異性鑒定和監(jiān)測。為了改善連接子的去除,Genovis建議使用GlySERIASImmobilized。對于連接子表征,我們推薦GlySERIAS凍干。具有柔性接頭的獨特酶消化融合蛋白;中級方法可降低融合蛋白表征的復雜性;復雜融合蛋白的可靠且可重復的消化。Genovis的GlySERIAS酶切由甘氨酸或甘氨酸和絲氨酸殘基的重復序列組成的柔性連接子。該酶在天然反應條件下具有活性,能夠對復雜的融合蛋白進行中級表征。連接子區(qū)域同時在多個位點被消化,導致先前連接的組分分離?;钚园l(fā)生在pH7.6下,孵育時間可以根據(jù)所需的產物而變化。GlySERIAS是從噬菌體K克隆而來的,在大腸桿菌中表達。該酶含有His標簽,分子量為18kDa。GlycINATORIdeS蛋白酶蛋白組學FabRICATOR 驗證試劑盒應用:簡化QC方法驗證;批次間變異性評估的理想形式;提高批量放行檢測性能的可信度。

經過多年的經驗積累及市場積淀,倍篤生物已組合多條不同產品線,分別滿足體外診斷、organoid及干細胞、細胞基因藥物等領域的需求。其中,細胞基因藥物領域產品線包含SAN HQ高鹽核酸酶及M-SAN HQ中鹽核酸酶、泊洛沙姆P 188 Bio、GMP級MSC/PSC培養(yǎng)基、GMP級膠原酶、AAV滴度檢測產品、工藝雜質及外源污染物殘留檢測產品、聚糖分析用酶、ADC偶聯(lián)技術、QED抗體對、AAV中和抗體、蛋白酶等;相關品牌有挪威ArcticZymes Technologies、德國BASF、德國Sartorius、德國Nordmark、瑞典Genovis、美國QED、中國君研生物等。
不同于IdeS,Genovis的FabDELLO 是一種蛋白酶,可在鉸鏈上方的單個位點消化人 IgG1,在兩小時內產生完整的 Fab 和 Fc 片段,無需還原條件。該酶對具有突變鉸鏈區(qū)域的抗體(如 LALA 突變)具有活性,并啟用中級 LC-MS 來表征具有突變鉸鏈的抗體的關鍵質量屬性。FabDELLO 在鉸鏈上方的單個位點消化人 IgG1 (...KSCDK / THTCPPCP...),生成完整的 Fab 和 Fc 片段。FabDELLO 是一種賴氨酸特異性蛋白酶。單個消化位點是人 IgG1 的三維結構的結果,使這種賴氨酸暴露于酶中。如果去除N-聚糖,則Fc上暴露的賴氨酸處可能會出現(xiàn)額外的消化位點。FabDELLO在天然條件下具有活性,需要鈣離子的存在。在37°C和pH 7-8.5下獲得良好活性。FabDELLO 是從 Bdellovibrio 細菌克隆而來的,并在大腸桿菌中表達。該酶含有 His 標簽,分子量為 32 kDa。中級分析已成為分析單克隆抗體療法的標準方法,并為產品質量屬性提供特定領域的信息。

對于攜帶突變鉸鏈的 Fc 融合蛋白或抗體來說,F(xiàn)ab 和 Fc 片段的生成可能具有挑戰(zhàn)性。Genovis的GingisKHAN酶在鉸鏈上方一個可觸及的賴氨酸位點消化人IgG1,在足夠溫和的還原條件下保留鏈內和鏈間二硫鍵,從而產生完整的Fab和Fc片段。對于融合蛋白,消化通常在鉸鏈上方獲得,但融合伴侶的結構和氨基酸序列可能導致其他暴露的消化位點。如果去除保守的 Fc N-聚糖,F(xiàn)c 中的第二個切割位點也可能被GingisKHAN酶切。將精選的單克隆人 IgG1 抗體和 Fc 融合蛋白與 GingisKHAN 在 37°C 下孵育 1 小時,并通過 HPLC 進行分析。Genovis亞基分析比肽圖譜具有簡單快速的巨大優(yōu)勢,更適用于高通量的檢測,并可用于支持肽圖分析。江蘇GlySERIASIdeS蛋白酶
為了分別研究度拉糖肽的肽和 Fc 區(qū)域,用GlySERIAS 在 37°C 下凍干消化1 小時。安徽IgGZEROIdeS蛋白酶蛋白組學
與IdeS不同。Genovis的IgASAPSub1是一種IgA1特異性酶,可在鉸鏈上方的一個特定位點消化人IgA1,產生完整且均質的Fab和Fc片段。IgASAPSub1可水解分泌物和血清IgA1。消化在1小時內完成,并且由于酶的特異性,如果孵育時間延長,則不存在過度消化的風險。該酶在pH值6.5至8.0下具有活性,不需要還原條件或輔助因子即可發(fā)揮活性?;钚允窃?7°C下,但也可以在室溫下使用增加孵育時間進行消化。IgASAPSub1是從口腔鏈球菌克隆而來的,并在大腸桿菌中表達。該酶含有His標簽,分子量為148kDa。IgASAPSub1凍干劑以凍干粉的形式提供,裝在1000個單位的小瓶中,用于消化1mgIgA1。安徽IgGZEROIdeS蛋白酶蛋白組學
Genovis的FabDELLO在鉸鏈上方的單個位點消化人IgG1,并在兩小時內生成均質的Fab和F...
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