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      首頁 >  醫(yī)藥健康 >  湖北GingisKHANIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶 服務(wù)至上「上海倍篤生物科技供應(yīng)」

      IdeS蛋白酶基本參數(shù)
      • 品牌
      • Genovis
      • 型號
      • A0-FR8-020等
      • 貨號
      • A0-FR8-020
      • 中文描述
      • FabRICATOR
      • 規(guī)格
      • 2000U/5000U等
      • 級別
      • 研發(fā)級
      • 應(yīng)用領(lǐng)域
      • 抗體酶切、抗體去糖基化、抗體偶聯(lián)、蛋白質(zhì)組學(xué)、聚糖圖譜、親和
      IdeS蛋白酶企業(yè)商機

      Genovis將固定化酶固定在磁珠上,用于在鉸鏈下方自動消化IgG。FabRICATOR(IdeS)是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶,可消化鉸鏈下方單個氨基酸位點的抗體,產(chǎn)生均質(zhì)的F(ab')2和Fc片段。FabRICATORMagIC磁珠含有FabRICATOR固定化酶。這些微球能夠在中級表征工作流程中并行快速自動酶解多種抗體。它們專為自動化平臺而設(shè)計,但在無法實現(xiàn)自動化的情況下,在振動臺上的表現(xiàn)同樣出色。酶切消解后,樣品可直接轉(zhuǎn)移到LC-MS的自動進樣器進行快速色譜分析,或轉(zhuǎn)移到其他分析方法進行分析。自動平行抗體酶切和亞基生成允許處理與克隆選擇、工藝開發(fā)和潛在生物制藥穩(wěn)定性研究相關(guān)的大量樣品。自動抗體亞基分析可減少操作人員的時間和樣品處理錯誤的風(fēng)險,并提高通量。Genovis 酶產(chǎn)品,被世界各地的科學(xué)家使用,創(chuàng)新的產(chǎn)品形式促進了生物藥物的開發(fā)和質(zhì)量控制。湖北GingisKHANIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

      湖北GingisKHANIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶,IdeS蛋白酶

      抗體 Fc 糖基化譜是一種重要的 CQA,因為它會影響療效、和免疫原性。因此,需要從早期開發(fā)、工藝開發(fā)到質(zhì)量控制和批量放行的整個過程對Fc聚糖譜進行監(jiān)測。傳統(tǒng)的分析方法基于對游離的聚糖進行熒光標(biāo)記,然后通過HILIC-HPLC或CE進行分析,這需要多步驟的樣品制備方案,這需要大量的時間和資源。使用Genovis的FabRICATOR MagIC酶解mAb,然后使用LC-MS進行中級分析,為Fc聚糖分析提供了一種快速、直接的替代方法。如上所示,它很容易實現(xiàn)自動化,以提高通量并降低處理錯誤的風(fēng)險。湖北GingisKHANIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶可以用Genovis的GlySERIAS固定化酶(瓊脂糖珠共價偶聯(lián))消化度拉糖肽。

      湖北GingisKHANIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶,IdeS蛋白酶

      大多數(shù)zhiliao抗體攜帶人 IgG1 骨架,雙特異性或多特異性形式的開發(fā)正在迅速增加。此類抗體的分析需要特異性酶來表征特性,例如單價結(jié)合、二硫鍵擾亂和配對 Fc 糖基化。傳統(tǒng)方案包括使用木瓜蛋白酶和 Lys-C 的酶消化,這需要優(yōu)化以大限度地減少過度消化并獲得足夠的產(chǎn)量。Genovis的半胱氨酸蛋白酶 FabALACTICA (IgdE) 在鉸鏈上方的一個特定位點消化人 IgG1,以產(chǎn)生完整的 Fab 和 Fc 片段。該酶在大多數(shù)人IgG1 上也具有活性,其中鉸鏈區(qū)域以下的突變已被引入。為了證明FabALACTICA的性能,我們消化了不同的人IgG1抗體,并使用RP-HPLC分析了所得片段。用FabALACTICA消化后觀察到的定義峰顯示了不同人IgG1抗體的均質(zhì)片段生成和強大的酶性能。FabALACTICA 酶也可用于生成完整的 Fc 片段。

      與IdeS不同。Genovis的IgASAPSub1是一種IgA1特異性酶,可在鉸鏈上方的一個特定位點消化人IgA1,產(chǎn)生完整且均質(zhì)的Fab和Fc片段。IgASAPSub1可水解分泌物和血清IgA1。消化在1小時內(nèi)完成,并且由于酶的特異性,如果孵育時間延長,則不存在過度消化的風(fēng)險。該酶在pH值6.5至8.0下具有活性,不需要還原條件或輔助因子即可發(fā)揮活性?;钚允窃?7°C下,但也可以在室溫下使用增加孵育時間進行消化。IgASAPSub1是從口腔鏈球菌克隆而來的,并在大腸桿菌中表達。該酶含有His標(biāo)簽,分子量為148kDa。IgASAPSub1凍干劑以凍干粉的形式提供,裝在1000個單位的小瓶中,用于消化1mgIgA1。FabRICATOR(IdeS)不需要還原條件來獲得比較好的活性。

      湖北GingisKHANIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶,IdeS蛋白酶

      在Genovis,我們的策略是幫助客戶進行中級(或亞基)分析,這是我們的工作,特別是我們的蛋白質(zhì)酶切產(chǎn)品。完整質(zhì)量和肽圖譜是蛋白質(zhì)表征的常用方法,我們發(fā)現(xiàn),與簡單但信息有限的完整質(zhì)量和高度復(fù)雜但信息豐富的肽圖譜相比,中級方法具有優(yōu)勢。通過執(zhí)行中級描述,您可以生成從完整的質(zhì)量實驗中獲得的所有信息,具有額外的優(yōu)勢。在對抗體進行完整質(zhì)量分析時,很難明確地識別某些修飾。質(zhì)譜儀器正在改進,可以更有效地分析更大的分子,但通過使用我們的SmartEnzymes,如IdeS,可以將抗體分解成更小的片段,這提高了這些實驗可以執(zhí)行的分辨率,因此,增加了鑒定修飾的信心。此外,你不僅能夠更好地識別修改,而且你能夠?qū)⑺鼈兌ㄎ坏降鞍踪|(zhì)上的單個結(jié)構(gòu)域,這是你在完整水平上無法做到的。高特異性也意味著相同的消化方案可以作為平臺方法應(yīng)用于許多不同的抗體。湖北GingisKHANIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

      Genovis的FabRICATOR MagIC酶解mAb,使用LC-MS進行中級分析。湖北GingisKHANIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

      大多數(shù)zhiliao性抗體都攜帶人IgG1骨架,雙特異性和多特異性形式的開發(fā)正在迅速增加。此類抗體的分析需要特異性酶來表征特性,例如單價結(jié)合、二硫鍵擾亂和配對Fc糖基化。傳統(tǒng)方案包括使用木瓜蛋白酶和Lys-C的酶消化,這需要優(yōu)化以極大限度地減少過度消化并獲得足夠的產(chǎn)量。Genovis的FabDELLO與IdeS酶具有不同的特異性,它在鉸鏈上方的單個位點消化人IgG1,并產(chǎn)生完整的Fab和Fc片段。為了證明FabDELLO的特異性活性,通過非還原SDS-PAGE消化和分析了IgG1和Fc融合蛋白的選擇。所有底物均實現(xiàn)了完全消化,包括具有其他困難的LALA和LFLE突變的IgG1。FabDELLO酶在底物上的精確和有效性能驗證了其在生物制藥開發(fā)中的用途。湖北GingisKHANIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

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