大多數(shù)zhiliao性抗體都攜帶人IgG1骨架，雙特異性和多特異性形式的開發(fā)正在迅速增加。此類抗體的分析需要特異性酶來表征特性，例如單價結合、二硫鍵擾亂和配對Fc糖基化。傳統(tǒng)方案包括使用木瓜蛋白酶和Lys-C的酶消化，這需要優(yōu)化以極大限度地減少過度消化并獲得足夠的產(chǎn)量。Genovis的FabDELLO與IdeS酶具有不同的特異性，它在鉸鏈上方的單個位點消化人IgG1，并產(chǎn)生完整的Fab和Fc片段。為了證明FabDELLO的特異性活性，通過非還原SDS-PAGE消化和分析了IgG1和Fc融合蛋白的選擇。所有底物均實現(xiàn)了完全消化，包括具有其他困難的LALA和LFLE突變的IgG1。FabDELLO酶在底物上的精確和有效性能驗證了其在生物制藥開發(fā)中的用途。Genovis已經(jīng)測試了 PBS 和 150 mM 醋酸銨，并且也適用于FabRICATOR HPLC。河南GingisREXIdeS蛋白酶蛋白組學
與IdeS不同，度拉糖肽由兩個胰高xue糖素樣肽-1 （GLP-1） 分子組成，它們通過柔性 GS 接頭連接到人 IgG4 的 Fc 區(qū)域。為了分別研究肽和 Fc 區(qū)域，從而鑒定結構域特異性 PTM，用 Genovis的GlySERIAS 在 37°C 下凍干消化度拉糖肽 1 小時。為了降低樣品復雜性，使用內切糖苷酶GlycINATOR Lyophilized去除Fc聚糖，并用DTT還原鏈間二硫鍵。反相LC-MS對樣品的分析表明，使用GlySERIAS進行連接子消化后，肽從Fc區(qū)域完全去除。連接子中的大量甘氨酸殘基為GlySERIAS提供了許多不同的潛在消化位點，這就是為什么Fc/2和GLP-1肽都被檢測為幾種變體，其中不同數(shù)量的甘氨酸和絲氨酸殘基仍然連接。此外，還鑒定了GLP-1肽的氧化。盡管GlySERIAS同時在多個位點進行消化，但一式三份的酶解在獲得的不同F(xiàn)c/2變體的相對量中顯示出可重復的結果。遼寧IgGZEROIdeS蛋白酶Genovis酶的適應于克隆篩選，工藝開發(fā)和驗證以及穩(wěn)定性研究，也適用于受控環(huán)境中的批次放行方法。
在抗體藥物及核酸藥物領域，倍篤生物產(chǎn)品線涵蓋藥物研發(fā)的全流程，主要用——RNA轉染試劑、生物活性物質純化分離用填料產(chǎn)品、ADC的payload抗體（如anti-DXD、anti-Eribulin、anti-MMAE等）、動物造模用陽性及陰性抗體、泊洛沙姆P 188 Bio、工藝雜質及外源污染物殘留檢測產(chǎn)品、抗體結構域分析蛋白酶、蛋白聚糖分析水解酶等，品牌有瑞典Genovis、德國BASF、美國QED、中國君研生物、中國金傳生物、中國毫厘科技、中國再帆生物等。這些國產(chǎn)品牌都具有國內自研、自產(chǎn)能力，批次生產(chǎn)穩(wěn)定可靠、品質可控，為行業(yè)發(fā)展提供更多國產(chǎn)選擇。
與IdeS不同，Genovis的IgMBRAZOR是一種獨特的IgM特異性蛋白酶，可在重鏈中CH2結構域下方的一個特定位點消化人IgM，產(chǎn)生均質的F（ab'）2和Fc片段。該酶能夠對復雜和高分子量的人IgM進行中級分析，從而促進疫苗、zhiliao和診斷等過程中的IgM表征。獨特-可實現(xiàn)IgM的中級表征和質量控制；快速–在30分鐘內生成均勻的F（ab'）2和Fc片段；高度特異性–人IgM重鏈中的一個消化位點。IgMBRAZOR是一種獨特的IgM特異性酶，可在重鏈中CH2結構域下方的一個特定位點消化人IgM，產(chǎn)生F（ab'）2和Fc片段。消化在30分鐘內完成，并且由于酶的特異性，如果孵育時間延長，則不存在過度消化的風險。該酶在pH值為5.5至9.0時具有活性，不需要還原條件或輔助因子即可發(fā)揮活性。良好的活性是在37°C下，但也可以在室溫下使用增加孵育時間進行消化。IgMBRAZOR在大腸桿菌中表達。該酶含有His標簽，分子量為38kDa。如Thermo Scientific? KingFisher? ；在振動臺上也能同樣出色地工作。
當你應用像肽圖這樣的方法時，你可以從Genovis中級方法中獲得的信息量就沒有那么多了。一個主要的區(qū)別是你不能像在肽水平上那樣將修改定位到單個氨基酸。然而，中級分析比肽圖譜具有快速和簡單的巨大優(yōu)勢，因為需要分析的色譜峰要少得多，數(shù)據(jù)處理任務要簡單得多。此外，在中級實驗中，手工實驗步驟要少得多，F(xiàn)abALACTICA（IdeS）酶切消化方法不需要針對不同的人體IgG1進行優(yōu)化。一旦在氨基酸水平上進行了PTM表征，我們非常認為中級表征肽圖的一種補充方法，可以在更常規(guī)的基礎上應用。中級分析更適用于高通量或監(jiān)測類型的方法，并可用于支持肽圖分析。由于 GingisKHAN 的特異性消化依賴于 IgG 的天然折疊，因此在變性條件下，還可能出現(xiàn)其他消化位點。陜西IdeS蛋白酶抗體酶切
單一酶切位點和質譜的精度確保了Fc糖基化譜檢測，用于監(jiān)測批次間的一致性和其他關鍵質量屬性。河南GingisREXIdeS蛋白酶蛋白組學
Genovis將固定化酶固定在磁珠上，用于在鉸鏈下方自動消化IgG。FabRICATOR（IdeS）是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶，可消化鉸鏈下方單個氨基酸位點的抗體，產(chǎn)生均質的F（ab'）2和Fc片段。FabRICATORMagIC磁珠含有FabRICATOR固定化酶。這些微球能夠在中級表征工作流程中并行快速自動酶解多種抗體。它們專為自動化平臺而設計，但在無法實現(xiàn)自動化的情況下，在振動臺上的表現(xiàn)同樣出色。酶切消解后，樣品可直接轉移到LC-MS的自動進樣器進行快速色譜分析，或轉移到其他分析方法進行分析。自動平行抗體酶切和亞基生成允許處理與克隆選擇、工藝開發(fā)和潛在生物制藥穩(wěn)定性研究相關的大量樣品。自動抗體亞基分析可減少操作人員的時間和樣品處理錯誤的風險，并提高通量。河南GingisREXIdeS蛋白酶蛋白組學
Genovis的FabDELLO在鉸鏈上方的單個位點消化人IgG1，并在兩小時內生成均質的Fab和F...
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