重組人血清白蛋白(rHSA)在藥物載體應用中提高藥物穩(wěn)定性和靶向性的機制主要包括以下幾點:1.**延長半衰期**:通過與rHSA融合,可以延長藥物分子在體內(nèi)的循環(huán)時間。例如,阿必魯肽(Tanzeum)是GLP-1與HSA的融合蛋白,其半衰期可延長至5天,每周給藥一次即可。2.**提高穩(wěn)定性**:rHSA作為載體,可以保護藥物分子不受體內(nèi)酶解和其他降解因素的破壞,從而提高藥物的穩(wěn)定性。例如,F(xiàn)GF21與HSA融合后,其體外穩(wěn)定性提升,抗胰蛋白酶降解能力和高溫條件下的穩(wěn)定性增加。3.**改善藥代動力學**:rHSA融合蛋白能夠改善藥物的藥代動力學特性,如改變藥物的分布和代謝,減少腎臟的損失,從而提高藥物在體內(nèi)的濃度和療效。4.**增強靶向性**:rHSA可以通過其天然的生物學特性,如與特定受體的結合,增強藥物對特定組織或細胞的靶向性。例如,rHSA可以通過其與FcRn受體的結合,實現(xiàn)對瘤組織的靶向性。5.**降低免疫原性**:rHSA作為一種內(nèi)源性蛋白質,具有較低的免疫原性,可以減少藥物引起的免疫反應,提高藥物的安全性和耐受性。His-Avi Tag包含了特定肽段,分子量預測為50.20 kDa,但由于糖基化,其在Tris-Bis PAGE結果上遷移至55-60 kDa。Recombinant Human OSMR Protein,hFc Tag

在基因編輯中,除了NLS-Cas9-EGFPNuclease,還有多種技術可以提高編輯的特異性,這些技術包括:1.**高保真Cas9變體**:通過工程化改造Cas9蛋白,例如使用SpCas9-HF1或eSpCas9等高保真變體,可以減少脫靶效應,提高特異性。2.**堿基編輯器(BaseEditors)**:這類編輯器可以在不產(chǎn)生DNA雙鏈斷裂的情況下直接在特定位置進行單個堿基的轉換,從而減少非目標編輯。3.**引導編輯器(PrimeEditors)**:由哈佛大學劉如謙教授團隊開發(fā)的引導編輯器可以在不依賴DNA雙鏈斷裂和同源定向修復的情況下,實現(xiàn)精細的基因組編輯。4.**CRISPRi和CRISPRa**:這兩種技術分別用于抑制或激起特定基因的表達,而不切割DNA,從而減少了脫靶風險。5.**新型CRISPR系統(tǒng)**:例如CRISPR/Cas12j和CRISPR/CasΦ,這些系統(tǒng)可能具有不同的PAM序列要求和更高的特異性。6.**AI輔助設計**:利用人工智能預測和優(yōu)化sgRNA的設計,以減少脫靶效應。7.**優(yōu)化遞送系統(tǒng)**:改進CRISPR組分的遞送方法,例如使用核糖核的蛋白(RNP)復合物,可以提高編輯效率和特異性。8.轉座子編輯系統(tǒng):利用轉座子進行基因組編輯,可以在不依賴DNA雙鏈斷裂的情況下實現(xiàn)大片段DNA序列的插入。

PreScissionProtease(PSP)在去除融合蛋白標簽時,對目的蛋白的純度和活性的影響通常是積極的,具體表現(xiàn)在以下幾個方面:1.**小化污染**:由于PSP具有高度的特異性,它在特定的肽鍵處切割,從而減少了非特異性切割可能導致的蛋白質片段,這有助于保持目的蛋白的純度。2.**減少蛋白質修飾**:PSP的特異性切割有助于避免在切割過程中對目的蛋白引入額外的修飾,如磷酸化或糖基化,這些修飾可能會影響蛋白質的活性和穩(wěn)定性。3.**保持活性**:如果融合蛋白標簽的設計和切割位點選擇得當,PSP切割后的目的蛋白通常能夠保持其原有的生物活性。切割位點通常位于標簽和目的蛋白之間,這樣切割后不會在目的蛋白上留下額外的氨基酸,從而減少了對蛋白質結構和功能的影響。4.**提高純度**:PSP切割后,可以通過親和層析等方法將標簽、PSP以及未切割的融合蛋白分離,從而獲得高純度的目的蛋白。5.**便于后續(xù)分析**:去除標簽后的目的蛋白更易于進行后續(xù)的質譜分析、晶體學研究或其他生物化學分析,因為去除了可能干擾分析的標簽部分。6.**穩(wěn)定性**:在某些情況下,融合蛋白的標簽可能有助于穩(wěn)定目的蛋白的構象,因此在去除標簽后,需要適當處理以維持目的蛋白的穩(wěn)定性。
11A型肺炎多糖鼠單抗在疫苗研發(fā)中主要扮演的角色是作為特異性的識別分子,它可以識別并結合到肺炎鏈球菌11A型的多糖抗原上。這種單抗的引入,有助于提高疫苗的免疫效果,具體體現(xiàn)在以下幾個方面:1.**免疫應答**:通過將肺炎多糖與蛋白載體(如乙肝表面蛋白)偶聯(lián),可以提高疫苗的免疫原性,使得接種疫苗的個體能夠產(chǎn)生更高水平的抗體和免疫記憶。2.**改善疫苗效力**:11A型肺炎多糖鼠單抗的制備,可以用于定量檢測33F型肺炎多糖或乙肝表面蛋白,這對于疫苗的質量控制和效力評估至關重要。3.**促進多糖蛋白結合疫苗的開發(fā)**:利用單克隆抗體技術,可以開發(fā)出新型的肺炎多糖結合蛋白載體疫苗,這種疫苗能夠激發(fā)更好的免疫反應,尤其是提高對抵抗力低下人群(如老人、化療患者及2歲以下嬰兒)的保護效果。4.**提高疫苗的特異性和親和力**:11A型肺炎多糖鼠單抗由于其高度的特異性,可以更精確地靶向肺炎鏈球菌的11A型多糖,從而提高疫苗的預防效果。5.**疫苗質量控制**:單克隆抗體可用于疫苗生產(chǎn)過程中的抗原含量測定,確保疫苗的質量和效力,這對于疫苗研發(fā)和生產(chǎn)過程中的質量控制至關重要。將合成的gRNA與Cas9 NLS蛋白混合,形成復合物。由于Cas9 NLS蛋白兩端都有NLS,有助于復合物快速進入細胞核。

PreScissionProtease(PSP)是一種由人鼻病毒14型的3C蛋白酶(humanrhinovirus(HRV)type143Cprotease)和GST組成的融合蛋白。它具有以下特點:1.**特異性識別**:PreScissionProtease能在低溫下(4°C)特異識別短肽Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln-Gly-Pro,并在Gln和Gly氨基酸殘基之間進行酶切。2.**依賴結構**:底物的識別和切割不僅依賴于融合蛋白的一級結構,還依賴于融合蛋白的二級和三級結構。3.**分離GST標簽**:它可以特異性的將pGEX-6P系列等載體表達出的帶有酶底物識別多肽序列融合蛋白的GST標簽進行分離。4.**表達宿主**:本品由大腸桿菌中重組表達,并以無菌液體形式提供。5.**物理性質**:分子量約為46kDa,物理外觀為無菌無色液體。6.**儲存緩沖液**:25mMTris-HCl(pH8.0),150mMNaCl,1mMEDTA,5mMDTT,50%(V/V)Glycerin。7.**酶切緩沖液**:10×酶切緩沖液為500mMTris-HCl(pH7.0),1.5MNaCl,10mMEDTA,10mMDTT。8.**純度**:經(jīng)SDS-PAGE及HPLC分析,純度大于95%。9.**酶活定義**:在5℃條件下反應16小時,能夠切割10μg的GST標簽的融合蛋白達90%以上所需的酶量定義為一個活性單位。牛痘DNA拓撲異構酶I是TOPO克隆技術的關鍵組分,該技術允許快速、簡便地將PCR產(chǎn)物克隆到質粒載體中。Recombinant Human Kallikrein 5/KLK5 Protein,His Tag
在基因編輯中,Pfu DNA Polymerase 可用于目的基因或編輯工具的克隆,減少克隆過程中的非目標突變。Recombinant Human OSMR Protein,hFc Tag
EndoH糖苷內(nèi)切酶H(EndoH)在實驗中通常用于分析以下類型的糖鏈:1.**高甘露糖型糖鏈**:EndoH能夠特異性地識別并切割高甘露糖型N-連接糖鏈,這些糖鏈通常存在于未成熟的糖蛋白中。2.**某些雜合型糖鏈**:EndoH也能對某些雜合型寡聚糖的殼二糖結構進行切割,去除糖蛋白中的N-連接高甘露糖。3.**N-連接糖鏈**:EndoH主要用于去除糖蛋白中的N-連接高甘露糖,這有助于研究糖鏈結構和糖基化模式。4.**抗體糖型分析**:在IgG中,F(xiàn)c區(qū)Asn297處的保守N-連接糖對其活性至關重要,EndoH可用于分析這些糖鏈。5.**糖蛋白的糖基化模式**:EndoH有助于分析糖蛋白的糖基化位點、糖基化程度以及糖鏈的具體結構。6.**糖鏈分析和結構表征**:在糖鏈分析的主要策略中,EndoH作為高效、準確、穩(wěn)定的去糖基化方法,有助于從糖蛋白上游離糖鏈,然后進行詳細的分析表征。EndoH的使用可以為研究者提供關于糖蛋白糖基化模式的重要信息,尤其是在抗體藥物研究和開發(fā)中,對于理解糖鏈如何影響藥物的活性、穩(wěn)定性和免疫原性具有重要意義。
重組人KIR2DL3蛋白(Recombinant Human KIR2DL3 Protein, His-Avi Tag)是一種重要的免疫調(diào)節(jié)受體,屬于殺傷細胞免疫球蛋白樣受體(Killer-cell Immunoglobulin-like Receptor, KIR)家族,主要表達于自然殺傷細胞(NK細胞)和部分T細胞亞群表面。KIR2DL3通過識別并結合靶細胞表面特定的HLA-C分子,傳遞抑制性信號,從而抑制NK細胞的細胞毒活性,在維持免疫耐受、抗病毒免疫及腫瘤免疫監(jiān)視中發(fā)揮關鍵作用。該重組蛋白采用真核表達系統(tǒng)(如HEK293細胞)制備,確保了其天然構象和生物活性。其N端融合了His標簽,便...