BsuDNAPolymerase(嗜熱脂肪芽孢桿菌DNA聚合酶)與其他DNA聚合酶相比,具有一些獨特的特性和優(yōu)勢:1.**鏈置換活性**:BsuDNAPolymerase保留了BacillussubtilisDNA聚合酶I的5'→3'聚合酶活性,但缺乏5'→3'核酸外切酶結構域,這使得它具有鏈置換DNA合成的能力。這種能力對于等溫擴增技術如重組酶聚合酶擴增(RPA)和環(huán)介導等溫擴增(LAMP)非常重要,因為它可以分離雙鏈DNA,允許新的DNA鏈的合成。2.**溫度穩(wěn)定性**:BsuDNAPolymerase在高溫下保持活性,這使得它適用于需要在較高溫度下進行的擴增反應,如RPA技術中的65°C反應條件。3.**無核酸外切酶活性**:BsuDNAPolymerase缺乏3'→5'和5'→3'核酸外切酶活性,這意味著它不會像某些其他聚合酶那樣在合成過程中具有校對功能。這可以減少非特異性擴增,提高擴增的特異性。4.**高靈敏度和特異性**:BsuDNAPolymerase在等溫擴增中展現(xiàn)出高靈敏度,能夠將微量核酸模板擴增到可檢測水平,同時保持高特異性。5.**簡化的操作流程**:與其他需要復雜操作和多個步驟的DNA聚合酶相比,BsuDNAPolymerase在等溫擴增技術中的應用簡化了操作流程,因為它不需要熱循環(huán)儀,這使得它適合現(xiàn)場快速檢測和診斷。

在比較BstDNA聚合酶和TaqDNA聚合酶對于復雜DNA片段擴增的適用性時,以下是一些關鍵點:1.**TaqDNA聚合酶**:-TaqDNA聚合酶因其高熱穩(wěn)定性和擴增效率而被應用于常規(guī)PCR。它擴增速度為30-60秒/kb,缺乏3'→5'核酸外切酶活性,無校正功能,易產(chǎn)生錯配堿基。-對于結構復雜的模板,如GC含量高、有二級結構等,TaqPlus可以用于擴增,能有效地擴增10kb以下的片段。-有產(chǎn)品如TitaniumTaqDNA聚合酶,它是通過基因工程改造的Taq酶,缺失了5'-3'外切酶活性,具備更強大的擴增性能,適合擴增高度復雜的DNA混合物。2.**BstDNA聚合酶**:-BstDNA聚合酶具有高適溫度,能夠適應更加苛刻的擴增條件,同時消除DNA二級結構,因而能夠準確并且均勻地擴增全基因組序列。-BstDNA聚合酶大片段能夠優(yōu)先擴增短片段的DNA,并且能夠確保擴增得到的DNA覆蓋了整個基因組,連貫并且無偏地擴增所有的遺傳位點。-翌圣生物HieffCanace®PlusHigh-FidelityDNAPolymerase基于PfuDNA聚合酶改造而成,其保真性是Taq酶的83倍,Pfu酶的9倍,擴增速度高達10秒/kb,擴增目的片段長達13kb,具有極強的擴增效率的模板適應性,非常適合復雜模板的高保真擴增。

Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL) 是一種從嗜熱脂肪芽孢桿菌(Thermophilic Geobacillus sp)DNA聚合酶I衍生的酶,缺乏5'-3'外切核酸酶活性。以下是關于Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL)的一些關鍵信息:來源和特性:Bst Plus DNA Polymerase 具有更強的5'-3' DNA聚合酶活性、鏈置換活性和dUTP耐受性,適合用于抗污染的等溫擴增反應,如LAMP和CPA等。應用:主要應用于等溫DNA擴增,包括環(huán)介導等溫擴增(LAMP)和其他等溫擴增技術。規(guī)格:活性定義:1 U指的是在65°C下30分鐘內(nèi)將10 nmol的dNTP整合到酸不溶物質(zhì)中的酶的量。溶液成分:包含10 mmol/L Tris-HCl、50 mmol/L KCl、0.1 mmol/L EDTA、1 mmol/L DTT、0.1% Triton X-100、50% 甘油,pH 7.5 @ 25℃。產(chǎn)品形式:提供的產(chǎn)品包括Hieff® Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL),貨號14402ES,以及凍干粉形式的產(chǎn)品,貨號14405ES,不含甘油。靈敏度和穩(wěn)定性:Bst Plus DNA Polymerase 具有高靈敏度,低至5copies目的基因可測,且在飛克(fg)級別的模板量下也能快速達到閾值。在37°C下,該酶可以保持相對穩(wěn)定的效應長達5天,并且在-20℃下可以穩(wěn)定保存2年。儲存條件:建議在-25℃至-15℃下儲存,以保持產(chǎn)品活性,并避免反復凍融。
在PCR實驗中,防止非特異性擴增的關鍵在于優(yōu)化實驗條件和采取一些特定的策略。以下是一些有效的方法:1.**優(yōu)化引物設計**:引物設計是PCR成功的關鍵。應確保引物序列具有高度特異性,避免與非目標序列互補。使用在線工具進行引物設計,并進行BLAST搜索以確認特異性。2.**使用熱啟動PCR**:熱啟動PCR技術可以抑制室溫下的DNA聚合酶活性,減少非特異性擴增。這種方法通過在高溫下激起酶的活性,從而在PCR體系配制階段降低引物與模板或引物與引物之間的非特異性結合。3.**調(diào)整Mg2+濃度**:Mg2+濃度對PCR擴增的特異性和產(chǎn)量有重要影響。過高的Mg2+濃度可能導致非特異性擴增,因此需要優(yōu)化Mg2+濃度以獲得比較好的結果。4.**退火溫度優(yōu)化**:退火溫度對PCR特異性至關重要。較高的退火溫度有助于減少非特異性結合,但過高的退火溫度可能會降低引物與模板的結合效率。通常,退火溫度設置比引物的Tm值低5°C左右。5.**使用降落PCR**:降落PCR(TouchdownPCR)通過在初始循環(huán)中使用較高的退火溫度,然后逐漸降低退火溫度,從而在PCR開始時減少非特異性擴增,同時在后續(xù)循環(huán)中保持特異性擴增。Cas9 NLS在Cas9蛋白的N端和C端都含有SV40 T抗原的核定位序列,這使得Cas9與gRNA形成的復合物。

BstDNAPolymerase,LargeFragment(嗜熱脂肪芽孢桿菌DNA聚合酶大片段)是一種經(jīng)過改造的酶,它來源于嗜熱脂肪芽孢桿菌(Bacillusstearothermophilus)DNA聚合酶I,通過重組技術在大腸桿菌中表達并純化獲得。這種酶具有5'→3'的DNA聚合酶活性,但不具有5'→3'的核酸外切酶活性,因此它在等溫擴增反應中非常有用,如環(huán)介導的等溫擴增(LAMP)和滾環(huán)擴增(RCA)等。以下是BstDNAPolymerase,LargeFragment的一些關鍵特點和應用:1.**等溫擴增**:BstDNAPolymerase,LargeFragment具有很強的鏈置換能力,適用于多種等溫擴增反應,這些反應通常在50-68°C之間進行,比較好反應溫度為65°C。2.**快速測序**:由于其高聚合酶活性,BstDNAPolymerase,LargeFragment可以用于快速測序,特別是對于高GC含量的DNA模板或微量(納克量級)DNA模板的測序。3.**全基因組擴增**:BstDNAPolymerase,LargeFragment也可用于全基因組擴增(WGA),這是一種在不需要熱循環(huán)儀的情況下擴增整個基因組DNA的技術。4.**高dUTP耐受性**:與BstDNAPolymerase2.0相比,BstDNAPolymerase,LargeFragment在進行等溫擴增時不具有將dUTP摻入合成的DNA鏈的能力,這使得它在某些應用中更具優(yōu)勢。泛素分子可以通過其內(nèi)部的賴氨酸殘基(如Lys48)與其他泛素分子形成多聚泛素鏈。Recombinant Human LEPR Protein,His Tag
Hifair? Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis Kit :適用于從總RNA或mRNA模板合成鏈cDNA,具有高熱穩(wěn)定性。Recombinant Human CLEC10A Protein,His Tag
BstDNAPolymerase,LargeFragment(嗜熱脂肪芽孢桿菌DNA聚合酶大片段)是一種常用于分子生物學實驗的酶,特別是在等溫DNA擴增技術中。以下是一些關于BstDNAPolymerase,LargeFragment的關鍵信息:1.**來源**:這種酶來源于嗜熱脂肪芽孢桿菌(Bacillusstearothermophilus),是一種熱穩(wěn)定的DNA聚合酶。2.**活性**:BstDNAPolymerase,LargeFragment具有5'到3'的DNA聚合酶活性,并且具有鏈置換活性,這使得它能夠用于等溫擴增反應,如環(huán)介導等溫擴增(LAMP)。3.**熱穩(wěn)定性**:由于其嗜熱特性,BstDNAPolymerase,LargeFragment能夠在較高的溫度下保持活性,通常在60-65°C。4.**應用**:-**等溫擴增**:用于LAMP和其他等溫擴增技術,這些技術不需要傳統(tǒng)的熱循環(huán)儀。-**全基因組擴增**:用于快速擴增少量DNA樣本,以進行進一步的分析。-**突變檢測**:在某些情況下,用于檢測特定基因的突變。5.**優(yōu)點**:-**高保真度**:與某些其他DNA聚合酶相比,BstDNAPolymerase,LargeFragment具有較高的保真度。-**快速擴增**:等溫擴增技術可以在短時間內(nèi)快速產(chǎn)生大量DNA。Recombinant Human CLEC10A Protein,His Tag
重組人KIR2DL3蛋白(Recombinant Human KIR2DL3 Protein, His-Avi Tag)是一種重要的免疫調(diào)節(jié)受體,屬于殺傷細胞免疫球蛋白樣受體(Killer-cell Immunoglobulin-like Receptor, KIR)家族,主要表達于自然殺傷細胞(NK細胞)和部分T細胞亞群表面。KIR2DL3通過識別并結合靶細胞表面特定的HLA-C分子,傳遞抑制性信號,從而抑制NK細胞的細胞毒活性,在維持免疫耐受、抗病毒免疫及腫瘤免疫監(jiān)視中發(fā)揮關鍵作用。該重組蛋白采用真核表達系統(tǒng)(如HEK293細胞)制備,確保了其天然構象和生物活性。其N端融合了His標簽,便...