Recombinant Mouse CD229/SLAMF3 Protein

T5核酸外切酶在基因編輯中確實(shí)有應(yīng)用，并且具有一些優(yōu)勢(shì)：1.**提高編輯效率**：根據(jù)一篇研究文章，T5核酸外切酶可以與CRISPR/Cas系統(tǒng)共表達(dá)或融合，以提高基因編輯的效率。這種共表達(dá)或融合可以增加indel（插入和缺失）頻率，盡管增加的幅度可能不大。2.**增強(qiáng)基因編輯效果**：在另一項(xiàng)研究中，通過使用螺旋-螺旋二聚體肽（coiled-coilpeptides）將T5核酸外切酶招募到Cas9或Cas12a蛋白上，可以提高基因編輯的效率，這種方法被稱為CCExo（CRISPR-Coiled-coil-Exonuclease）。這種招募方式優(yōu)于共表達(dá)和直接融合，其中強(qiáng)的親和力CC對(duì)顯示出高的突變頻率和刪除長度。3.**應(yīng)用于多種細(xì)胞類型**：CCExo系統(tǒng)在多種細(xì)胞系和原代細(xì)胞中都能有效地提高基因失活效率，并且在慢性髓性白血?。–ML）患者的原代細(xì)胞以及異種移植動(dòng)物模型中展示了其應(yīng)用潛力，這表明CCExo方法可能成為CML和其他遺傳性疾病的潛在選擇。T5核酸外切酶與CRISPR核酸酶蛋白進(jìn)行融合，并引入了核定位信號(hào)（NLS）序列以構(gòu)建表達(dá)載體，用于基因編輯。綜上所述，T5核酸外切酶在基因編輯中的應(yīng)用可以增強(qiáng)編輯效率和效果，尤其是在與CRISPR/Cas系統(tǒng)結(jié)合使用時(shí)。牛痘DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I具有解超螺旋的活性，可以解開雙鏈閉合環(huán)狀DNA的超螺旋結(jié)構(gòu)，便于后續(xù)的酶切反應(yīng)。Recombinant Mouse CD229/SLAMF3 Protein,His Tag

BstDNA聚合酶對(duì)dUTP的耐受性對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果有以下影響：1.**防止交叉污染**：BstDNA聚合酶具有較高的dUTP耐受性，這意味著它可以在反應(yīng)體系中添加dUTP/UDG酶防污染系統(tǒng)的情況下工作，有效防止LAMP產(chǎn)物的交叉污染，確保數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。2.**保持靈敏度和擴(kuò)增效率**：即使在引入dUTP/UDG酶防污染系統(tǒng)，使用dUTP替換dTTP的情況下，BstDNA聚合酶的靈敏度及擴(kuò)增效率不受影響。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示，在反應(yīng)體系中添加dUTP對(duì)BstDNA聚合酶的擴(kuò)增靈敏度和效率沒有負(fù)面影響。3.**提高實(shí)驗(yàn)的可靠性**：由于BstDNA聚合酶能夠在高濃度的dUTP存在下保持活性，這使得它在進(jìn)行等溫?cái)U(kuò)增時(shí)更加可靠，尤其是在需要防止DNA污染的實(shí)驗(yàn)中。4.**兼容dUTP/UDG系統(tǒng)**：BstDNA聚合酶對(duì)dUTP的耐受性好，高度兼容dUTP/UDG系統(tǒng)，這對(duì)于避免交叉污染和提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性至關(guān)重要。綜上所述，BstDNA聚合酶的高dUTP耐受性為等溫?cái)U(kuò)增實(shí)驗(yàn)提供了一個(gè)重要的優(yōu)勢(shì)，即在保持高靈敏度和擴(kuò)增效率的同時(shí)，能夠有效防止交叉污染，從而提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性。Recombinant Human SEMA4B Protein,His TagCpf1是一種新發(fā)現(xiàn)的類2/型V CRISPR-Cas DNA內(nèi)切酶，在不同系統(tǒng)中顯示出一系列的活性。

BsuDNAPolymerase(LargeFragment,5U/μL)是一種來源于嗜熱脂肪芽孢桿菌（Bacillussubtilis）的DNA聚合酶。這種酶保留了BsuDNAPolymeraseI的5'-3'聚合酶活性，但缺失了5'-3'核酸外切酶結(jié)構(gòu)域，因此它具有鏈置換活性，可以用于重組酶聚合酶擴(kuò)增（RPA）等恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)。以下是BsuDNAPolymerase(LargeFragment,5U/μL)的一些關(guān)鍵特性和應(yīng)用：1.**活性定義**：在37°C條件下，30分鐘內(nèi)將10nmol的dNTP摻入酸不溶性物質(zhì)所需的酶量定義為1個(gè)活性單位（U）。2.**熱失活條件**：75°C，20分鐘。3.**酶保存液成分**：25mMTris-HCl,50mMNaCl,1mMDTT,0.1mMEDTA,50%Glycerol,pH7.4@25°C。4.**儲(chǔ)存條件**：-25~-15°C保存，有效期2年。5.**注意事項(xiàng)**：-由于缺乏3'-5'核酸外切酶活性，BsuDNAPolymerase(LargeFragment)不能切除3'未配對(duì)的突出末端，因而不適用于生成平齊末端。-25°C時(shí)BsuDNAPolymerase(LargeFragment)保留50%的活性，是同溫度下Klenow片段(3'-5'exo-)的兩倍。6.**應(yīng)用**：-隨機(jī)引物法標(biāo)記。-cDNA第二條鏈的合成。-單個(gè)dA的加尾。-鏈置換的DNA合成。

磁珠法提取的DNA通常指的是通過磁珠吸附技術(shù)從樣本中純化得到的核酸，而基因組DNA（gDNA）是指一個(gè)生物體細(xì)胞核中包含的全套遺傳信息的DNA。兩者的主要區(qū)別在于：1.**來源和組成**：-磁珠法提取的DNA可以是基因組DNA，也可以是質(zhì)粒DNA、線粒體DNA等其他類型的DNA。它是一個(gè)廣的概念，指的是通過磁珠法技術(shù)提取的任何類型的DNA。-基因組DNA特指一個(gè)生物體細(xì)胞核中的DNA，包含了所有的基因信息，以及可能的非編碼區(qū)域。它通常包含了大量的堿基對(duì)，如人類基因組由大約30億個(gè)堿基對(duì)組成。2.**純度和應(yīng)用**：-磁珠法提取的DNA的純度和質(zhì)量取決于提取過程中的裂解、吸附、洗滌和洗脫步驟，以及磁珠的質(zhì)量和操作條件。高質(zhì)量的磁珠法提取的DNA可以用于多種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，如PCR、克隆、測(cè)序等。-基因組DNA的提取通常需要考慮其完整性和純度，以確保后續(xù)實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性?；蚪MDNA提取的難點(diǎn)在于血液樣本成分復(fù)雜，且白細(xì)胞體積占比低，因此提取純化難度較高。3.**提取方法**：-磁珠法提取DNA是一種高效、快速的核酸提取技術(shù)，它利用磁珠表面修飾的特定官能團(tuán)與核酸的特異性結(jié)合，通過外加磁場(chǎng)實(shí)現(xiàn)核酸與雜質(zhì)的快速分離。Uracil-DNA Glycosylase (UDG) 是一種在DNA修復(fù)過程中起作用的酶，其主要功能是識(shí)別并去除DNA中的尿嘧啶堿基。

確保Cre重組酶只作用于特定細(xì)胞，主要通過以下幾種方式實(shí)現(xiàn)：1.**組織特異性啟動(dòng)子**：-利用組織特異性啟動(dòng)子控制Cre重組酶的表達(dá)，可以確保Cre酶只在特定組織或細(xì)胞中表達(dá)。這種方法通過將Cre基因置于特定細(xì)胞類型特有的啟動(dòng)子控制之下，實(shí)現(xiàn)對(duì)Cre酶表達(dá)的精確控制。2.**誘導(dǎo)型Cre重組酶系統(tǒng)**：-通過使用Cre-ERT（雌素受體突變體與Cre重組酶的融合蛋白），可以實(shí)現(xiàn)對(duì)Cre活性的時(shí)間控制。在無他莫昔芬誘導(dǎo)時(shí)，Cre-ERT與熱激蛋白Hsp90結(jié)合，定位于細(xì)胞質(zhì)中；當(dāng)他莫昔芬給藥誘導(dǎo)時(shí)，Hsp90脫離Cre-ERT，使Cre-ERT進(jìn)入細(xì)胞核發(fā)揮基因重組的作用。這種系統(tǒng)相當(dāng)于為Cre-Lox系統(tǒng)加裝了一個(gè)由他莫昔芬控制的外源開關(guān)，使得體內(nèi)基因編輯更具時(shí)空靈活性。3.**藥物誘導(dǎo)的Cre系統(tǒng)**：-例如Tet-on系統(tǒng)，通過四環(huán)素或其衍生物多西環(huán)素的添加來激起基因表達(dá)。在三重轉(zhuǎn)基因動(dòng)物中，rtTA在特定啟動(dòng)子的控制下表達(dá)，多西環(huán)素與rtTA結(jié)合，Cre的表達(dá)，導(dǎo)致固定的報(bào)告基因重組。4.**AAV遞送Cre**：-利用包含組織特異性啟動(dòng)子的腺相關(guān)病毒（AAV）載體可以選擇性地將Cre重組酶遞送至特定細(xì)胞。

Endo H 是一種糖蛋白特異性的酶，主要作用于含有 N - 連接寡糖鏈的糖蛋白，對(duì)其他類型的生物大分子如核酸。Recombinant Human LILRA2/CD85h/ILT1 (His-Avi Tag)

通過優(yōu)化crRNA的設(shè)計(jì)，可以提高FnCas12a的特異性和靈敏度，例如在microRNA檢測(cè)中 。Recombinant Mouse CD229/SLAMF3 Protein,His Tag

核酸內(nèi)切酶VIII（EndonucleaseVIII）是一種來自大腸桿菌的DNA損傷修復(fù)酶，具有以下特點(diǎn)：1.**雙功能活性**：核酸內(nèi)切酶VIII具有N-糖基化酶(N-glycosylase)活性和AP裂解酶(AP-lyase)活性。2.**釋放受損嘧啶堿基**：N-糖基化酶活性可以釋放雙鏈DNA上受損的嘧啶堿基，如胸腺嘧啶乙二醇和尿嘧啶乙二醇，生成一個(gè)脫嘌呤(apurinic,AP)位點(diǎn)。3.**切割A(yù)P位點(diǎn)**：AP裂解酶活性可以切割A(yù)P位點(diǎn)的3'和5'端，產(chǎn)生一個(gè)具有3'和5'磷酸的堿基缺口(Gap)。4.**識(shí)別并切除受損堿基**：核酸內(nèi)切酶VIII可以識(shí)別并切除多種受損堿基，包括尿素、5,6-二羥基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羥基-5-甲內(nèi)酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羥基-5,6-二氫胸腺嘧啶和甲基羥丙二酰脲。5.**與EndonucleaseIII的區(qū)別**：雖然核酸內(nèi)切酶VIII與核酸內(nèi)切酶III相似，但核酸內(nèi)切酶VIII具有β和δ裂解酶活性，而核酸內(nèi)切酶III具有β裂解酶活性。6.**應(yīng)用領(lǐng)域**：核酸內(nèi)切酶VIII可以應(yīng)用于單細(xì)胞凝膠電泳、NGS建庫中DNA損傷修復(fù)、酶法合成DNA中釋放DNA鏈、堿洗脫，搭配尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)進(jìn)行含U片段的克隆等。