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  • 企業(yè)商機
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    技術服務企業(yè)商機

    除了CRISPR-Cas9技術,還有其他幾種基因編輯技術可以用于金黃色葡萄球菌的研究:1.單堿基編輯技術:這是一種新型的基因編輯技術,可以在不切割DNA雙鏈的情況下實現(xiàn)基因的定點突變。季泉江教授課題組與中國科學院北京基因組所韓大力研究員課題組合作,在金黃色葡萄球菌中建立了單堿基編輯技術,通過融合失活的Cas9蛋白(Cas9D10A)和胞嘧啶脫氨酶(APOBEC1),實現(xiàn)了高效單堿基編輯,有助于研究耐藥機制和開發(fā)新型手段。2.同源重組(HR)修復技術:在某些細菌中,可以通過同源重組機制對CRISPR-Cas9系統(tǒng)產(chǎn)生的雙鏈DNA斷裂進行修復,實現(xiàn)基因的精確編輯。例如,在谷氨酸棒桿菌中,利用CRISPR/Cas9技術結合同源重組修復模板,實現(xiàn)了高效的基因缺失和點突變。3.非同源末端連接(NHEJ)相關蛋白共表達:通過共表達Cas9蛋白和NHEJ相關蛋白,如連接酶LigD,可以在鏈霉菌中實現(xiàn)有效的基因組編輯,這種方法不依賴于同源重組,可以應用于那些同源重組效率較低的細菌。4.CRISPR干擾技術(CRISPRi):利用失活的Cas9蛋白(dCas9)阻斷基因的轉錄,從而抑制特定基因的表達。這種技術可以用于研究基因功能和調控基因表達,已經(jīng)在多種細菌中得到應用。Ultra-Long Master Mix 能夠兼容多種類型的模板,包括基因組DNA、質粒DNA、cDNA以及粗提的動植物組織核酸等。浙江類人源膠原蛋白技術服務

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    AdvanceFast1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)Plus是一款快速逆轉錄試劑盒,它基于Hifair®III1stStrandcDNASynthesisKit開發(fā),專為PCR擴增和RT-qPCR實驗設計。以下是該試劑盒的一些特點:1.**快速逆轉錄**:與Hifair®III1stStrandcDNASynthesisKit相比,該試劑盒的反轉錄總時長可以縮短至6分鐘以內,減少實驗時間。2.**去除基因組DNA污染**:包含gDNADigesterMix,能夠有效去除RNA模板中殘留的基因組DNA污染,確保后續(xù)實驗結果的可靠性。3.**提供多種引物**:試劑盒提供RandomPrimersN6和Oligo(dT)18兩種cDNA合成引物,用戶可以根據(jù)需要選擇使用,以滿足不同的實驗需求。合成的單鏈cDNA產(chǎn)物可以直接用于后續(xù)的PCR或qPCR反應。4.**高效率和高產(chǎn)量**:該試劑盒能夠提供穩(wěn)定的檢出率、特異性和產(chǎn)量保證。5.**適用性廣**:適用于從各種組織中提取的總RNA或mRNA為模板合成cDNA鏈,也適合于實時熒光定量RT-qPCR、3’-和5’-RACE等實驗。6.**操作簡便**:試劑盒為即用型預混液,包含除RNA模板以外的所有組分,極大地方便了實驗人員使用。酶定向進化技術服務研發(fā)畢赤酵母在生物技術領域的應用包括生產(chǎn)疫苗抗原、蛋白、工業(yè)酶和其他生物活性分子 。

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    dNTPs(去氧核苷酸三磷酸)在細胞分裂中扮演著至關重要的角色,尤其是在DNA復制過程中。細胞分裂包括有絲分裂和減數(shù)分裂,其中DNA復制主要發(fā)生在細胞周期的S階段(合成階段)。以下是dNTPs在細胞分裂中的主要作用:1.**DNA復制**:在細胞分裂前的S階段,細胞的DNA需要被復制,以確保每個新產(chǎn)生的細胞都能獲得一套完整的遺傳信息。dNTPs是DNA聚合酶用來合成新DNA鏈的原料。每個dNTP分子由一個去氧核糖、一個磷酸基團和一個堿基(腺嘌呤、胞嘧啶、鳥嘌呤或胸腺嘧啶)組成。DNA聚合酶通過添加互補的dNTPs到生長的DNA鏈上,從而合成新的DNA分子。2.**確保復制準確性**:dNTPs的濃度和純度對DNA復制的準確性至關重要。DNA聚合酶具有校對功能,能夠識別并糾正錯誤配對的dNTPs,從而確保復制過程的高保真性。3.**DNA修復**:在細胞分裂過程中,DNA可能會受到損傷。dNTPs也參與DNA修復過程,幫助細胞修復受損的DNA堿基,維持基因組的穩(wěn)定性。4.**細胞周期調控**:dNTPs的水平可以影響細胞周期的進程。例如,dNTPs的缺乏可以觸發(fā)細胞周期的檢查點,暫停細胞周期的進程,直到dNTPs的水平恢復到足夠進行DNA復制。

    Tris-硼酸電泳緩沖液(10×TBE):高效、穩(wěn)定的DNA電泳緩沖液在分子生物學實驗中,瓊脂糖凝膠電泳是分析DN片段大小和純度的重要技術之一。Tris-硼酸電泳緩沖液(10×TBE)作為一種高效、穩(wěn)定的緩沖液,因其廣的適用性和經(jīng)濟性,成為實驗室中不可或缺的工具。產(chǎn)品特點與優(yōu)勢Tris-硼酸電泳緩沖液(10×TBE)的主要成分包括Tris(三羥甲基氨基甲烷)、硼酸和EDTA(乙二胺四乙酸)。這種配方能夠在電泳過程中提供穩(wěn)定的pH環(huán)境,確保DNA片段的清晰分離。高效分離:TBE緩沖液具有較高的離子強度,適合分離小分子量的DNA片段。它能夠在電泳過程中提供穩(wěn)定的電流,確保DNA條帶清晰、分辨率高。兼容性強:TBE緩沖液適用于多種類型的瓊脂糖凝膠電泳,兼容常見的核酸染料(如EB或GoldView),滿足不同實驗需求。經(jīng)濟實用:10×的高濃度設計使得該緩沖液在使用時可以根據(jù)實驗需求靈活稀釋,減少浪費,降低實驗成本。穩(wěn)定性高:液體形式的TBE緩沖液在保存和使用過程中更加穩(wěn)定,只需按照說明稀釋即可使用,無需額外配制。采用一系列純化技術,如密度梯度離心、親和層析、離子交換層析等,從畢赤酵母培養(yǎng)物中提取和純化病毒顆粒。

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    UNG酶(Uracil-N-Glycosylase)在qRT-PCR中的主要作用是防止PCR產(chǎn)物的污染,提高實驗的特異性和準確性。其工作原理如下:1.**替代dTTP**:在PCR反應中,使用dUTP替代dTTP,這樣擴增產(chǎn)物中的胸腺嘧啶(T)被尿嘧啶(U)取代,形成了含有dU的DNA鏈。2.**降解尿嘧啶**:UNG酶能夠識別并水解DNA中的尿嘧啶堿基,將其從DNA鏈中釋放出來。這一過程在PCR反應前的50℃下進行,UNG酶將反應體系中已有的含U的DNA污染物降解,消除了由于污染DNA產(chǎn)生的擴增可能性。3.**高溫滅活**:在PCR的高溫變性步驟中(通常在95℃),UNG酶被滅活,因此不會影響新合成的含U的PCR產(chǎn)物。4.**消除污染**:UNG酶可以消除高達10^8^的U-DNA產(chǎn)物,有效減少因PCR產(chǎn)物污染導致的假陽性結果,從而保證qRT-PCR結果的特異性和準確性。5.**熱啟動聚合酶的使用**:UNG酶常與熱啟動Taq聚合酶一起使用,以建立含有UNG/dUTP防污染體系的熱啟動PCR反應系統(tǒng),進一步減少非特異性擴增和污染。通過UNG酶的使用,可以有效地控制qRT-PCR反應中的污染問題,提高實驗結果的可靠性。對于重組膠原蛋?的植物表達系統(tǒng)的構建,農(nóng)桿菌是使?廣的轉染載體。典 型的?法是使?電穿孔。浙江類人源膠原蛋白技術服務

    DL100 DNA Marker作為一款經(jīng)典的分子量標準,憑借其準確的條帶分布和便捷的操作,為實驗人員提供可靠的參考。浙江類人源膠原蛋白技術服務

    甲基汞凝膠電泳緩沖液(10×):高效、穩(wěn)定的核酸電泳緩沖液甲基汞凝膠電泳緩沖液(10×)是一種為核酸電泳設計的高效緩沖液,廣應用于甲基氫氧化汞電泳實驗中。該緩沖液的主要成分包括500 mM硼酸、50 mM硼酸鈉和硫酸鈉,pH值約為8.1。產(chǎn)品特點高效分離:甲基汞凝膠電泳緩沖液(10×)在稀釋為1×工作液后,能夠提供穩(wěn)定的pH環(huán)境和離子強度,特別適合分離小片段核酸。穩(wěn)定性高:該緩沖液以10倍濃縮的形式提供,儲存和使用過程中更加穩(wěn)定,適合長期保存。兼容性強:適用于多種類型的瓊脂糖凝膠電泳,兼容常見的核酸染料(如EB或GoldView),滿足不同實驗需求。使用方法稀釋緩沖液:使用時需將10×甲基汞凝膠電泳緩沖液用蒸餾水或去離子水稀釋至1×工作液。制備凝膠:將瓊脂糖溶解于1×緩沖液中,加熱熔化后冷卻至55℃,加入甲基氫氧化汞,使其終濃度為5 mmol/L。電泳操作:將樣品加入凝膠孔中,使用1×緩沖液進行電泳。染色與觀察:電泳結束后,使用合適的核酸染料對凝膠進行染色,并在紫外透射儀下觀察結果。保存與注意事項保存條件:甲基汞凝膠電泳緩沖液(10×)應保存在室溫下,避免長時間暴露在高溫或強光下。使用期限:未開封的產(chǎn)品有效期為12個月。浙江類人源膠原蛋白技術服務

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