Recombinant Human sCD40 Ligand/TNFSF5

產(chǎn)品簡介凝血酶是由大小分別為31KD和6KD的兩條肽鏈通過二硫鍵組成的一種絲氨酸蛋白水解酶，可從動物血漿中利用已凝血酶原水解制得，可催化纖維蛋白原（fibrinogen）水解釋放A肽和B肽，由此形成纖維蛋白單體，單體進一步聚合，在血小板、紅細胞和白細胞等參與下形成血凝塊，常用于診斷學中凝血化驗、凝血因子檢測、血液或血漿的脫纖維化等；另外，由于凝血酶切割序列專一，水解效率高，因此在分子生物學、生物化學或生物工程制藥研究中也常作為工具酶用于重組融合蛋白（包含凝血酶識別位點）的特異性斷裂。本品是從牛的血漿純化制得，具有純度高、比活高、不含有其他蛋白酶活性、滅活病毒、生產(chǎn)穩(wěn)定性好等特點。該酶適切割位點：A-B-Pro-Arg-▼-X-Y（其中，A和B為疏水氨基酸，X和Y為非酸性氨基酸），常見的識別序列為：1.Leu-Val-Pro-Arg-▼-Gly-Ser。2.Gly-Arg-▼-Gly。產(chǎn)品信息規(guī)格1KU/2KURANTES是對單核細胞，記憶T細胞（CD4+/CD45RO），嗜堿性粒細胞和嗜酸性粒細胞的趨化劑。Recombinant Human sCD40 Ligand/TNFSF5

利用PCR技術(shù)擴增得到編碼土豆羧肽酶抑制劑(carboxypeptidaseinhibitorfrompotato，CPI)活性多肽基因，克隆于表達載體pGEX一4T一1的多克隆位點中，得到重組質(zhì)粒pGCPI，測序后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到受體茵EscherichiacoliBL21中。重組茵經(jīng)IPTG誘導表達，超聲波破茵后，通過谷胱甘肽sepheroseFF親和層析柱一步純化得到融合蛋白，純度大于97％。融合蛋白經(jīng)凝血酶切割并分離除去谷胱甘肽一S一轉(zhuǎn)移酶后得到純度大于98％的重組CPI，ELISA鑒定產(chǎn)物具有免疫原性，體外檢測表明其促進纖溶的生物功能與天然CPI無明顯差異。Recombinant Mouse Bcl-xLα-凝血酶（α-Thrombin）可以啟動XIII因子和血小板，或者用作血管收縮劑。

抑肽酶（Aprotinin），一種絲氨酸蛋白酶抑制劑，廣泛應用于生物技術(shù)領(lǐng)域。本研究探討了利用大腸桿菌（E. coli）表達系統(tǒng)生產(chǎn)重組抑肽酶的方法，及其在科研和工業(yè)生產(chǎn)中的優(yōu)勢。引言抑肽酶，又稱胰蛋白酶抑制劑，是一種小分子蛋白，能有效抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶等絲氨酸蛋白酶的活性。在生物制藥、細胞培養(yǎng)和分子生物學研究中，抑肽酶的使用對于防止非特異性蛋白水解至關(guān)重要。傳統(tǒng)的抑肽酶主要來源于動物，如牛肺，但存在外源病毒污染的風險。因此，利用大腸桿菌表達系統(tǒng)進行重組抑肽酶的生產(chǎn)，可以提供一種無動物源、高純度、質(zhì)量穩(wěn)定的替代品。材料與方法基因克隆與表達載體構(gòu)建：人源Ⅲ型膠原蛋白基因被克隆并構(gòu)建到適合大腸桿菌表達的質(zhì)粒載體中。大腸桿菌表達菌株的構(gòu)建：通過轉(zhuǎn)化，將構(gòu)建好的質(zhì)粒導入大腸桿菌宿主菌中，構(gòu)建表達菌株。發(fā)酵培養(yǎng)：利用發(fā)酵罐進行大腸桿菌的擴大培養(yǎng)，以提升重組抑肽酶的產(chǎn)量。蛋白純化：通過多次柱純化獲得高純度的重組抑肽酶。

分子特性：牛凝血酶的分子特性符合高比活度酶的標準，純度達到SDS-PAGE電泳無雜蛋白條帶的要求。穩(wěn)定性：牛凝血酶在室溫下運輸穩(wěn)定，在2~8℃條件下可保存3年而酶活力未有變化。應用效果：在1:2000的質(zhì)量比下，牛凝血酶能有效切割蛋白，適用于科研和工業(yè)生產(chǎn)中的重組融合蛋白特異性斷裂。討論科研應用：牛凝血酶因其高比活度和專一性，在分子生物學、生物化學和生物工程制藥研究中作為工具酶具有重要價值。臨床：作為止血藥物，牛凝血酶在外科手術(shù)中的應用超過100年，因其簡便和高效而受到青睞6。生產(chǎn)優(yōu)勢：牛凝血酶的生產(chǎn)穩(wěn)定性好，純度高，不含有其他蛋白酶活性，適合大規(guī)模生產(chǎn)和應用。eotaxin-2還具有抑制髓樣細胞增殖的能力，髓樣細胞增殖是Eotaxin不共有的生物學功能。

牛血漿作為肉制品工業(yè)的重要副產(chǎn)品，其中富含的纖維蛋白原具有經(jīng)濟和醫(yī)學價值。本文綜述了牛血漿中纖維蛋白原的提取方法、結(jié)構(gòu)特性、生物學功能以及在醫(yī)學領(lǐng)域的應用前景。引言纖維蛋白原是血漿中的關(guān)鍵凝血因子，對于止血和傷口愈合至關(guān)重要。由于其在醫(yī)學領(lǐng)域的廣泛應用，牛血漿中纖維蛋白原的提取和應用受到了科研工作者和醫(yī)學界的高度關(guān)注。纖維蛋白原的結(jié)構(gòu)特性牛纖維蛋白原由α、β、γ三對多肽鏈組成，分子量約為340 kDa。這些多肽鏈通過二硫鍵連接，形成了纖維蛋白原穩(wěn)定的三維結(jié)構(gòu)。纖維蛋白原含有約4%的碳水化合物，對其生物學功能至關(guān)重要。提取與純化技術(shù)牛血漿中纖維蛋白原的提取通常采用鹽析法和有機溶劑沉淀法。鹽析法利用硫酸銨等中性鹽進行蛋白質(zhì)的沉淀，而有機溶劑沉淀法則使用乙醇等有機溶劑。這些方法簡便、成本低廉，適合大規(guī)模生產(chǎn)。然而，為了獲得高純度的纖維蛋白原，通常需要進一步的純化步驟，如離子交換色譜。猴痘病毒（Monkeypox Virus, MPXV）屬于正痘病毒屬。一般來說，同屬病毒具有相似的生物學特性。Biotinylated Recombinant Human CD30/TNFRSF8 (His-Avi Tag)

凝血酶是由大小分別為31 KD和6 KD的兩條肽鏈通過二硫鍵組成的一種絲氨酸蛋白水解酶。Recombinant Human sCD40 Ligand/TNFSF5

糖生物學中的應用糖基化分析Endo H常用于分析蛋白質(zhì)的糖基化狀態(tài)。通過Endo H處理，可以將蛋白質(zhì)上的高甘露糖型糖鏈去除，從而簡化糖鏈結(jié)構(gòu)，便于進一步分析。蛋白質(zhì)功能研究Endo H可用于研究糖基化對蛋白質(zhì)功能的影響。通過比較Endo H處理前后蛋白質(zhì)的生物學活性，可以揭示糖基化在蛋白質(zhì)功能中的作用。藥物開發(fā)某些藥物的療效和藥代動力學特性受其糖基化狀態(tài)影響。Endo H可用于研究藥物分子的糖基化修飾，為藥物設計提供重要信息。疾病診斷異常的蛋白質(zhì)糖基化與多種疾病相關(guān)。Endo H可用于檢測疾病相關(guān)蛋白質(zhì)的糖基化改變，為疾病診斷提供新的思路。結(jié)論Endo H作為一種重要的工具酶，在糖生物學研究中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。深入理解Endo H的結(jié)構(gòu)與功能，將有助于揭示蛋白質(zhì)糖基化在生命過程中的作用，為相關(guān)疾病的診斷提供新策略。Recombinant Human sCD40 Ligand/TNFSF5