免疫組化中IHC vs ICC的區(qū)別。英瀚斯生物為您說(shuō)明。除了生物學(xué)來(lái)源,IHC和ICC在樣品處理的程度上也有所不同。ICC需要透化,要么通過(guò)固定過(guò)程,要么是單獨(dú)的透化步驟,這樣抗體才能與細(xì)胞內(nèi)的靶點(diǎn)相結(jié)合。而IHC可能不要單獨(dú)的透化步驟,這取決于切片的厚度和固定方法。包埋在石蠟中的IHC切片必須進(jìn)一步處理,才能進(jìn)行抗體染色。一旦處理好樣品,IHC和ICC的染色操作就幾乎沒(méi)什么差異了。當(dāng)然,就染色而言,根據(jù)所使用的抗體來(lái)優(yōu)化還是少不了的。英瀚斯生物,可做免疫組化定量分析。四川做得好的免疫組化實(shí)驗(yàn)

確定cancer分期,免疫組化技術(shù)應(yīng)用于臨床可以進(jìn)行處理哦,英瀚斯生物為您處理。cancer分期是判斷預(yù)后的一個(gè)指標(biāo),與是否浸潤(rùn)、有無(wú)淋巴管或血管侵襲密切相關(guān),而通過(guò)免疫組化方法可以判斷cancer是否浸潤(rùn)、有無(wú)淋巴管或血管侵襲。層黏連蛋白和Ⅳ型膠原的單克隆抗體可以清楚的顯示基膜的主要成分,用于區(qū)分原位*和浸潤(rùn)*,一旦上皮性*突破基膜為浸潤(rùn),未突破基膜為原位;顯示血管和淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的標(biāo)記物第八因子相關(guān)蛋白、D2-40等則可清楚顯示cancer對(duì)血管或淋巴管的浸潤(rùn)。因此對(duì)許多cancer的良惡性鑒別及有無(wú)血管或淋巴管浸潤(rùn),免疫組化結(jié)果作為主要的鑒別依據(jù)。云南小鼠免疫組化注意事項(xiàng)英瀚斯生物為您詳解免疫組化實(shí)驗(yàn)指南!

免疫組化實(shí)驗(yàn)所用的組織和細(xì)胞標(biāo)本是什么樣的?
實(shí)驗(yàn)所用主要為組織標(biāo)本和細(xì)胞標(biāo)本兩大類(lèi),前者包括石蠟切片(病理大片和組織芯片)和冰凍切片,后者包括組織印片、細(xì)胞爬片和細(xì)胞涂片。其中石蠟切片是制作組織標(biāo)本**常用、**基本的方法,對(duì)于組織形態(tài)保存好,且能作連續(xù)切片,有利于各種染色對(duì)照觀察;還能長(zhǎng)期存檔,供回顧性研究;石蠟切片制作過(guò)程對(duì)組織內(nèi)抗原暴露有一定的影響,但可進(jìn)行抗原修復(fù),是免疫組化中優(yōu)先的組織標(biāo)本制作方法。
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免疫組化的局限性,可能會(huì)有假陽(yáng)性。陽(yáng)性信號(hào)定位不正確即為假陽(yáng)性,包括著色不勻、背景著色、邊緣效應(yīng),另外組織的某些特定成分也能導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果。假陽(yáng)性可能的原因有:(1)一抗?jié)舛燃耙豢故欠袷?,抗體有一個(gè)合適的濃度范圍且必須在有效期內(nèi)使用,過(guò)期的抗體或者不著色,或者背景著色,形成假陽(yáng)性;(2)試劑未充分覆蓋組織,組織邊緣的試劑易干濃度較組織中間高致深染;(3)抗體孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng),由于室溫的影響夏季孵育時(shí)間稍短,冬季孵育時(shí)間稍長(zhǎng);(4)操作過(guò)程中組織變干,造成組織邊緣收縮或損壞形成偽影,產(chǎn)生假陽(yáng)性;(5)3,3'-二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色時(shí)間太長(zhǎng),DAB宜現(xiàn)配現(xiàn)用,配制時(shí)間比較好在30min以內(nèi);(6)由于胞漿里含有較多的蛋白質(zhì),因此間質(zhì)和胞漿中出現(xiàn)很多非特異性的染色,如內(nèi)源性酶血紅蛋白、肌紅蛋白等造成的著色,可以通過(guò)血清封閉解決;乳腺cancer組織中的脂肪細(xì)胞、淋巴細(xì)胞也會(huì)產(chǎn)生非特異性的染色;(7)非特異性抗體吸附常見(jiàn)于壞死組織中,使壞死組織呈較高的背景染色,在免疫組化中應(yīng)避免選擇壞死組織較多的蠟塊。免疫組化protocol,詳情請(qǐng)看英瀚斯生物官網(wǎng)。

醫(yī)療和預(yù)后有關(guān)的免疫組化。與醫(yī)療及預(yù)后有關(guān)的標(biāo)記物主要分以下為三類(lèi):(1)cancer基因標(biāo)記物:如cancer基因C-erbB2、c-myc、P53蛋白等,卵巢上皮性cancer中P53的過(guò)表達(dá)與cancer的擴(kuò)散、分化、術(shù)后殘存cancer灶呈正相關(guān);乳腺cancer中表達(dá)C-erbB2的浸潤(rùn)性cancer患者預(yù)后差;肺cancer中突變型P53基因蛋白表達(dá)增高,PTEN基因表達(dá)減弱,提示cancer預(yù)后不良。(2)細(xì)胞增殖性標(biāo)記物:cancer細(xì)胞增生是否活躍直接影響著臨床的醫(yī)療與預(yù)后,如表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)、Ki-67、PCNA、cycling等可對(duì)cancer細(xì)胞的增生做出評(píng)價(jià),表達(dá)指數(shù)越高,表明其增殖指數(shù)越活躍,惡性度增高,預(yù)后不良,其中以惡性淋巴瘤乳腺cancer較為明顯;在對(duì)乳腺cancer的研究中發(fā)現(xiàn)Ki-67、EGFR陽(yáng)性者,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率高,并與ji素受體的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。(3)類(lèi)固醇ji素受體:如雌ji素受體(ER)、孕ji素受體(PR)等,應(yīng)用更為范圍廣的的是子宮內(nèi)膜cancer及乳腺cancer,如對(duì)乳腺cancer中ER、PR的檢測(cè),有助于決定臨床醫(yī)療中是否需要加入內(nèi)分泌ji素阻斷醫(yī)療,并能判斷預(yù)后,ER及PR陽(yáng)性表達(dá)、原cancer基因(C-erbB-2)陰性表達(dá)病例對(duì)三苯氧胺等ji素醫(yī)療反應(yīng)良好,而ERPR、C-erbB-2三種抗體均陰性(TNBC)患者采用三苯氧胺可能意義不大。免疫組化檢測(cè)多少錢(qián)?云南病理免疫組化檢測(cè)
做免疫組化意味什么?四川做得好的免疫組化實(shí)驗(yàn)
免疫組化如何比較大限度地降低組織非特異性染色?
(1)縮短一抗/二抗孵育時(shí)間、稀釋抗體來(lái)控制。這是重要的一條。
(2)一抗用多克隆抗體易出現(xiàn)非特異性著色,建議試用單克隆抗體看看。
(3)內(nèi)源性過(guò)氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高(含血細(xì)胞多的組織),需要通過(guò)延長(zhǎng)滅活時(shí)間和增加滅活劑濃度來(lái)降低背景染色;
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(4)非特異性組分與抗體結(jié)合,這需要通過(guò)延長(zhǎng)二抗來(lái)源的動(dòng)物免疫血清封閉時(shí)間和適當(dāng)增加濃度來(lái)加強(qiáng)封閉效果;
(5)縮短DAB孵育時(shí)間或降低DAB濃度/過(guò)氧化氫濃度等;
(6)適當(dāng)增加PBS沖洗次數(shù)和浸洗時(shí)間,在一抗、二抗或SP孵育之后的浸洗尤為重要;
(7)防止標(biāo)本染色過(guò)程中出現(xiàn)干片,這容易增強(qiáng)非特異性著色。 四川做得好的免疫組化實(shí)驗(yàn)