獲取實驗性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)模型小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞,并檢測其特性。方法取8周齡,雌性C57BL/6小鼠行EAE造模,待至發(fā)病高峰期(第15天)時以PBS灌注后取小鼠后腦和脊髓,切碎后加胰酶消化,消化完成后通過100μm濾網(wǎng)濾過,而后采用Percoll密度梯度離心法分離獲取單個核細(xì)胞,進(jìn)一步利用CD11b與CD45抗體染色,通過流式細(xì)胞儀分選CD11b~+CD45~(high)和CD11b~+CD45~(low)細(xì)胞,即分別得到相對活化和靜息的小膠質(zhì)細(xì)胞,***對流式分選獲取的小膠質(zhì)細(xì)胞行qPCR檢測。結(jié)果通過形態(tài)比較,獲得了高純度的小膠質(zhì)細(xì)胞。FIZZ-1基因行qPCR檢測,結(jié)果顯示在EAE急性期M2型小膠質(zhì)細(xì)胞明顯增多,符合文獻(xiàn)報道。結(jié)論該方法能從EAE小鼠體內(nèi)分離獲取高純度的小膠質(zhì)細(xì)胞,可用于相關(guān)目的基因后續(xù)檢測。EAE模型的誘導(dǎo)方案比較繁雜,各種方案發(fā)病機(jī)制不盡相同。浙江比較好的eae模型實驗外包

比較不同的神經(jīng)功能損傷評分標(biāo)準(zhǔn)對小鼠實驗性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)運動功能障礙評估的效能。方法:應(yīng)用MOG35-55多肽加完全福氏佐劑乳化后免疫20只C57BL/6小鼠,復(fù)制EAE小鼠模型,并使用3種不同的評分標(biāo)準(zhǔn)(Kono's5分法、Hooper's7分法、Weaver's15分法)觀察和評估實驗動物的發(fā)病情況,對實驗小鼠在發(fā)病初期、高峰期的神經(jīng)功能障礙進(jìn)行定量的功能損傷評價。結(jié)果:3種評分標(biāo)準(zhǔn)比較,在發(fā)病初期,15分法和7分法評估神經(jīng)損傷癥狀的敏感性相當(dāng),比5分法高;高峰期,以癥狀評分與病理評分的相關(guān)性程度來比較3種評分法的效度,15分法效度比較高,7分法次之。結(jié)論:Weaver's15分法評價EAE模型神經(jīng)功能損傷癥狀,具有明顯的優(yōu)勢,推薦作為今后EAE研究的優(yōu)先評分法。浙江比較好的eae模型實驗外包嚙齒動物EAE模型仍有許多局限性。

通過對EAE動物模型的行為學(xué)觀察,科學(xué)家們能夠深入評估多發(fā)性硬化癥(MS)對動物神經(jīng)系統(tǒng)功能的影響。在模型建立后,科學(xué)家們會密切關(guān)注動物的行為變化,包括運動能力、協(xié)調(diào)性、平衡感等方面的表現(xiàn)。這些觀察不僅有助于了解MS對神經(jīng)系統(tǒng)造成的具體損害,還能揭示疾病進(jìn)展過程中神經(jīng)系統(tǒng)功能的動態(tài)變化。通過對比正常動物與EAE模型動物的行為差異,科學(xué)家們可以量化評估MS對動物神經(jīng)系統(tǒng)功能的損害程度,進(jìn)而為疾病的***和康復(fù)提供重要的參考依據(jù)。因此,行為學(xué)觀察在EAE動物模型的研究中占據(jù)舉足輕重的地位,它不僅豐富了我們對MS的理解,還為尋找新的***方法開辟了新的途徑。
EAE模型是實驗動物通過神經(jīng)組織(其中的某些成分)或病毒誘導(dǎo)產(chǎn)生的。EAE的誘導(dǎo)有主動誘導(dǎo)法和被動誘導(dǎo)法兩種。不同的免疫方法,可影響抗原遞呈,激發(fā)不同的免疫反應(yīng),這不但影響EAE的發(fā)生率,還可影響其發(fā)展與轉(zhuǎn)歸。通常采用主動誘導(dǎo)法制備EAE模型,將抗原與佐劑的混合乳劑直接注射至動物體內(nèi),經(jīng)過一定時間的潛伏期,誘導(dǎo)EAE的產(chǎn)生??乖⑸洳课坏牟煌?,可影響EAE的發(fā)生率、潛伏期、死亡率及復(fù)發(fā)率。常用的注射部位有腳墊、頸部及背部(皮下、皮內(nèi)、肌肉)、腹腔和尾靜脈等多種,其中以皮下多點注射及腳墊注射的發(fā)病率比較高,而頸部注射則有較高的復(fù)發(fā)率。 因多次注射易引發(fā)免疫耐受,現(xiàn)在多采用單次注射抗原法。用大鼠制備EAE模型有許多優(yōu)點,如品系多,選擇余地大,繁殖快,同一品系中個體間差異小,實驗方便。

EAE模型是自身免疫性腦脊髓炎(Experimental Autoimmune Encephalomyelitis)的動物模型,它是多發(fā)性硬化癥(MS)的常用研究工具。這個模型通過引起小鼠或大鼠免疫系統(tǒng)攻擊其自身神經(jīng)組織而導(dǎo)致神經(jīng)損傷和癥狀,從而研究MS的病理生理學(xué)、免疫學(xué)和***方法。模型的建立需要給實驗動物注射特定蛋白結(jié)構(gòu),如脊髓蛋白、腦蛋白等,以激發(fā)其免疫系統(tǒng)并模擬MS的癥狀。該模型的應(yīng)用范圍普遍,包括探究疾病***藥物的有效性、研究免疫系統(tǒng)攻擊神經(jīng)組織的機(jī)制等。小鼠是EAE研究中常見的物種,主要是因為它們具有成本低、研究方案成熟和具有繁殖轉(zhuǎn)基因品系的特點。大鼠eae模型實驗外包
EAE模型是常用的實驗性動物模型用來研究人炎癥脫髓鞘。浙江比較好的eae模型實驗外包
EAE是由針對CNS髓鞘發(fā)生免疫攻擊的CD4+T介導(dǎo)的自身免疫性疾病,抗原致敏的T細(xì)胞穿過血腦屏障進(jìn)入中樞,誘發(fā)對自身髓鞘抗原的免疫應(yīng)答,導(dǎo)致腦及脊髓的免疫損傷。EAE是人類MS的經(jīng)典動物模型,通過對EAE發(fā)病機(jī)制、病情發(fā)***展規(guī)律、臨床及病理改變、***及預(yù)防等方面的深入研究,能夠為MS的***提供充分的實驗依據(jù)。國內(nèi)外學(xué)者試用多種易感動物建立EAE模型,以期闡明MS及EAE的發(fā)病機(jī)制,并為其病情的監(jiān)測、復(fù)發(fā)的預(yù)防、***方案的選擇以及新療法或新藥物的篩選等提供可靠依據(jù)。浙江比較好的eae模型實驗外包