獲取實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)模型小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞,并檢測(cè)其特性。方法取8周齡,雌性C57BL/6小鼠行EAE造模,待至發(fā)病高峰期(第15天)時(shí)以PBS灌注后取小鼠后腦和脊髓,切碎后加胰酶消化,消化完成后通過100μm濾網(wǎng)濾過,而后采用Percoll密度梯度離心法分離獲取單個(gè)核細(xì)胞,進(jìn)一步利用CD11b與CD45抗體染色,通過流式細(xì)胞儀分選CD11b~+CD45~(high)和CD11b~+CD45~(low)細(xì)胞,即分別得到相對(duì)活化和靜息的小膠質(zhì)細(xì)胞,***對(duì)流式分選獲取的小膠質(zhì)細(xì)胞行qPCR檢測(cè)。結(jié)果通過形態(tài)比較,獲得了高純度的小膠質(zhì)細(xì)胞。FIZZ-1基因行qPCR檢測(cè),結(jié)果顯示在EAE急性期M2型小膠質(zhì)細(xì)胞明顯增多,符合文獻(xiàn)報(bào)道。結(jié)論該方法能從EAE小鼠體內(nèi)分離獲取高純度的小膠質(zhì)細(xì)胞,可用于相關(guān)目的基因后續(xù)檢測(cè)。EAE通常用作細(xì)胞介導(dǎo)的特異性的自身免疫疾病的模型。內(nèi)蒙古比較好的eae模型如何構(gòu)建

自身免疫性腦脊髓炎(EAE)模型是古老、比較常用的人類MS實(shí)驗(yàn)?zāi)P?。EAE包括了MS中觀察到的病理特征,包括:炎癥脫髓鞘軸突喪失神經(jīng)膠質(zhì)過多癥該模型還可以研究炎癥和髓鞘再生的解決反調(diào)節(jié)機(jī)制。但是,MS的每個(gè)方面都需要在EAE模型中進(jìn)行單獨(dú)研究,增加了數(shù)據(jù)分析的難度。此外,研究中使用的不同試劑可能會(huì)導(dǎo)致不同程度的疾病。在小鼠中,使用不同濃度的百日咳***進(jìn)行實(shí)驗(yàn)性血液屏障損傷后,通過主動(dòng)免疫誘導(dǎo)EAE。通過使用含有能夠***先天免疫系統(tǒng)的細(xì)菌成分的佐劑實(shí)現(xiàn)對(duì)髓磷脂抗原的敏感作用。由于人類中的活化抗原尚不清楚,因此使用多種CNS組織抗原如髓鞘堿性蛋白(MBP)、蛋白脂質(zhì)蛋白(PLP139-151)或髓磷脂少突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白肽35-55(MOG35-55)誘導(dǎo)產(chǎn)生EAE。山東專業(yè)的eae模型有哪些用大鼠制備EAE模型有許多優(yōu)點(diǎn),如品系多,選擇余地大,繁殖快,同一品系中個(gè)體間差異小,實(shí)驗(yàn)方便。

比較不同的神經(jīng)功能損傷評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)對(duì)小鼠實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)運(yùn)動(dòng)功能障礙評(píng)估的效能。方法:應(yīng)用MOG35-55多肽加完全福氏佐劑乳化后免疫20只C57BL/6小鼠,復(fù)制EAE小鼠模型,并使用3種不同的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)(Kono's5分法、Hooper's7分法、Weaver's15分法)觀察和評(píng)估實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的發(fā)病情況,對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠在發(fā)病初期、高峰期的神經(jīng)功能障礙進(jìn)行定量的功能損傷評(píng)價(jià)。結(jié)果:3種評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)比較,在發(fā)病初期,15分法和7分法評(píng)估神經(jīng)損傷癥狀的敏感性相當(dāng),比5分法高;高峰期,以癥狀評(píng)分與病理評(píng)分的相關(guān)性程度來比較3種評(píng)分法的效度,15分法效度比較高,7分法次之。結(jié)論:Weaver's15分法評(píng)價(jià)EAE模型神經(jīng)功能損傷癥狀,具有明顯的優(yōu)勢(shì),推薦作為今后EAE研究的優(yōu)先評(píng)分法。
EAE動(dòng)物模型的研究不僅對(duì)于多發(fā)性硬化癥(MS)的療愈具有重要的推動(dòng)作用,更可能為其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病的研究提供寶貴的啟示。通過對(duì)EAE動(dòng)物模型的深入研究,科學(xué)家們能夠更深入地理解神經(jīng)系統(tǒng)疾病的發(fā)病機(jī)制,從而為開發(fā)新的療愈策略提供理論支持。同時(shí),EAE動(dòng)物模型在模擬神經(jīng)系統(tǒng)疾病病理過程方面的成功應(yīng)用,也為其他類似疾病的研究提供了可借鑒的經(jīng)驗(yàn)和方法。通過借鑒EAE動(dòng)物模型的研究思路和技術(shù)手段,科學(xué)家們可以更加高效地開展其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病的研究,為這些疾病的診斷和療愈提供新的思路和方向。因此,EAE動(dòng)物模型的研究不僅局限于MS的療愈,更有著廣泛的應(yīng)用前景和深遠(yuǎn)的意義。eae模型是實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎模型的縮寫。

EAE模型的發(fā)展與年齡密切相關(guān)。幼齡動(dòng)物發(fā)病后癥狀很快達(dá)到高峰,隨后又迅速恢復(fù),和成年動(dòng)物相比病程較短,其抗原注射部位及CNS內(nèi)的炎性細(xì)胞浸潤程度較輕,并且幼齡動(dòng)物體重偏小,一般情況差,易出現(xiàn)麻醉意外而死亡。若動(dòng)物體重(周齡)偏大,則發(fā)病延遲,且癥狀較重,所以選擇受試動(dòng)物以青年期為佳。但若作為抗原提供者,其年齡可適當(dāng)放寬,一般大于4周即可。MS多為青年女性,EAE的發(fā)生也存在性別差異。一般來講,雌性動(dòng)物較雄性敏感,表現(xiàn)在雌性動(dòng)物的發(fā)病率高,臨床癥狀相對(duì)嚴(yán)重,如Wistar大鼠及SJL/J小鼠,但也有的動(dòng)物如Lewis大鼠,雄性較雌性敏感。另外實(shí)驗(yàn)時(shí)間選擇在夏季比冬春季節(jié)誘導(dǎo)動(dòng)物模型的敏感性更高。敏感性高的動(dòng)物,有時(shí)癥狀較嚴(yán)重且死亡率高,應(yīng)引起注意。EAE模型的被動(dòng)轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)是研究其發(fā)病機(jī)制的直接證據(jù)。新疆專門做eae模型有哪家
通常采用主動(dòng)誘導(dǎo)法制備EAE模型,將抗原與佐劑的混合乳劑直接注射至動(dòng)物體內(nèi)。內(nèi)蒙古比較好的eae模型如何構(gòu)建
EAE動(dòng)物模型的研究不僅為我們深入探索多發(fā)性硬化癥(MS)的發(fā)病機(jī)制提供了有力的工具,更在推動(dòng)MS的臨床診斷和***技術(shù)方面發(fā)揮著舉足輕重的作用。通過對(duì)這一模型的深入研究,科學(xué)家們得以更***地了解MS的病理生理過程,從而為開發(fā)新的診斷方法提供了理論依據(jù)。同時(shí),EAE動(dòng)物模型也為評(píng)估新型***藥物的療效和安全性提供了重要的實(shí)驗(yàn)平臺(tái),為MS的臨床***提供了更為精細(xì)和個(gè)性化的方案。此外,隨著對(duì)EAE動(dòng)物模型研究的不斷深入,我們有望在未來發(fā)現(xiàn)更多針對(duì)MS的有效***方法,為患者帶來更好的***效果和生活質(zhì)量。因此,EAE動(dòng)物模型的研究無疑將為MS的臨床診斷和***技術(shù)的進(jìn)步注入新的動(dòng)力。內(nèi)蒙古比較好的eae模型如何構(gòu)建