外泌體提取之后利用電鏡來分析其大小和形態(tài)，利用流式細(xì)胞儀來分析細(xì)胞表面標(biāo)記，通過Western blot和ELISA等方法對蛋白進(jìn)行分析，或通過qPCR和新一代測序（NGS）來分析RNA。調(diào)查發(fā)現(xiàn)，在分離exosome時，約有56%的人采用超速離心法，說明這種方法仍是目前的金標(biāo)準(zhǔn)方法。不過這種方法缺點(diǎn)也不少：耗時耗力，往往需要8-30個小時；每次比較多只能處理6個樣品；需要大量的起始材料；產(chǎn)量不高。商業(yè)化的exosome提取試劑盒已經(jīng)上市，更為簡單省事。外泌體實(shí)驗(yàn)，就找南京英瀚斯。遼寧專門做外泌體檢測
外泌體是包含了復(fù)雜RNA展的總外泌體分離試劑從細(xì)胞培養(yǎng)基或任何體液中即刻分離完整的外泌體。這些試劑及其隨附的方案是多種試驗(yàn)的理想選擇，包括處理少量樣本和處理多個樣本。從細(xì)胞培養(yǎng)物中富集的總外泌體（使用“總外泌體分離”試劑或超速離心）可以通過免疫磁珠捕獲進(jìn)一步純化特定的亞群。使用基于Dynabeads的CD9、CD63、CD81或EpCam特異性試劑，或?qū)㈡溍褂H和素試劑與您選擇的生物素化抗體結(jié)合，以基于表面抗原，純化所有群體。北京專門做外泌體南京英瀚斯生物-外泌體檢測服務(wù)_疾病醫(yī)學(xué)模型_。
外泌體中常見的細(xì)胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白，是鳥苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一種。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細(xì)胞的融合，有文獻(xiàn)報道稱RAB4, RAB5和 RAB11主要出現(xiàn)于早期以及回收的核內(nèi)體中，RAB7 和 RAB9主要出現(xiàn)于晚期的核內(nèi)體?，F(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種RAB蛋白。除了RAB蛋白，外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯(lián)蛋白（包括膜聯(lián)蛋白1、2、4、5、6、7、11等）。外泌體膜上富含參與外泌體運(yùn)輸?shù)乃目缒さ鞍准易澹–D63, CD81 和CD9)）、熱休克蛋白家族（(HSP60, HSP70, HSPA5, CCT2 和HSP90以及一些細(xì)胞特異性的蛋白包括A33（結(jié)腸上皮細(xì)胞來源）、MHC-Ⅱ(抗原提呈細(xì)胞來源)、CD86(抗原提呈細(xì)胞來源)以及乳凝集素（不成熟的樹突狀細(xì)胞）。
外泌體初次于綿羊網(wǎng)織紅細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn)， 1987年Johnstone將其命名為“exosome”?，F(xiàn)今，其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來源于細(xì)胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中 。外泌體富含膽固醇和鞘磷脂。2007年， Valadi等發(fā)現(xiàn)鼠的肥大細(xì)胞分泌 的 exosome可以被人的肥大細(xì)胞捕獲，并且其攜帶的mRNA成分可以進(jìn)入細(xì)胞漿中可以被翻譯成蛋白質(zhì)，不僅只是mRNA，exosomes所轉(zhuǎn)移的microRNA同樣具有生物活性，在進(jìn)入靶細(xì)胞后可以靶向調(diào)節(jié)細(xì)胞中mRNA的水平。這一發(fā)現(xiàn)使得研究人員對exosome的研究熱情激增，截止已經(jīng)通過286項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)了41860種蛋白質(zhì)、2838種microRNA、3408種mRNA。外泌體在分泌細(xì)胞和受體細(xì)胞間的穿梭介導(dǎo)了細(xì)胞間的生物分子傳遞。
外泌體表面有其特異性標(biāo)記物（如CD63、CD9蛋白），用包被抗標(biāo)記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結(jié)合，即可將外泌體吸附并分離出來。磁珠法具有特異性高、操作簡便、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點(diǎn)，但是效率低，外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響，不利于下游實(shí)驗(yàn)，難以***普及。外泌體是大多數(shù)細(xì)胞分泌的40 - 150nm的膜泡，存在于細(xì)胞培養(yǎng)基、血漿、血清、唾液、尿液、羊水和惡性腹水等生物液體中。外泌體檢測可找英瀚斯生物，測序、電鏡、粒徑分析都可做。南京外泌體檢測服務(wù)公司，科研課題解決方案。遼寧專門做外泌體檢測
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外泌體的臨床應(yīng)用：1.在疾病診斷中的應(yīng)用潛能：外泌體存在于所有的生物體液中，并由所有細(xì)胞分泌，這使得外泌體在液體活檢中具有吸引力，可用于縱向取樣跟蹤疾病進(jìn)展。外泌體的生物發(fā)生可以捕獲復(fù)雜的細(xì)胞外和細(xì)胞內(nèi)分子，可用于***的、多參數(shù)的診斷檢測。外泌體的表面蛋白也有助于其免疫捕獲和富集。外泌體診斷應(yīng)用的重點(diǎn)疾病包括心血管病、影響***系統(tǒng)的疾病和**。這項(xiàng)努力正在迅速擴(kuò)展到肝臟、腎臟和肺部的其他疾病。2.在疾病***中的應(yīng)用潛能：外泌體向病變細(xì)胞運(yùn)送功能物質(zhì)的特性有利于它們作為***載體。與脂質(zhì)體相比，外泌體的免疫***率低。此外外泌體已被證實(shí)且具有良好的耐受性，無明顯副作用遼寧專門做外泌體檢測
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