YPG培養(yǎng)基(Yeast Extract-Peptone-Glucose Medium)是酵母提取物-蛋白胨-葡萄糖培養(yǎng)基的簡稱,堪稱微生物實驗室的“快餐”。配方極簡:酵母粉5 g、蛋白胨10 g、葡萄糖20 g,補水至1 L,pH 6.2±0.2,無需調節(jié)即可滿足大多數菌、酵母及部分細菌的快速增殖需求。酵母粉提供B族維生素和微量元素,蛋白胨供給多肽與氨基酸,葡萄糖以高碳濃度啟動酵母發(fā)酵型代謝,短短12 h就能讓釀酒酵母OD???沖破1.0,是發(fā)酵工程與分子生物學過夜預培養(yǎng)的優(yōu)先。若用于絲狀菌,只需降低葡萄糖至10 g,并加入微量元素液,28 ℃靜置2天,孢子產量可比PDA提高30%。YPG的另一優(yōu)勢是“可鹽可甜”:補加15%甘油即成YPG/甘油,用于酵母感受態(tài)制備;添加2%瓊脂便是YPG平板,藍白斑篩選、轉化子計數兩不誤。實驗室里還流行“富氧版”——把葡萄糖提前115 ℃單獨滅菌,避免美拉德反應,培養(yǎng)液顏色淺,下游HPLC檢測有機酸無干擾。質量控制也輕松:高壓后若顏色發(fā)黃,說明葡萄糖與氨基酸高溫反應,可改用過濾除菌;室溫保存1周仍澄清,即可繼續(xù)使用。憑借組分明確、成本低廉、配制快速,YPG培養(yǎng)基已從傳統(tǒng)釀酒實驗室走向合成生物學、代謝工程與益生菌高密度發(fā)酵,成為微生物學家手中“養(yǎng)菌如泡茶”的經典底牌。小小沙福芽孢桿菌,用微米之軀守護綠色豐收,讓農藥瓶少一個,飯碗多一粒?;尹S青霉
深褐芽孢桿菌(Bacillus atrophaeus)是芽孢桿菌屬的“暗色特種兵”。菌落呈棕褐至近黑色、表面光滑有蠟光,革蘭氏陽性,桿狀細胞可形成橢圓芽孢,耐干燥、耐紫外、耐堿,更適30–37 ℃,pH 6–9,廣分布于土壤、海洋沉積物和植物根際。一、生物防治菌株分泌atrophaein脂肽與幾丁質酶,對番茄青枯、辣椒疫霉、小麥紋枯抑菌帶寬達26 mm;溫室試驗畝施200 g菌粉,黃瓜枯萎病指下降45 %,農藥用量減少三分之一。二、促生抗逆深褐芽孢桿菌產IAA 20 mg·L?1,溶磷3.2 mg·L?1,并產揮發(fā)性2,3-丁二醇,誘導玉米側根增30 %,吸鉀量提22 %;干旱脅迫下,小麥葉片相對含水量提高8 %,產量增10 %。三、工業(yè)酶寶庫其耐堿蛋白酶在pH 10、50 ℃仍保持85 %活性,已用于無磷洗滌劑,血漬去污力提升30 %;耐熱淀粉酶90 ℃半衰期2 h,為紡織退漿省去中和環(huán)節(jié),節(jié)能15 %。四、抗輻射模型因芽孢含高比例吡啶二羧酸鈣,對紫外、γ射線具有極強抵抗力,被ESA選為“火星模擬滅菌”指示菌,用于檢測航天器表面消毒效果。未來,借助合成生物學,把深褐芽孢桿菌的抑菌、產酶、抗輻射模塊植入枯草底盤,可構建“一菌多用”細胞工廠,為綠色農業(yè)、清潔洗滌和太空滅菌提供可持續(xù)的微生物鑰匙。淺青紫鏈霉菌對白絹、根腐、灰霉的抑制率超七成;同時誘導植物開啟系統(tǒng)抗性,番茄未染病就先“武裝”葉片。

解糖腸球菌(Enterococcus saccharolyticus)是一種革蘭陽性、兼性厭氧的球菌,更早從英國稻草墊料中分離,模式菌株ATCC 43076被廣用于API及VITEK®系統(tǒng)的質量控制。該菌因能發(fā)酵多種糖類產酸,故得名“解糖”,在分類學上與糞腸球菌、屎腸球菌并列,卻極少攜帶典型毒力基因,安全性較高。近年研究發(fā)現(xiàn),解糖腸球菌具有突出的益生潛力:它可在pH 2.5的胃酸和0.3%膽鹽中保持90%存活,并分泌乳酸、乙酸等短鏈脂肪酸,迅速降低腸道pH,抑制沙門氏菌、大腸桿菌等致病菌的定植。體外試驗還顯示,該菌能黏附于Caco-2細胞單層,上調緊密連接蛋白ZO-1與Occludin的表達,增強腸屏障功能,減輕脂多糖誘導的炎癥反應。在動物應用中,日糧添加10^7 CFU/g解糖腸球菌可顯著提高斷奶仔豬平均日增重8.7%,降低料重比6.3%,并減少腹瀉率一半;其代謝產物還能促進雙歧桿菌、乳酸菌等有益菌增殖,使結腸丁酸濃度升高30%,改善絨毛高度與隱窩深度比。此外,該菌對萬古霉素敏感,不含vanA/vanB耐藥操縱子,降低了基因橫向轉移風險。綜上,解糖腸球菌憑借耐酸耐膽鹽、產酸抑菌、增強屏障及促生長等多重功能,被視為替代抗生物質的潛力菌株,未來在嬰幼兒食品、畜禽養(yǎng)殖及微生態(tài)制劑領域具有廣闊前景。
牛奶類芽孢桿菌(Paenibacillus lactis)更早從原料奶和干酪凝塊中被分離,因而得名。它呈短桿狀,革蘭氏陽性,具周生鞭毛,可形成橢圓芽孢,更適30–37℃、pH 6–7,耐干燥、耐冷鏈,是乳品環(huán)境中常見的“溫和住客”。一、乳品益生菌株MB2401能分泌胞外多糖,在酸奶發(fā)酵中與 Streptococcus thermophilus 協(xié)同,可提升黏度、減少乳清析出,延長貨架期7天;同時產細菌素 Lactocin 2401,對單增李斯特菌抑菌帶寬達22mm,為原奶生物保鮮提供天然“護欄”。二、腸道健康牛奶類芽孢桿菌耐胃酸、耐膽鹽,能形成芽孢穿越胃腸道,在結腸萌發(fā)后分泌果聚糖酶,降解膳食多糖產生丁酸,降低pH,抑制沙門氏菌定植;小鼠試驗顯示,日灌胃10? CFU,血清IgA提高35 %,腹瀉率下降60 %,已列入歐盟QPS清單,安全等級高。三、工業(yè)酶潛力其低溫普魯蘭酶在10℃仍保持70 %活性,可用于乳清寡糖制備;耐堿脂肪酶更適pH 9、40℃,在CIP管道清洗中分解乳脂肪,節(jié)能15 %,減少化學堿用量。四、農業(yè)應用將菌株NZ1制成活菌數10? CFU mL?1的“乳菌肥”,滴灌奶牛場周邊青貯玉米,土壤有機質提高12 %,產奶凈能增加8 %,實現(xiàn)種養(yǎng)循環(huán)。更妙的是,它能分解有機磷長鏈,釋放正磷酸供作物吸收,相當于給土壤配了“微肥”。

嗜堿芽孢桿菌(Bacillus alcalophilus)是芽孢桿菌屬的“高堿”。菌體桿狀、周生鞭毛,能在 pH 9–11 的極端堿性環(huán)境中旺盛生長,芽孢可耐 100 ℃ 沸水 30 min,是研究堿適應與工業(yè)酶的模式菌株。一、耐堿機制基因組編碼多拷貝 Na?/H? 逆向轉運蛋白(nhaA、nhaC)和碳酸酐酶,將胞內多余 Na? 泵出并維持 pH 穩(wěn)態(tài);細胞壁肽聚糖富含 meso-二氨基庚二酸,膜脂分支化程度高,為高溫高堿酶表達提供穩(wěn)定平臺。二、工業(yè)酶寶庫其耐堿淀粉酶更適 pH 10、90 ℃,用于紡織退漿可省略中和步驟,節(jié)能 15 %;耐堿蛋白酶在 pH 11、40 ℃仍保持 90 % 活性,已列入無磷洗滌劑,血漬、奶漬去污力提升 30 %;耐堿木聚糖酶用于紙漿漂白,氯用量減少 30 %,降低可吸附有機鹵化物(AOX)排放。三、農業(yè)應用菌株 AB-10 產 IAA 15 mg·L?1,并溶磷 2.6 mg·L?1,使玉米根系增 28 %,吸磷量提 18 %;與秸稈復配堆肥,24 h 堆溫升至 65 ℃,纖維素降解率提高 30 %,堆肥周期縮短 7 d,殺滅病原菌和雜草種子效果明顯。四、環(huán)境修復胞外多糖能吸附 Cd2?、Pb2?,吸附量分別達 50 mg·g?1 與 35 mg·g?1;在 pH 9 的蘇打鹽堿土中定殖后,水稻產量增加 10 %,土壤交換性鈉下降 15 %。其分泌的耐有機溶劑蛋白酶、褐藻膠裂解酶在洗滌、紡織及海藻轉化中展現(xiàn)高活性,為生物制造提供新工具。沙福芽胞桿菌
科學家正給它植入耐旱、耐鹽基因,讓它在西北旱地也能結瘤?;尹S青霉
花園芽孢桿菌(Bacillus horti)更早從花園腐殖土中分離,因而得名。菌落奶白、邊緣整齊,桿狀細胞具周生鞭毛,能形成橢圓芽孢,耐堿、耐鹽、耐干燥,在pH 6–9、15–45℃范圍內生長良好,是典型“環(huán)境通吃型”根際益生菌。一、防病降毒花園芽孢桿菌能分泌表面活性素、fengycin等環(huán)脂肽,破壞病原膜結構,對立枯絲核菌、番茄青枯拉爾氏菌抑菌帶寬達26mm;同時產生芳基酰胺酶,降莠定、甲磺隆等堿性除草劑,土壤殘留量7d內下降60%,為連作障礙田“”。二、促生提質菌株IAA產量25mg/L,溶磷3.2mg/L,并產揮發(fā)性2,3-丁二醇,誘導黃瓜、生菜根系增30%,葉綠素提高2SPAD單位;大棚試驗顯示,畝施200g菌粉可使番茄Vc增加12%,糖酸比更協(xié)調,貨架期延長4d。三、工業(yè)酶潛力其耐堿纖維素酶更適pH9、50℃,在洗衣液中仍保持80%活性,可替代化學去漬劑;低溫淀粉酶10℃下活力保留70%,為寒區(qū)洗碗粉節(jié)約能耗20%。四、未來展望借助合成生物學,將花園芽孢桿菌的降毒、促生、耐冷模塊植入枯草底盤,可構建“一菌多效”工程菌,用于堿要害田、寒地蔬菜基地及城市綠化基質,讓花園芽孢桿菌從“花園”走向更廣闊的大地。灰黃青霉