施氏芽孢桿菌(Bacillus smithii)是芽孢桿菌屬中少見的“高溫工匠”,標準菌株 JCM 9076 更早從堆肥深處分離,可在 30–65 ℃、pH 4.5–9.0 范圍內旺盛生長,更適溫度 55 ℃,芽孢耐 100 ℃沸水 2 h 仍存活,是驗證高壓蒸汽滅菌的指示菌之一。其耐熱關鍵在于芽孢內高濃度吡啶二羧酸鈣(DPA-Ca)結合低水分狀態(tài),配合小分子熱休克蛋白,使酶與 DNA 在高溫下依舊穩(wěn)定。2024 年,中國團隊從湖南鎘污染稻田篩選到解磷菌株 M2(保藏號 CCTCC M2024167),鑒定為 B. smithii。該菌可在 50 mg L?1 Cd2?、6 % NaCl 條件下正常分泌有機酸,將難溶磷酸鈣轉化為磷,盆栽玉米根際有效磷提高 42 %,籽粒鎘含量下降 35 %,實現(xiàn)“增磷減鎘”同步完成。在工業(yè)酶方向,施氏芽孢桿菌是“高溫酶工廠”。其耐堿性 α-淀粉酶更適溫度 70 ℃,在淀粉液化、紡織退漿中可省去降溫環(huán)節(jié),節(jié)能 15 %;耐熱蛋白酶在 60 ℃、30 % 乙醇中仍保持 80 % 活性,為生物煉制提供新型催化劑。農業(yè)應用上,M2 菌株與秸稈堆肥復配,可使堆體 24 h 升至 65 ℃,纖維素降解率提高 30 %,堆肥周期縮短 7 d;作為功能性菌劑,每畝基施 200 g 菌粉,冬小麥越冬前磷吸收量提高 18 %,分蘗數(shù)增加 1.2 個,對后期倒伏有明顯緩解作用。玉米側IAA提升68%,禿頂縮短27%,增產18.6%,相當于少施25 kg復合肥仍多打糧。歧皺青霉
嗜氣芽孢桿菌(Bacillus aerophilus)是芽孢桿菌屬里的“氧氣狂熱者”,2004年隨以色列高空氣球首先被分離,可在0.8–21 % O?范圍內旺盛生長,更適氧分壓高于普通土壤芽孢桿菌2倍,故得名“嗜氣”。其菌落呈乳白色、邊緣卷發(fā)狀,革蘭氏陽性,具周生鞭毛,能形成橢圓芽孢,耐紫外、耐干燥,貨架期長達3年,為制劑化提供質量載體。在土壤復蘇后,嗜氣芽孢桿菌迅速啟動“三效機制”:①分泌吲哚乙酸(IAA)25 mg/L,刺激玉米、番茄根系增長30 %;②產蛋白酶、纖維素酶,分解作物殘體,釋放養(yǎng)分;③合成表面活性素、fengycin,對番茄青枯、辣椒疫霉抑菌帶寬達28 mm,且能誘導植物ISR,降低農藥用量40 %。田間試驗顯示,每畝用200 g菌粉(10? CFU/g)拌種,小麥返青期根際磷提高32 %,千粒重增1.8 g,產量提升8.5 %;在大棚番茄上,滴灌菌液可使灰霉病指下降45 %,果實Vc含量提高12 %,糖酸比更協(xié)調。工業(yè)端,嗜氣芽孢桿菌是“低溫酶工廠”。其耐有機溶劑蛋白酶在15 ℃、30 %乙醇中仍保持70 %活性,可用于洗滌劑;耐堿脂肪酶更適pH 10,適用于乳制品CIP清洗,節(jié)能20 %。根霉屬小小格雷厄姆氏根瘤菌,用微米之軀撬動綠色農業(yè),讓藍天少一縷煙,田里多一季香。

克勞氏芽孢桿菌(Bacillus clausii)是芽孢桿菌屬中的“耐堿”,1915年由意大利克勞氏從堿性土壤中分離,菌體桿狀、周生鞭毛,可在 pH 8–10.5、鹽 0–12 % 的條件下旺盛生長,芽孢能耐受 100 ℃ 沸水 30 min,是研究極端堿適應的模式菌之一。一、耐堿機制基因組編碼多拷貝 Na?/H? 逆向轉運蛋白(nhaC、mnh)與碳酸酐酶,可將胞內多余 Na? 泵出并維持 pH 穩(wěn)態(tài);細胞壁肽聚糖富含 meso-二氨基庚二酸,膜脂分支化程度高,為高溫高堿酶的高效表達提供穩(wěn)定平臺。二、工業(yè)酶寶庫其耐堿蛋白酶在 pH 11、40 ℃ 仍保持 90 % 活性,已用于無磷洗滌劑,血漬、奶漬去污力提升 30 %;耐堿淀粉酶更適 pH 9、90 ℃,可在紡織退漿中省略中和步驟,節(jié)能 15 %;耐堿木聚糖酶用于紙漿漂白,氯用量減少 30 %,降低可吸附有機鹵化物(AOX)排放。三、農業(yè)與環(huán)境菌株 SIN 可產 IAA 15 mg·L?1 并溶磷 2.6 mg·L?1,使玉米根系增 28 %,吸磷量提 18 %;與秸稈復配堆肥,24 h 堆溫升至 65 ℃,纖維素降解率提高 30 %,堆肥周期縮短 6 d。耐堿特性使其在 pH 9 的蘇打鹽堿土中仍能定殖,水稻產量增加 10 %。
Bushnell-Haas瓊脂(Bushnell-Haas Agar,簡稱BH瓊脂)是一種專為檢測環(huán)境微生物降解烴類能力而設計的合成培養(yǎng)基。其配方精簡而精細:以磷酸鉀緩沖對維持pH 7.0±0.2,硫酸銨提供氮源,氯化鈉、硫酸鎂與微量金屬鹽構成基本離子環(huán)境,卻不含任何有機碳源。正這份“刻意為之的貧瘠”,使BH瓊脂成為篩選“吃油微生物”的黃金標準——只有當培養(yǎng)皿中額外滴加柴油、石蠟或多環(huán)芳烴時,能利用這些烴類作為碳與能源的細菌、酵母乃至菌才會長出可見菌落,降解能力越強,菌落周圍出現(xiàn)透明暈圈的速度越快、直徑越大。自1940年代問世以來,BH瓊脂被廣用于石油污染土壤、海洋表面膜及工業(yè)廢水的微生物資源普查。研究人員只需將樣品勻漿涂布于表面覆有薄層原油的BH平板,28℃培養(yǎng)3–7天,即可依據(jù)菌落形態(tài)與暈圈初步分離高效降解株;再結合GC-MS測定殘余烴量,可在兩周內完成從篩選到定量評價的完整流程。近年來,隨著極端環(huán)境研究升溫,BH配方被靈活調整:添加3% NaCl可分離耐海鹽烴降解菌;降低pH至4.5、補充Cu2?則用于勘查酸性礦山廢水中的耐重金屬菌。其芽孢可耐沸水煮15分鐘、紫外照射兩小時,噴霧干燥存活率超過90%,為大規(guī)模制劑化提供了便利。

高島氏膠珊瑚菌(Holtermanniella takashimae)是近年來備受關注的珍稀膠質菌,隸屬于銀耳目,因日本學者高島首先分離而得名。它通體晶瑩剔透,狀若海底珊瑚,色澤由純白到淡黃,質地柔軟富有彈性,曬干后收縮成輕薄菌片,復水即恢復原有形態(tài)。該菌多生長在海拔500至1500米、濕潤涼爽的常綠闊葉林中,常與殼斗科植物形成淺層菌根,對酸性土壤和空氣潔凈度要求極高,故又被視為森林健康的指示物種。成分分析顯示,高島氏膠珊瑚菌的粗蛋白含量可達干重的55%,氨基酸組成均衡,富含賴氨酸、蘇氨酸等人體必需氨基酸;其特有的大分子β-葡聚糖與酸性雜多糖具有明顯的免疫啟動與抗氧化活性,能明顯提升實驗動物巨噬細胞的吞噬能力,對自由基DPPH的率高于常見銀耳20%以上。此外,菌體中鈣、鐵、鋅等微量元素及維生素B1、B2、D前體含量亦居食用菌前列,為開發(fā)天然營養(yǎng)補充劑提供了質量原料。在傳統(tǒng)食用方式上,高島氏膠珊瑚菌以清燉、冰糖羹、菌菇火鍋更為常見。其膠質豐厚,久煮不爛,口感滑潤,可吸附湯汁精華,入口帶淡淡堅果香。現(xiàn)代食品科技則將其超微粉添加到面包、酸奶或植物飲料中,既提升膳食纖維含量,又賦予產品獨特爽滑口感??茖W家還在其基因組里插入耐鹽基因,讓它在西北鹽堿地也能萌發(fā),為棄荒灘涂奪回糧田。漿孢毛霉
科學家把Cry基因導入棉花、水稻,培育的Bt作物畢生自帶抗蟲盾,減少農藥噴灑七成以上 。歧皺青霉
無機磷細菌培養(yǎng)基(不含瓊脂)是專為“溶磷菌”篩選與活性測定設計的合成液體培養(yǎng)基。其配方精髓在于“難溶磷”:磷酸三鈣〔Ca?(PO?)?〕以懸浮顆粒形式存在,不提供任何磷;葡萄糖或甘露醇擔任碳源,硫酸銨為氮源,并輔以Mg2?、K?、微量元素及磷酸鹽緩沖液,pH穩(wěn)定在6.8–7.2。唯有能分泌有機酸、質子或磷酸酶的細菌,方可將不溶性磷轉化為可溶PO?3?,供自身同化并釋放到液相中,使原本乳白的懸濁液逐漸澄清,上清有效磷濃度上升,實現(xiàn)“溶磷”可視化與可量化。實驗流程簡潔高效:250 mL三角瓶裝50 mL培養(yǎng)液,接入土壤或根際稀釋液,28℃、170 r/min振蕩培養(yǎng)5–7天;每24 h取樣離心,鉬銻抗比色法測定鉬藍吸光度,繪制“溶磷-時間”曲線。高效菌株72 h內上清磷濃度可突破200 mg·L?1,pH降至4.5以下,溶磷率與酸度呈明顯負相關。若需高通量比較,可改用96深孔板,同步測定OD???與可溶性磷,計算單位生物量溶磷效率,快速鎖定優(yōu)良菌株。質量控制要點:滅菌后磷酸三鈣易沉降,使用前需渦旋或磁力攪拌重懸;背景可溶磷須低于0.5 mg·L?1,避免假陽性。儲存過程若出現(xiàn)絮凝,多為鈣-蛋白復合物,可超聲打散,不影響活性。歧皺青霉