結(jié)核分枝桿菌的培養(yǎng)特性有何特殊性？常用哪種培養(yǎng)基培養(yǎng)？

舉報(bào)

南京樂診生物技術(shù)有限公司2026-01-01

結(jié)核分枝桿菌是引起結(jié)核病的致病菌，其培養(yǎng)特性具有特殊性，主要體現(xiàn)在營養(yǎng)要求高、生長速度慢、抗酸染色陽性等方面。首先，營養(yǎng)要求極高，結(jié)核分枝桿菌是專性需氧菌，且需要豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，普通培養(yǎng)基（如LB培養(yǎng)基）上無法生長，必須添加血液、血清、卵黃、甘油等營養(yǎng)成分才能生長，其中甘油能為其提供碳源和能量，卵黃能提供脂質(zhì)和生長因子，滿足其生長需求。其次，生長速度極慢，結(jié)核分枝桿菌的代時(shí)（繁殖一代所需時(shí)間）長達(dá)18-24小時(shí)，而普通細(xì)菌（如大腸桿菌）的代時(shí)為20-30分鐘，因此在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)后，通常需要2-4周才能形成可見的菌落，這也是結(jié)核病檢測周期較長的重要原因。再次，菌落形態(tài)特殊，在適宜培養(yǎng)基上生長的菌落呈圓形、凸起、表面粗糙、干燥、不透明狀，顏色為乳白色或淡黃色，如同菜花狀，用接種針挑取時(shí)，菌落質(zhì)地較硬，不易破碎。此外，結(jié)核分枝桿菌具有抗酸性，能抵抗鹽酸酒精的脫色作用，經(jīng)抗酸染色后呈紅色，這一特性可用于初步鑒別。常用的培養(yǎng)結(jié)核分枝桿菌的培養(yǎng)基是羅氏培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基是一種固體培養(yǎng)基，其主要成分包括蛋黃、甘油、馬鈴薯、天門冬素、孔雀綠等。其中，蛋黃和甘油提供豐富的營養(yǎng)和能量，馬鈴薯和天門冬素提供氮源和生長因子，孔雀綠作為抑制劑，能抑制標(biāo)本中的雜菌（如大腸桿菌、葡萄球菌）生長，同時(shí)不影響結(jié)核分枝桿菌的生長。羅氏培養(yǎng)基的制備需經(jīng)過滅菌、分裝、凝固等步驟，接種標(biāo)本后，置于37℃、5%-10%二氧化碳環(huán)境下培養(yǎng)2-4周，觀察菌落形態(tài)，結(jié)合抗酸染色結(jié)果，可初步確診結(jié)核分枝桿菌。此外，液體培養(yǎng)基（如Middlebrook 7H9培養(yǎng)基）也可用于結(jié)核分枝桿菌的培養(yǎng)，其生長速度略快于固體培養(yǎng)基，且便于大規(guī)模培養(yǎng)和藥物敏感性試驗(yàn)。