南京樂診生物技術(shù)有限公司2026-01-02
霍亂弧菌(包括O1群、O139群)是引發(fā)霍亂的烈性腸道致病菌,其鑒別需結(jié)合選擇性培養(yǎng)基(抑制雜菌)和鑒別培養(yǎng)基(確認(rèn)特征),指示劑為亞甲藍(lán)、霍亂紅試劑,關(guān)鍵特征是發(fā)酵蔗糖、產(chǎn)生霍亂紅反應(yīng)。常用培養(yǎng)基及鑒別細(xì)節(jié)如下:一是TCBS培養(yǎng)基(硫代硫酸鹽-檸檬酸鹽-膽鹽-蔗糖培養(yǎng)基,選擇性+鑒別培養(yǎng)基),成分及作用:抑制劑為膽鹽、檸檬酸鹽、硫代硫酸鹽(抑制革蘭氏陽性菌和大多數(shù)革蘭氏陰性雜菌,如大腸桿菌);碳源為蔗糖(20g/L,高濃度蔗糖適配霍亂弧菌的發(fā)酵特性);指示劑為亞甲藍(lán)(堿性染料,輔助顯色)。霍亂弧菌可發(fā)酵蔗糖產(chǎn)生大量酸,使培養(yǎng)基pH下降,亞甲藍(lán)顏色發(fā)生改變,因此菌落呈黃色、圓形、光滑、邊緣整齊,周圍培養(yǎng)基也變?yōu)辄S色;而不發(fā)酵蔗糖的雜菌(如沙門氏菌)菌落呈綠色或藍(lán)色,實(shí)現(xiàn)快速篩選。二是堿性蛋白胨水(APW,選擇性增菌培養(yǎng)基),無特定指示劑,特點(diǎn)是pH高達(dá)8.4-9.2(堿性環(huán)境),可抑制雜菌生長,同時(shí)促進(jìn)霍亂弧菌生長繁殖(霍亂弧菌耐堿性強(qiáng)),用于樣本的增菌(如糞便樣本接種后培養(yǎng)6-8小時(shí),霍亂弧菌可大量增殖)。三是霍亂紅試驗(yàn)培養(yǎng)基(蛋白胨水培養(yǎng)基+硝酸鉀),指示劑為霍亂紅試劑(對二甲氨基苯甲醛)。霍亂弧菌可分解蛋白胨中的色氨酸產(chǎn)生吲哚,同時(shí)還原硝酸鉀為亞硝酸鹽,加入霍亂紅試劑后,吲哚與亞硝酸鹽在酸性條件下結(jié)合形成紅色化合物,為霍亂紅試驗(yàn)陽性;而其他腸道菌(如大腸桿菌)雖產(chǎn)吲哚,但不還原硝酸鉀,試驗(yàn)為陰性。此外,霍亂弧菌在血瓊脂培養(yǎng)基上可形成β-溶血環(huán)(部分菌株),進(jìn)一步輔助鑒別。TCBS培養(yǎng)基的黃色菌落特征和霍亂紅試驗(yàn)陽性,是霍亂弧菌鑒別的依據(jù),結(jié)合血清學(xué)試驗(yàn)(檢測O1或O139抗原),可實(shí)現(xiàn)精細(xì)鑒定,為霍亂的快速診斷和控制提供關(guān)鍵支持。
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