結(jié)核分枝桿菌與非結(jié)核分枝桿菌如何通過培養(yǎng)基進行鑒別？

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南京樂診生物技術(shù)有限公司2026-01-02

結(jié)核分枝桿菌與非結(jié)核分枝桿菌（如鳥分枝桿菌、堪薩斯分枝桿菌）均為抗酸陽性菌，形態(tài)相似，需通過選擇性培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基，結(jié)合指示劑（孔雀綠）和營養(yǎng)需求差異進行鑒別，原理是利用兩者對抑制劑的敏感性和代謝特性不同。常用培養(yǎng)基及鑒別細節(jié)：一是羅氏培養(yǎng)基（基礎(chǔ)鑒別），成分含雞蛋黃、甘油、孔雀綠（指示劑+抑制劑），pH6.8-7.2。結(jié)核分枝桿菌在其上生長緩慢（2-4周），形成乳白色、粗糙、菜花狀菌落，孔雀綠抑制雜菌生長，同時使菌落在綠色背景下更易觀察；非結(jié)核分枝桿菌（如鳥分枝桿菌）生長速度略快（1-2周），菌落形態(tài)更光滑，部分呈黃色。二是Middlebrook 7H10培養(yǎng)基（選擇性+鑒別培養(yǎng)基），含白蛋白、葡萄糖、甘油，添加孔雀綠（抑制劑）和萘啶酸（抑制細菌雜菌）。鑒別：添加不同碳源和氮源，結(jié)核分枝桿菌可利用甘油作為碳源，不能利用酸鹽；鳥分枝桿菌可利用酸鹽，不能利用甘油，通過生長情況區(qū)分；培養(yǎng)基中添加酚紅作為指示劑，結(jié)核分枝桿菌利用甘油產(chǎn)酸，酚紅變黃；鳥分枝桿菌利用酸鹽產(chǎn)酸，同樣變黃，但結(jié)合碳源利用情況可精細鑒別。三是煙酸試驗培養(yǎng)基（鑒別培養(yǎng)基），含蛋白胨、葡萄糖，指示劑為對二甲氨基苯甲醛。結(jié)核分枝桿菌產(chǎn)生煙酸（代謝產(chǎn)物），加入指示劑后呈紅色（陽性）；非結(jié)核分枝桿菌（如鳥分枝桿菌）不產(chǎn)生煙酸（陰性），鑒別特征之一。四是硝酸鹽還原試驗培養(yǎng)基，含硝酸鉀，指示劑為二苯胺試劑。結(jié)核分枝桿菌可還原硝酸鹽為亞硝酸鹽，加入試劑后呈藍色（陽性）；部分非結(jié)核分枝桿菌（如堪薩斯分枝桿菌）還原能力弱或無，呈陰性。指示劑及作用：孔雀綠（抑制雜菌+背景顯色）、酚紅（指示產(chǎn)酸，反映碳源利用）、對二甲氨基苯甲醛（指示煙酸產(chǎn)生），通過多指標聯(lián)合判斷，實現(xiàn)結(jié)核與非結(jié)核分枝桿菌的精細鑒別。這對結(jié)核病的臨床診斷（避免誤診）和治療方案制定（不同分枝桿菌耐藥性不同）具有重要意義。