抑肽酶（Aprotinin），一種絲氨酸蛋白酶抑制劑，廣泛應(yīng)用于生物技術(shù)領(lǐng)域。本研究探討了利用大腸桿菌（E. coli）表達(dá)系統(tǒng)生產(chǎn)重組抑肽酶的方法，及其在科研和工業(yè)生產(chǎn)中的優(yōu)勢(shì)。引言抑肽酶，又稱胰蛋白酶抑制劑，是一種小分子蛋白，能有效抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶等絲氨酸蛋白酶的活性。在生物制藥、細(xì)胞培養(yǎng)和分子生物學(xué)研究中，抑肽酶的使用對(duì)于防止非特異性蛋白水解至關(guān)重要。傳統(tǒng)的抑肽酶主要來(lái)源于動(dòng)物，如牛肺，但存在外源病毒污染的風(fēng)險(xiǎn)。因此，利用大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)進(jìn)行重組抑肽酶的生產(chǎn)，可以提供一種無(wú)動(dòng)物源、高純度、質(zhì)量穩(wěn)定的替代品。材料與方法基因克隆與表達(dá)載體構(gòu)建：人源Ⅲ型膠原蛋白基因被克隆并構(gòu)建到適合大腸桿菌表達(dá)的質(zhì)粒載體中。大腸桿菌表達(dá)菌株的構(gòu)建：通過(guò)轉(zhuǎn)化，將構(gòu)建好的質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌宿主菌中，構(gòu)建表達(dá)菌株。發(fā)酵培養(yǎng)：利用發(fā)酵罐進(jìn)行大腸桿菌的擴(kuò)大培養(yǎng)，以提升重組抑肽酶的產(chǎn)量。蛋白純化：通過(guò)多次柱純化獲得高純度的重組抑肽酶。透明質(zhì)酸由D-葡萄糖醛酸及N-乙酰葡糖胺組成的雙糖單位構(gòu)成，分子量可以從數(shù)千到數(shù)千萬(wàn)道爾頓不等。Recombinant Human BST2 Protein,hFc Tag

IdeSProtease全稱免疫球蛋白G降解酶，酶活（Enzymeactivity）40U/μL酶活定義（UnitDefinition）在37℃條件下，反應(yīng)30min，剪切＞95%的1μg重組單克隆IgG所需要的酶量定義為一個(gè)活性單位。儲(chǔ)存條件-25~-15℃保存，有效期1年。使用方法1.在消化液中加入適量IgG(加至5mg)；2.在IgG樣本中加入IdeS蛋白酶（每1μgIgG加入1個(gè)單位的IdeS）；3.將樣品置于37℃孵育30-60min。IdeS蛋白酶在中性pH或接近中性pH的緩沖中活性強(qiáng)。推薦反應(yīng)緩沖是50mM磷酸鈉，150mMNaCl（pH6.6），多數(shù)常見(jiàn)的生物緩沖也適用，比如Tris或PBS；注意：不在此pH范圍（例如乙酸鹽緩沖液）的緩沖也可能適用，但是孵育時(shí)間或酶量需要根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行優(yōu)化。注意事項(xiàng)1.IdeS不能識(shí)別切割小鼠IgG1/IgG2b,大鼠、豬、牛和山羊IgG，對(duì)小鼠IgG2a和IgG3具有中等酶切活性，酶切小鼠IgG2a和IgG3建議增加IdeS的用量（推薦用量為正常用量的5-10倍）。2.IdeS不能切割非IgG亞型的單抗分子，包括IgA、IgM、IgD和IgE。Recombinant Human NGAL/Lipocalin-2 Protein,hFc Tag全長(zhǎng)跨膜蛋白CB1，即受體1（Cannabinoid Receptor 1），是一種G蛋白偶聯(lián)受體（GPCR）。

分子特性：牛凝血酶的分子特性符合高比活度酶的標(biāo)準(zhǔn)，純度達(dá)到SDS-PAGE電泳無(wú)雜蛋白條帶的要求。穩(wěn)定性：牛凝血酶在室溫下運(yùn)輸穩(wěn)定，在2~8℃條件下可保存3年而酶活力未有變化。應(yīng)用效果：在1:2000的質(zhì)量比下，牛凝血酶能有效切割蛋白，適用于科研和工業(yè)生產(chǎn)中的重組融合蛋白特異性斷裂。討論科研應(yīng)用：牛凝血酶因其高比活度和專一性，在分子生物學(xué)、生物化學(xué)和生物工程制藥研究中作為工具酶具有重要價(jià)值。臨床：作為止血藥物，牛凝血酶在外科手術(shù)中的應(yīng)用超過(guò)100年，因其簡(jiǎn)便和高效而受到青睞6。生產(chǎn)優(yōu)勢(shì)：牛凝血酶的生產(chǎn)穩(wěn)定性好，純度高，不含有其他蛋白酶活性，適合大規(guī)模生產(chǎn)和應(yīng)用。

Cas9核酸酶是一種引導(dǎo)RNA引導(dǎo)的核酸內(nèi)切酶，可以催化雙鏈DNA的裂解。這種靶向核酸酶是一種高精度的基因組編輯的有力工具。Cas9蛋白與CRISPR/Cas9系統(tǒng)的引導(dǎo)RNA（gRNA）成分形成一個(gè)非常穩(wěn)定的核糖白（RNP）復(fù)合物。Cas9RNP復(fù)合物可以在進(jìn)入細(xì)胞后，通過(guò)添加一個(gè)N端核定位信號(hào)（NLS），增加入核效率。YEASEN開發(fā)的NLS-Cas9核酸酶在蛋白的N端包含一個(gè)核定位序列（NLS），以增加入核切割效率。產(chǎn)品特點(diǎn)如下：無(wú)DNA：沒(méi)有外部DNA添加。安全性好：野生型Cas9蛋白，無(wú)標(biāo)簽?？蓱?yīng)用于：通過(guò)體外DNA切割篩選高效和特異性靶向gRNA。產(chǎn)品信息貨號(hào)11366ES60/11366ES76規(guī)格100μg/500μg來(lái)源重組Cas9來(lái)源于大腸桿菌物種化膿性鏈球菌標(biāo)簽無(wú)分子量160KDa濃度10mg/mL（50μg）；10mg/mL（100μg）在蛋白質(zhì)表達(dá)體系中，腸激酶常用于切割融合標(biāo)簽，從而釋放出目的蛋白，特別是在pET表達(dá)系統(tǒng)中。

RecombinantBiotinylatedHumanKIR2DL1Protein,His-AviTag性能參數(shù)分子別名（Synonyms）CD158A;CD158Ankat1;cl-42表達(dá)區(qū)間及表達(dá)系統(tǒng)（Source）BiotinylatedHumanKIR2DL1ProteinisexpressedfromHEK293withHistagandAvitagattheC-Terminus.ItcontainsHis22-Arg242.[Accession|P43626]分子量大?。∕olecularWeight）TheproteinhasapredictedMWof27.1kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto48-60kDabasedonSDS-PAGEresult.（Endotoxin）Lessthan1EUperμgbytheLALmethod.純度（Purity）>95%asdeterminedbySDS-PAGEandHPLC.制劑（Formulation）Lyophilizedfrom0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).Normally8%trehaloseisaddedasprotectantbeforelyophilization.重構(gòu)方法（Reconstitution）Centrifugethetubebeforeopening.Reconstitutingtoaconcentrationmorethan100μg/mlisrecommended.Dissolvethelyophilizedproteinindistilledwater.跨膜蛋白在宿主細(xì)胞中的表達(dá)水平通常有點(diǎn)低，研發(fā)困難，對(duì)蛋白表達(dá)生產(chǎn)平臺(tái)技術(shù)要求極高。Dynorphin A(1-13),porcine

跨膜蛋白的表達(dá)與制備需要采用合適的表達(dá)載體、宿主細(xì)胞、培養(yǎng)條件和純化工藝等方法，優(yōu)化表達(dá)和純化過(guò)程。Recombinant Human BST2 Protein,hFc Tag

產(chǎn)品簡(jiǎn)介凝血酶是由大小分別為31KD和6KD的兩條肽鏈通過(guò)二硫鍵組成的一種絲氨酸蛋白水解酶，可從動(dòng)物血漿中利用已凝血酶原水解制得，可催化纖維蛋白原（fibrinogen）水解釋放A肽和B肽，由此形成纖維蛋白單體，單體進(jìn)一步聚合，在血小板、紅細(xì)胞和白細(xì)胞等參與下形成血凝塊，常用于診斷學(xué)中凝血化驗(yàn)、凝血因子檢測(cè)、血液或血漿的脫纖維化等；另外，由于凝血酶切割序列專一，水解效率高，因此在分子生物學(xué)、生物化學(xué)或生物工程制藥研究中也常作為工具酶用于重組融合蛋白（包含凝血酶識(shí)別位點(diǎn)）的特異性斷裂。本品是從牛的血漿純化制得，具有純度高、比活高、不含有其他蛋白酶活性、滅活病毒、生產(chǎn)穩(wěn)定性好等特點(diǎn)。該酶適切割位點(diǎn)：A-B-Pro-Arg-▼-X-Y（其中，A和B為疏水氨基酸，X和Y為非酸性氨基酸），常見(jiàn)的識(shí)別序列為：1.Leu-Val-Pro-Arg-▼-Gly-Ser。2.Gly-Arg-▼-Gly。產(chǎn)品信息規(guī)格1KU/2KURecombinant Human BST2 Protein,hFc Tag