實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)是一種以特異性致敏的CD4+T細(xì)胞介導(dǎo)為主的,以***系統(tǒng)內(nèi)小血管周圍出現(xiàn)單個(gè)核細(xì)胞浸潤(rùn)及髓鞘脫失為特征的自身免疫性疾病,是人類多發(fā)性硬化(MS)的理想動(dòng)物模型,在臨床神經(jīng)免疫學(xué)的研究中具有重要意義。抗原佐劑為非特異性免疫增強(qiáng)劑,它可改變抗原的物理性狀,延長(zhǎng)抗原在體內(nèi)的儲(chǔ)留時(shí)間,刺激抗原提呈細(xì)胞及淋巴細(xì)胞,從而增強(qiáng)和擴(kuò)大免疫應(yīng)答效果,它還能引起遲發(fā)性血腦屏障通透性增加和自身免疫反應(yīng)。PLP也是常用建立EAE模型的髓鞘抗原,模型呈現(xiàn)緩解-復(fù)發(fā)的特點(diǎn),多用來(lái)建立復(fù)發(fā)-緩解型EAE模型。海南小鼠eae模型實(shí)驗(yàn)外包

EAE模型是由針對(duì)CNS髓鞘發(fā)生免疫攻擊的CD4+Th1細(xì)胞介導(dǎo)的自身免疫性疾病,抗原致敏的T細(xì)胞穿過(guò)血腦屏障進(jìn)入中樞,誘發(fā)對(duì)自身髓鞘抗原的免疫應(yīng)答,導(dǎo)致腦及脊髓的免疫損傷。EAE是人類MS的經(jīng)典動(dòng)物模型,通過(guò)對(duì)EAE發(fā)病機(jī)制、病情發(fā)***展規(guī)律、臨床及病理改變、***及預(yù)防等方面的深入研究,能夠?yàn)镸S的***提供充分的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。詞條圖冊(cè)EAE發(fā)病有多種誘發(fā)因素,包括食物、藥物及***等。大鼠的飼養(yǎng)環(huán)境級(jí)別越高,清潔度越高,接觸誘發(fā)因素的幾率越小,在相同條件下致敏,其發(fā)病率就越低,因此選用普通動(dòng)物即可。**近有報(bào)道說(shuō)明,EAE的發(fā)病還與動(dòng)物的血腦屏障的形成有關(guān)。內(nèi)蒙古真實(shí)的eae模型動(dòng)物實(shí)驗(yàn)外包如何制作EAE小鼠模型?

多發(fā)性硬化(Multiple sclerosis,MS)是一種病因不明的主要累及***系統(tǒng)蛋白質(zhì)的慢性炎性脫髓鞘疾病。其病理特征是血管周圍炎***變,髓鞘破壞,星型細(xì)胞增值,少突膠質(zhì)細(xì)胞和軸索缺失。實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎(Experimental autoimmune encephakmyelitis EAE)是目前國(guó)際公認(rèn)的研究MS的動(dòng)物模型,比較常用的致敏原多為腦或脊髓組織勻漿、髓鞘蛋白成分或其多肽片段等。由于髓鞘少突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白(Myelin oligodendrocyte glycoprotein,MOG)存在于髓鞘和少突膠質(zhì)細(xì)胞的比較外層,具有高度免疫原性,MOG和抗MOG抗體在MS的發(fā)病過(guò)程中起重要作用,用MOG誘導(dǎo)的EAE可以作為研究MS的理想模型。
比較不同的神經(jīng)功能損傷評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)對(duì)小鼠實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)運(yùn)動(dòng)功能障礙評(píng)估的效能。方法:應(yīng)用MOG35-55多肽加完全福氏佐劑乳化后免疫20只C57BL/6小鼠,復(fù)制EAE小鼠模型,并使用3種不同的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)(Kono's5分法、Hooper's7分法、Weaver's15分法)觀察和評(píng)估實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的發(fā)病情況,對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠在發(fā)病初期、高峰期的神經(jīng)功能障礙進(jìn)行定量的功能損傷評(píng)價(jià)。結(jié)果:3種評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)比較,在發(fā)病初期,15分法和7分法評(píng)估神經(jīng)損傷癥狀的敏感性相當(dāng),比5分法高;高峰期,以癥狀評(píng)分與病理評(píng)分的相關(guān)性程度來(lái)比較3種評(píng)分法的效度,15分法效度比較高,7分法次之。結(jié)論:Weaver's15分法評(píng)價(jià)EAE模型神經(jīng)功能損傷癥狀,具有明顯的優(yōu)勢(shì),推薦作為今后EAE研究的優(yōu)先評(píng)分法。與對(duì)照組相比,EAE模型組小鼠脊髓中活化的小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量增多。

科學(xué)家們可以通過(guò)精細(xì)調(diào)控EAE動(dòng)物模型的免疫反應(yīng),深入研究免疫療法在多發(fā)性硬化癥(MS)療愈中的潛在應(yīng)用。在EAE動(dòng)物模型中,科學(xué)家們可以模擬MS患者體內(nèi)免疫系統(tǒng)的異常反應(yīng),通過(guò)調(diào)控免疫細(xì)胞的活性、數(shù)量和功能,觀察其對(duì)疾病進(jìn)程的影響。這一過(guò)程不僅有助于揭示MS發(fā)病過(guò)程中免疫系統(tǒng)的關(guān)鍵作用,還能為開發(fā)新的免疫療法提供重要的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。通過(guò)調(diào)控EAE動(dòng)物模型的免疫反應(yīng),科學(xué)家們可以測(cè)試不同免疫療法的效果,評(píng)估其對(duì)MS的療愈效果以及可能產(chǎn)生的副作用,從而為MS的臨床療愈提供更加安全和有效的方案。因此,調(diào)控EAE動(dòng)物模型的免疫反應(yīng)是研究免疫療法在MS療愈中應(yīng)用的重要手段,對(duì)于推動(dòng)MS的療愈進(jìn)展具有重要意義。EAE模型的神經(jīng)癥狀通常根據(jù)Kono等提出的標(biāo)準(zhǔn)分為5級(jí)。湖北哪里有eae模型造模方法
EAE模型的發(fā)生與年齡密切相關(guān)。海南小鼠eae模型實(shí)驗(yàn)外包
獲取實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)模型小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞,并檢測(cè)其特性。方法取8周齡,雌性C57BL/6小鼠行EAE造模,待至發(fā)病高峰期(第15天)時(shí)以PBS灌注后取小鼠后腦和脊髓,切碎后加胰酶消化,消化完成后通過(guò)100μm濾網(wǎng)濾過(guò),而后采用Percoll密度梯度離心法分離獲取單個(gè)核細(xì)胞,進(jìn)一步利用CD11b與CD45抗體染色,通過(guò)流式細(xì)胞儀分選CD11b~+CD45~(high)和CD11b~+CD45~(low)細(xì)胞,即分別得到相對(duì)活化和靜息的小膠質(zhì)細(xì)胞,***對(duì)流式分選獲取的小膠質(zhì)細(xì)胞行qPCR檢測(cè)。結(jié)果通過(guò)形態(tài)比較,獲得了高純度的小膠質(zhì)細(xì)胞。FIZZ-1基因行qPCR檢測(cè),結(jié)果顯示在EAE急性期M2型小膠質(zhì)細(xì)胞明顯增多,符合文獻(xiàn)報(bào)道。結(jié)論該方法能從EAE小鼠體內(nèi)分離獲取高純度的小膠質(zhì)細(xì)胞,可用于相關(guān)目的基因后續(xù)檢測(cè)。海南小鼠eae模型實(shí)驗(yàn)外包