鏈球菌的 Lancefield 分型需用到哪些培養(yǎng)基和試劑？

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南京樂診生物技術(shù)有限公司2026-01-02

鏈球菌的 Lancefield 分型（基于細(xì)胞壁多糖抗原分型）是鏈球菌分類的重要方法，需用到血瓊脂培養(yǎng)基（增菌）、生理鹽水（制備菌懸液）、特異性抗血清（分型試劑），原理是抗原抗體特異性結(jié)合，無需額外化學(xué)指示劑，通過凝集現(xiàn)象判斷結(jié)果。具體操作及原理：首先將待檢鏈球菌接種于血瓊脂培養(yǎng)基（含5%羊血），37℃、5%CO?培養(yǎng)18-24小時(shí)，獲得純培養(yǎng)菌落（血瓊脂培養(yǎng)基可提供充足營(yíng)養(yǎng)，同時(shí)通過溶血現(xiàn)象初步判斷鏈球菌類型，如β-溶血的A族鏈球菌）。隨后制備菌懸液：取純菌落溶于生理鹽水，制成均勻渾濁的菌懸液（濃度約10?CFU/mL）。分型步驟：在載玻片上滴加菌懸液，再加入對(duì)應(yīng)型別的特異性抗血清（如A族、B族、C族抗血清），輕輕震蕩混合，室溫放置2-5分鐘，觀察是否出現(xiàn)凝集現(xiàn)象（菌懸液由渾濁變?yōu)槌吻?，出現(xiàn)肉眼可見的凝集顆粒），出現(xiàn)凝集為陽(yáng)性，表明菌株含對(duì)應(yīng)型別的多糖抗原；無凝集為陰性。雖無需化學(xué)指示劑，但血瓊脂培養(yǎng)基的溶血現(xiàn)象可輔助預(yù)判分型方向：如A族鏈球菌多為β-溶血，B族鏈球菌（無乳鏈球菌）多為β-溶血或無溶血，D族鏈球菌多為α-溶血或無溶血。此外，為排除非特異性凝集，需設(shè)置陰性對(duì)照（菌懸液+生理鹽水，無凝集）和陽(yáng)性對(duì)照（已知型別菌株+對(duì)應(yīng)抗血清，有凝集）。Lancefield 分型的是抗原抗體反應(yīng)的特異性，血瓊脂培養(yǎng)基的作用是獲得高純度菌株，確保分型結(jié)果準(zhǔn)確，該方法可將鏈球菌分為A-H、K-V等20余個(gè)血清型，其中A族鏈球菌（如化膿性鏈球菌）和B族鏈球菌（如無乳鏈球菌）是主要致病菌，其精細(xì)分型對(duì)臨床病因診斷和治療方案制定具有重要意義。