菌株傳代不超過(guò) 5 次的科學(xué)依據(jù)是什么？傳代過(guò)程中需采取哪些

南京樂(lè)診生物技術(shù)有限公司2025-09-10

菌株傳代不超過(guò) 5 次，主要基于微生物遺傳穩(wěn)定性及表型一致性的考量。微生物在連續(xù)傳代過(guò)程中，會(huì)因基因突變、質(zhì)粒丟失、基因表達(dá)調(diào)控改變等因素，導(dǎo)致原有生物學(xué)特性發(fā)生變化，如發(fā)酵能力減弱、耐藥性改變、毒力下降等。以標(biāo)準(zhǔn)菌株金黃色葡萄球菌為例，超過(guò) 5 次傳代后，其產(chǎn)生凝固酶的能力可能下降，影響微生物鑒定結(jié)果的準(zhǔn)確性。同時(shí)，傳代次數(shù)過(guò)多還會(huì)增加雜菌污染風(fēng)險(xiǎn)，一旦引入雜菌，可能導(dǎo)致菌株純度降低，進(jìn)一步破壞菌株的標(biāo)準(zhǔn)化特性。為保障菌株穩(wěn)定，傳代時(shí)需嚴(yán)格遵循無(wú)菌操作規(guī)范，在 A 級(jí)潔凈工作臺(tái)進(jìn)行操作，接種工具需經(jīng)灼燒滅菌并冷卻后使用。每次傳代后需及時(shí)觀察菌株生長(zhǎng)形態(tài)、生化反應(yīng)等特征，與原始菌株比對(duì)確認(rèn)無(wú)差異。此外，需采用適宜的保存方式，初代菌株應(yīng)冷凍保存于 - 80℃環(huán)境，添加 15% 甘油作為保護(hù)劑，每次傳代從冷凍保存的原始菌株中復(fù)蘇，避免從傳代菌株中連續(xù)轉(zhuǎn)接，很大程度降低遺傳變異風(fēng)險(xiǎn)。

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