HE染色注意事項：1、染色時調(diào)節(jié)pH值很重要。如果組織塊在福爾馬林中固定時間長，組織酸化而影響細胞核著色。因此，要在自來水中沖洗時間長一些或在飽和碳酸鋰水溶液中處理10-30min，這樣可以使細胞核著色較深。染伊紅時胞漿著色不佳，可在伊紅溶液中滴加1-2滴冰醋酸。2、切片染蘇木精后，分色這一步是關(guān)鍵，應(yīng)在顯微鏡下控制進行，一般以細胞核染色清楚（晰）而細胞質(zhì)基本無色為佳。如果過分延長分色時間將導致染色太淺，應(yīng)重新染色后再行分色。3、切片經(jīng)酒精脫水后，入二甲苯時可出現(xiàn)白色不透明狀態(tài)，此為脫水不徹底，應(yīng)將切片退回無水酒精，更換酒精、二甲苯，以求徹底脫水與透明。4、在染色過程中不要讓切片干燥，以免切片收縮、變形，影響神經(jīng)元形態(tài)。5、切片從二甲苯取出或進入二甲苯前，切片周邊均應(yīng)擦干凈或吸干多余水分。6、***封固時，要用中性樹脂，防止日后褪色，蓋片要選大于組織塊的面積，如漏出一部分不久將會褪色，所用樹脂濃度要適當，樹脂封固時不能有氣泡。HE染色小攻略技巧分析。貴州結(jié)果客觀的HE染色價格
HE染色主要是為通細胞及胞核形態(tài)、大小來區(qū)別各種細胞的，并不是直接通過顏色來區(qū)分的，HE染色細胞壞死的三種改變：（1）細胞核的改變：這是細胞壞死的主要形態(tài)標志，表現(xiàn)為核濃縮，核碎裂，核溶解。（2）細胞質(zhì)的改變：由于胞質(zhì)發(fā)生凝固或溶解，HE染色呈深紅色顆粒狀，如肝細胞壞死出現(xiàn)的嗜酸性小體醫(yī)學|教育網(wǎng)搜集整理。（3）間質(zhì)的改變：由于各種溶解酶的作用，基質(zhì)崩解、膠原纖維腫脹、斷裂或液化，與壞死的細胞融合成一片，呈紅染的顆粒狀無結(jié)構(gòu)物質(zhì)。南京英瀚斯生物江蘇結(jié)果客觀的HE染色分析HE染色 ,石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一。
HE染色脫蠟不凈的原因及驗證方法：1)二甲苯使用過久，含蠟成分太高或脫蠟效果差：可更換二甲苯驗證。2)切片經(jīng)烤片，冷卻后放入二甲苯脫蠟或室溫太低；延長拖拉時間或用熱的切片脫蠟驗證。3)脫蠟時間太短或振蕩太少，幅度太??；可延長脫蠟時間或以多振蕩來驗證。4)洗滌二甲苯用的乙醇使用時間過久，導致乙醇中二甲苯含量過高，二甲苯殘留在切片上（由于二甲苯與水不相溶，切片上有二甲苯的地方，蘇木精就沒有辦法滲透進去，在切片染色完成后留下了點狀的不著**域）：更換各道乙醇驗證。5)二甲苯、乙醇質(zhì)量不佳（偶有試劑瓶內(nèi)裝的試劑與試劑名不相符）：換批號驗證。6)更換脫蠟液體時試劑拿錯：需重新配置驗證。7)更換脫蠟液體時試劑次序放錯：需重新配置驗證。8)烤片時間短，切片上水分沒有烤干，也會導致著色不勻，出現(xiàn)點狀發(fā)白區(qū)域。
HE染色注意事項：1．組織切片的脫蠟步驟應(yīng)徹底，否則無論進行那種染色都會發(fā)生困難。脫蠟時間要充分，若溶蠟劑使用過久應(yīng)及時更換以免效率降低，若室溫過低，可將溶蠟劑置于溫箱中進行脫蠟。 2．蘇木素染液使用一段時間后表面易出現(xiàn)亮晶狀飄浮物，這可能是液體表面的過氧化物，必須過濾除去，以防沉渣污染組織切片。蘇木素液一般染過三、四百張切片后，著色力會減弱，著色不鮮艷，呈灰藍色時應(yīng)及時更換新液。 3．染色的時間長短需依據(jù)：染劑對組織的染色作用，室溫條件，切片厚薄，固定液的類別，染液的新舊而進行調(diào)節(jié)。所以在染色時必須使用顯微鏡觀察染色程度以利掌握時間。 4．分化十分重要。分化步驟的準確也是染色成敗的關(guān)鍵，若分化失當則必然引起染色不勻或過淡，過深等現(xiàn)象，因此分化后一定要鏡檢，觀察胞核是否清晰，胞漿呈淡白色。否則需再次分化，不然一旦復染后，組織會呈紫藍色即“藍蓋紅”現(xiàn)象。 5．還原液不宜過濃，若堿性太強易使組織脫落故以淡為宜。 6．伊紅宜淡染，復染過深胞核會不清晰，影響鏡檢。 HE染色切片知識以及如何做出漂亮的切片。
HE染色多聚甲醛保存組織的注意事項：多聚甲醛放置過久其中的醛基可能會被氧化為酸，使溶液pH降低，從而影響染色。不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同，應(yīng)當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。多聚甲醛雖然作用溫和，但能硬化組織，固定時間過久會導致組織變脆，切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過24小時。多聚甲醛可長期存在于固定過的細胞或組織樣品中，固定完成后用適當?shù)南礈煲夯蛩疀_洗數(shù)小時仍會有殘留，因此后續(xù)實驗結(jié)果如果受醛基影響，須盡量洗去殘留的多聚甲醛。醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或完全掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結(jié)果。因此，4%多聚甲醛固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進行修復，然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。什么是HE染色，HE染色實驗的目的。山西質(zhì)量好的HE染色報告
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HE染色反藍的原理：蘇木素染液，細胞核內(nèi)的染色質(zhì)主要是去氧核糖核酸（DNA）,DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中，兩條鏈上的磷酸基向外，帶負電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木素精堿性染料以離子或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍色，所以細胞核被染成藍色。 分化：蘇木素染色之后，用水洗去未結(jié)合在細胞上的染液，但是在細胞核中結(jié)合過多的染料和細胞漿中吸附的染料必須用分化液1%鹽酸酒精脫去，才能保證細胞核和細胞漿染色的分明，把這個過程稱為染色的分化作用。因酸能破壞蘇木素的醌型結(jié)構(gòu)，使色素與組織解離，分化不可過度。藍化：分化之后蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài)，在堿性條件下處于藍色離子狀態(tài)，而呈藍色，所以分化之后用水洗去酸而中止分化，再用弱堿性水使蘇木精染上的細胞核變呈藍色，稱藍化作用，一般多用自來水浸洗即可變藍，也可用溫水（50度溫水比較好）變藍。貴州結(jié)果客觀的HE染色價格
