質(zhì)量好的HE染色

HE染色觀察細胞凋亡，凋亡檢測中形態(tài)學方法是**直觀、可靠的方法之一。對組織和各種細胞進行染色后，在光學顯微鏡、熒光顯微鏡或電子顯微鏡下觀察，通過觀察細胞的形態(tài)或染色的類型來判斷凋亡的發(fā)生與否。細胞涂片或細胞甩片的制備：對于貼壁細胞，可將蓋玻片放于培養(yǎng)器皿中，讓培養(yǎng)細胞長于玻片上，然后用藥物誘導細胞凋亡后取出，用4%多聚甲醛固定5min。對于懸浮細胞，用藥物誘導細胞凋亡后，離心1000r/min收集細胞，用PBS洗2次，收集調(diào)整細胞數(shù)為1X105/ml，涂片或用離心甩片，用4%多聚甲醛固定5min；在光學顯微鏡下，貼壁細胞由原來的梭形或多角形變小、變圓，核呈藍色或藍黑色，胞漿呈淡紅色，核固縮、破碎，形成凋亡小體等。懸浮細胞，整個細胞皺縮，核固縮，破碎，形成凋亡小體，染色質(zhì)顏色加深等。HE染色的基本原理和結(jié)果分析。質(zhì)量好的HE染色

HE染色細胞核被蘇木精染成鮮明的藍色，軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍色，粘液呈灰藍色。細胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色，胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色，彈力纖維呈亮粉紅色，紅血球呈橘紅色，蛋白性液體呈粉紅色。著***況與組織或細胞的種類有關，也隨其生活周期及病理變化而改變。例如，細胞在新生時期胞漿對伊紅著色較淡或輕度嗜堿，當其衰老時或發(fā)生退行性變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染。膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變性時，伊紅著色由淺變深。陜西靠譜的HE染色外包腎臟組織HE染色如何觀察。

HE染色原理：易于被堿性或酸性染料著色的性質(zhì)稱為嗜堿性(basophilia)和嗜酸性(acidophilia)；而對堿性染料和酸性染料親和力都比較弱的現(xiàn)象稱為中性（neutrophilia)。構(gòu)成組織內(nèi)蛋白質(zhì)的氨基酸的種類很多，它們有不同的等電點。在普通染色法中，染色液的酸堿度為pH6左右，細胞內(nèi)的酸性物質(zhì)如細胞核的染色質(zhì)、腺細胞和神經(jīng)細胞內(nèi)的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及透明軟骨基質(zhì)等均被堿性染料染色，這些物質(zhì)稱為嗜堿性。而細胞質(zhì)中的其它蛋白質(zhì)如紅細胞中的血紅蛋白、嗜酸粒細胞的顆粒及膠原纖維和肌纖維等被酸性染料染色，這些物質(zhì)稱為嗜酸型。如果改變?nèi)旧旱乃釅A度，pH值升高時，則原來被酸性染料染色的物質(zhì)可變?yōu)槭葔A性；pH值降低時，原來被堿性染料染色的物質(zhì)則可變?yōu)槭人嵝?。所以說染色液的pH值可以影響染色的反應。脫氧核糖核酸（DNA）兩條鏈上的磷酸基向外，帶負電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍色，所以細胞核被染成藍色。

HE染色法的話，不能準確說出細胞器的顏色，實驗記錄或考試時只能說染色效果為 :細胞核藍色，胞質(zhì)、肌纖維、膠原纖維和紅細胞呈深淺不一的紅色。或者詳細說明如下:細胞核被蘇木精染成鮮明的藍色，軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍色，粘液呈灰藍色。細胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色，胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色，彈力纖維呈亮粉紅色，紅血球呈橘紅色，蛋白性液體呈粉紅色。蘇木精染液為堿性 ,主要使細胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍色 ；伊紅為酸性染料 ,主要使細胞質(zhì)和細胞外基質(zhì)中的成分著紅色。HE染色結(jié)果如果使用計算機分析軟件分析？

HE染色注意事項：1．組織切片的脫蠟步驟應徹底，否則無論進行那種染色都會發(fā)生困難。脫蠟時間要充分，若溶蠟劑使用過久應及時更換以免效率降低，若室溫過低，可將溶蠟劑置于溫箱中進行脫蠟。  2．蘇木素染液使用一段時間后表面易出現(xiàn)亮晶狀飄浮物，這可能是液體表面的過氧化物，必須過濾除去，以防沉渣污染組織切片。蘇木素液一般染過三、四百張切片后，著色力會減弱，著色不鮮艷，呈灰藍色時應及時更換新液。  3．染色的時間長短需依據(jù)：染劑對組織的染色作用，室溫條件，切片厚薄，固定液的類別，染液的新舊而進行調(diào)節(jié)。所以在染色時必須使用顯微鏡觀察染色程度以利掌握時間。  4．分化十分重要。分化步驟的準確也是染色成敗的關鍵，若分化失當則必然引起染色不勻或過淡，過深等現(xiàn)象，因此分化后一定要鏡檢，觀察胞核是否清晰，胞漿呈淡白色。否則需再次分化，不然一旦復染后，組織會呈紫藍色即“藍蓋紅”現(xiàn)象。  5．還原液不宜過濃，若堿性太強易使組織脫落故以淡為宜。  6．伊紅宜淡染，復染過深胞核會不清晰，影響鏡檢。 腦組織HE染色如何觀察？江蘇推薦的HE染色外包

HE染色試驗技術及注意事項。質(zhì)量好的HE染色

HE染色顯微鏡下見切片內(nèi)有大量水珠分析以及應對原因：切片經(jīng)梯度乙醇處理后沒有完全脫水，導致二甲苯透明中性樹膠封固后殘留大量水分。對策：移去蓋玻片，用二甲苯溶解封固劑如中性樹膠。將切片置入新鮮的無水乙醇中，待切片重新脫水完全后，用新二甲苯透明，中性樹膠封固。所有用于脫水和透明的液體，在使用一定時間以后，應即時更換。光鏡下切片某些區(qū)域難以聚焦分析以及應對原因：蓋玻片上可能有封固切片的封固劑。對策：移去蓋玻片，重新用干凈的蓋玻片封片質(zhì)量好的HE染色