江西值得信賴的HE染色報告

HE染色攻略：HE染色又稱為蘇木精-伊紅染色，染色后組織或細胞可以借助普通光學顯微鏡觀察與鑒別細胞凋亡與細胞壞死的一種染色方法。這種方法適用范圍***，對組織細胞的各種成分都可著色，便于***觀察組織構(gòu)造，而且適用于各種固定液固定的材料，染色后不易褪色可長期保存。經(jīng)過HE染色，細胞核被蘇木素染成藍紫色，細胞質(zhì)被伊紅染色呈粉紅色?？梢杂^察細胞結(jié)構(gòu)、組織層次等等。首先切片組織是否完整，組織有無損傷；然后看切片有無刀痕；***細胞核是否清晰可見，胞核與包漿要對比鮮明。常用HE染色試劑配制方法。江西值得信賴的HE染色報告

HE染色原理：易于被堿性或酸性染料著色的性質(zhì)稱為嗜堿性(basophilia)和嗜酸性(acidophilia)；而對堿性染料和酸性染料親和力都比較弱的現(xiàn)象稱為中性（neutrophilia)。構(gòu)成組織內(nèi)蛋白質(zhì)的氨基酸的種類很多，它們有不同的等電點。在普通染色法中，染色液的酸堿度為pH6左右，細胞內(nèi)的酸性物質(zhì)如細胞核的染色質(zhì)、腺細胞和神經(jīng)細胞內(nèi)的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及透明軟骨基質(zhì)等均被堿性染料染色，這些物質(zhì)稱為嗜堿性。而細胞質(zhì)中的其它蛋白質(zhì)如紅細胞中的血紅蛋白、嗜酸粒細胞的顆粒及膠原纖維和肌纖維等被酸性染料染色，這些物質(zhì)稱為嗜酸型。如果改變?nèi)旧旱乃釅A度，pH值升高時，則原來被酸性染料染色的物質(zhì)可變?yōu)槭葔A性；pH值降低時，原來被堿性染料染色的物質(zhì)則可變?yōu)槭人嵝?。所以說染色液的pH值可以影響染色的反應。脫氧核糖核酸（DNA）兩條鏈上的磷酸基向外，帶負電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍色，所以細胞核被染成藍色。湖南病理HE染色分析HE染色取材和樣本保存方式。

HE染色常見問題：Q5：細胞核呈棕紅色改變答：蘇木素染液過度氧化；或蘇木素染色后反藍不足導致。應該立即更換蘇木素染色液?；蛟诹鲃幼詠硭?一般自來水PH7.5-7.8)，或在稀釋的氨水溶液，或在0.2%碳酸氫鈉中適當浸泡，這些步驟均可一定程度地加強蘇木素染色后的反藍效果。Q6：伊紅染色較淡答：伊紅的PH改變了(PH可能已大于5)；或反藍液體未漂洗干凈，殘留后影響胞漿嗜酸性染色；或者切片太薄并且在隨后的脫水步驟停留過久。對策：檢查伊紅染色液PH，可采用乙酸調(diào)至4.6-5.0。根據(jù)以上提示，調(diào)整實驗步驟。

HE染色細胞質(zhì)過染分析及應對原因：（1）伊紅染色液濃度太高，特別是焰紅燃料、四溴四氯熒光素鈉的存在；（2）切片在伊紅染色時間過長；（3）切片在伊紅染色后經(jīng)乙醇脫水步驟時過的太快，而使乙醇分化伊紅的作用不能產(chǎn)生。對策：適當稀釋伊紅染色液，減少伊紅染色時間，或者使切片在乙醇脫水等步驟時，停留時間相對均勻。同樣，也要檢查切片的厚度是否合適。切片中出現(xiàn)藍黑色沉淀物分析及應對原因：蘇木精染色液中的金屬膜，黏附在玻片上。對策：每天染色前仔細過濾蘇木精染色液，或建議使用半氧化蘇木精染色液，如Gill蘇木精染色液,可以避免過多的金屬膜產(chǎn)生。腎臟組織HE染色如何觀察。

HE染色全名蘇木精—伊紅染色法，屬于化學染色法，其主要依靠蘇木精染液為堿性，主要使細胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍色；伊紅為酸性染料，主要使細胞質(zhì)和細胞外基質(zhì)中的成分著紅色。實驗過程：1、石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min，自來水洗。2、蘇木素染色：切片入蘇木素染液染3-5min，自來水洗，分化液分化，自來水洗，返藍液返藍，流水沖洗。3、伊紅染色：切片依次入85%、95%的梯度酒精脫水各5min，入伊紅染液中染色5min。4、脫水封片：切片依次放入無水乙醇I5min-無水乙醇II5min-無水乙醇Ⅲ5min-二甲Ⅰ5min-二甲苯Ⅱ5min透明，中性樹膠封片。5、顯微鏡鏡檢，圖像采集分析。結(jié)果判讀：細胞核呈藍色，細胞質(zhì)呈紅色HE染色觀察細胞形態(tài)變化。HE染色報告

HE染色的基本原理和結(jié)果分析。江西值得信賴的HE染色報告

HE染色骨組織的處理方式：組織里存有鈣鹽可妨礙用常規(guī)方法制作良好切片。骨組織及鈣化病灶，經(jīng)過固定后，需要先將鈣鹽除去使組織軟化，才能進行常規(guī)切片。如果脫鈣不全，則切片容易撕開或碎裂，損傷切片刀刀刃。脫去鈣鹽的過程，稱為脫鈣。骨組織固定24小時后，鋸下不超過0.5cm厚的薄骨片，以4%甲醛溶液固定后，進行脫鈣。骨組織過厚則需延長脫鈣時間，但長時間浸于強酸會影響切片染色效果。取材骨組織固定于10%甲醛溶液24小時后再鋸取厚度約0.5cm骨片固定以10%甲醛溶液固定2天脫鈣將組織置于脫鈣劑中，每日更換新鮮液，直至組織軟化為止除酸流水沖洗24小時脫水、浸蠟、切片進行常規(guī)脫水、透明、浸蠟、切片南京英瀚斯，專業(yè)的病理染色實驗服務平臺。江西值得信賴的HE染色報告