HE染色注意事項：1．組織切片的脫蠟步驟應徹底，否則無論進行那種染色都會發(fā)生困難。脫蠟時間要充分，若溶蠟劑使用過久應及時更換以免效率降低，若室溫過低，可將溶蠟劑置于溫箱中進行脫蠟。  2．蘇木素染液使用一段時間后表面易出現(xiàn)亮晶狀飄浮物，這可能是液體表面的過氧化物，必須過濾除去，以防沉渣污染組織切片。蘇木素液一般染過三、四百張切片后，著色力會減弱，著色不鮮艷，呈灰藍色時應及時更換新液。  3．染色的時間長短需依據(jù)：染劑對組織的染色作用，室溫條件，切片厚薄，固定液的類別，染液的新舊而進行調(diào)節(jié)。所以在染色時必須使用顯微鏡觀察染色程度以利掌握時間。  4．分化十分重要。分化步驟的準確也是染色成敗的關鍵，若分化失當則必然引起染色不勻或過淡，過深等現(xiàn)象，因此分化后一定要鏡檢，觀察胞核是否清晰，胞漿呈淡白色。否則需再次分化，不然一旦復染后，組織會呈紫藍色即“藍蓋紅”現(xiàn)象。  5．還原液不宜過濃，若堿性太強易使組織脫落故以淡為宜。  6．伊紅宜淡染，復染過深胞核會不清晰，影響鏡檢。 專業(yè)的HE染色服務平臺，南京英瀚斯生物。湖南結(jié)果客觀的HE染色分析

HE染色細胞核灰藍原因：（1）組織處理溫度過高、過熱，在石蠟停留的時間過長；（2）固定時間太短，接下來就直接在高濃度的乙醇中行脫水處理。對策：理論上來說，加熱處理*在組織浸蠟步驟才使用，組織不能在熱的蠟液中停留過長時間。如果由于某些原因不能進行下步包埋處理，完成浸蠟處理后的組織，可將組織連同塑料包埋盒一并放置在室溫空氣中，冷卻凝固，以備包埋。待需要包埋時再重新加溫直至石蠟融化即可。組織在處理前必須確保固定良好，脫水比較好能從低濃度的乙醇開始。四川推薦的HE染色檢測常用HE染色試劑配制方法。

HE染色主要是為通細胞及胞核形態(tài)、大小來區(qū)別各種細胞的，并不是直接通過顏色來區(qū)分的，HE染色細胞壞死的三種改變：（1）細胞核的改變：這是細胞壞死的主要形態(tài)標志，表現(xiàn)為核濃縮，核碎裂，核溶解。（2）細胞質(zhì)的改變：由于胞質(zhì)發(fā)生凝固或溶解，HE染色呈深紅色顆粒狀，如肝細胞壞死出現(xiàn)的嗜酸性小體醫(yī)學|教育網(wǎng)搜集整理。（3）間質(zhì)的改變：由于各種溶解酶的作用，基質(zhì)崩解、膠原纖維腫脹、斷裂或液化，與壞死的細胞融合成一片，呈紅染的顆粒狀無結(jié)構(gòu)物質(zhì)。南京英瀚斯生物

HE染色觀察細胞凋亡，凋亡檢測中形態(tài)學方法是**直觀、可靠的方法之一。對組織和各種細胞進行染色后，在光學顯微鏡、熒光顯微鏡或電子顯微鏡下觀察，通過觀察細胞的形態(tài)或染色的類型來判斷凋亡的發(fā)生與否。細胞涂片或細胞甩片的制備：對于貼壁細胞，可將蓋玻片放于培養(yǎng)器皿中，讓培養(yǎng)細胞長于玻片上，然后用藥物誘導細胞凋亡后取出，用4%多聚甲醛固定5min。對于懸浮細胞，用藥物誘導細胞凋亡后，離心1000r/min收集細胞，用PBS洗2次，收集調(diào)整細胞數(shù)為1X105/ml，涂片或用離心甩片，用4%多聚甲醛固定5min；在光學顯微鏡下，貼壁細胞由原來的梭形或多角形變小、變圓，核呈藍色或藍黑色，胞漿呈淡紅色，核固縮、破碎，形成凋亡小體等。懸浮細胞，整個細胞皺縮，核固縮，破碎，形成凋亡小體，染色質(zhì)顏色加深等。肝臟組織HE染色如何觀察。

HE染色是蘇木精 — 伊紅染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ，簡稱HE染色法 ，石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一 。蘇木精染液為堿性 ，主要使細胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核酸著紫藍色 ；伊紅為酸性染料 ，主要使細胞質(zhì)和細胞外基質(zhì)中的成分著紅色 。HE染色法是組織學、胚胎學、病理學教學與科研中**基本、使用*****的技術(shù)方法。由于組織或細胞的不同成分對蘇木精的親和力不同及染色性質(zhì)不一樣。經(jīng)蘇木精染色后，細胞核及鈣鹽粘液等呈藍色，可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍，如處理適宜，可使細胞核著清楚的深藍色，胞漿等其它成分脫色。再利用胞漿染料伊紅染胞漿，使胞漿的各種不同成分又呈現(xiàn)出深淺不同的粉紅色。故各種組織或細胞成分與病變的一般形態(tài)結(jié)構(gòu)特點均可顯示出來。HE染色試驗技術(shù)及注意事項。湖南結(jié)果客觀的HE染色分析

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HE染色常見問題：切片染色不均勻，有片狀的弱著**存在答：（1）取材時組織太厚，固定過久，導致深部組織固定不佳，而表淺組織過度固定，而透明、脫水、浸蠟均是如此，這樣在后期染色時就會出現(xiàn)染色不均勻。應該將厚的組織剖開固定。（2）制片過程有問題，切片厚薄不一，或者有刀痕，或組織與玻片間存在氣泡。同一張切片厚薄不一，一般都是在制片時，刀片固定不佳或刀片鈍或刀片與組織角度不佳（一般比較好角度為5°）（3）脫蠟前未烘烤，脫蠟時間過短或脫蠟液使用過久，導致脫蠟不徹底。（4）染色液過少，著色不均勻；或染色時部分組織干涸而另一部分濕潤，這樣會導致組織吸附染料的能力不一。（5）分化不當。南京英瀚斯，專業(yè)的病理染色實驗服務平臺。湖南結(jié)果客觀的HE染色分析